阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种在制备治疗胶质母细胞瘤的抗肿瘤药物，其所述药物为阿伐麦布。本发明专利技术的该药物通过线粒体通路诱导凋亡和来实现它抗胶质母细胞瘤的活性。本发明专利技术的该药物是通过非特异性阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡。本发明专利技术的该药物是通过p53依赖的途径诱导细胞周期阻滞在G0/G1期和G2/M期。

The application of avamib in the preparation of drugs for the prevention or treatment of glioblastoma

【技术实现步骤摘要】
阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤药物中的应用
本专利技术涉及一种抗肿瘤药物，具体涉及阿伐麦布及其在制备预防或治疗胶质母细胞瘤的药物中的应用。
技术介绍
神经胶质瘤(glioma)是最常见的原发性颅内肿瘤,约占颅内肿瘤的81％。其中，恶性胶质瘤(glioblastoma，GBM)是最常见的胶质瘤(约占所有胶质瘤的45％)，具有病程短和死亡率高的特点。尽管恶性胶质瘤的发病率(4.67-5.73/100,000)不及大多数其它系统的肿瘤,但是它生长迅速并且可以侵袭瘤周重要的生命调控中枢。替莫唑胺(TMZ)是恶性胶质瘤最有效的化疗药物，TMZ同步放疗联合辅助化疗是恶性胶质瘤治疗的标准治疗方案，但是仅能将2年生存率由10.4％提高到26.5％，中位生存期不超过15个月,且会产生耐药性。因此，寻求新药、新靶点和新机制对GBM的治疗极为重要。本专利技术从TCGA数据库中下载神经胶质瘤(包括5个正常脑组织样本，169个神经胶质瘤的脑组织样本)，生物信息学分析后将差异基因上传到Cmap数据库中，寻找能够逆转差异基因变化的小分子。阿伐麦布(Avasimibe)是虚拟筛选中排名较高、且细胞实验验证中效果较好的小分子。阿伐麦布即N-(2,6-二异丙基苯氧基)磺酰-2-(2,4,6-三异丙基苯基)乙酰胺，是胆固醇酯化酶ACAT的小分子抑制剂，可以清除血管斑块，用于治疗动脉粥样硬化。阿伐麦布已在一些临床试验中进行测试用来治疗动脉粥样硬化，具有很好的人类安全记录。已有研究表明，阿伐麦布能够用于肿瘤免疫治疗，通过促进T细胞信号传导和杀伤起到抗肿瘤效应。到目前为止，关于阿伐麦布通过线粒体通路诱导胶质母细胞瘤的凋亡并且通过p53依赖的途径非特异性阻滞细胞周期来发挥抗肿瘤作用还未见报道。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是提供一种阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤药物中的应用。为解决本专利技术的技术问题，本专利技术提供如下技术方案：本专利技术的技术方案一方面是提供了一种式I所示的阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤的药物中的应用。进一步的，所述的阿伐麦布通过线粒体通路诱导细胞凋亡来实现抗肿瘤作用。所述的阿伐麦布通过非特异性阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡。所述的阿伐麦布通过p53依赖的途径诱导细胞周期阻滞在G0/G1期和G2/M期。阿伐麦布(N-(2,6-二异丙基苯氧基)磺酰-2-(2,4,6-三异丙基苯基)乙酰胺)的结构式如Ⅰ所示。本专利技术所述的治疗胶质母细胞瘤的药物，优选的情况下，所述阿伐麦布的有效浓度为3～30μM；更优选的情况下，则为7～25μM。本专利技术所述的治疗胶质母细胞瘤的药物，优选的情况下，所述阿伐麦布的稀释溶剂为二甲基亚砜。本专利技术的技术方案另一方面提供了含有阿伐麦布的药物组合物在制备预防或治疗胶质母细胞瘤的药物中的应用，所述的药物组合物含有有效剂量的阿伐麦布及药学上可接受的载体或赋形剂。进一步的，所述的阿伐麦布通过线粒体通路诱导细胞凋亡来实现抗肿瘤作用。所述的阿伐麦布通过非特异性阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡。所述的阿伐麦布通过p53依赖的途径诱导细胞周期阻滞在G0/G1期和G2/M期。本专利技术的治疗胶质母细胞瘤的药物可采用本领域常规的方法制成适于胃肠道给药或非胃肠道给药的制剂，优选将该药物组合物制成胃肠道给药的制剂，其制剂形式可以为常规片剂、胶囊、控释或缓释制剂。根据制剂形式和制剂规格的不同，本专利技术药物组合物在制剂中的含量可在1-99wt％之间进行调整，优选10-90wt％。此外，本专利技术药物的给药剂量可根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式进行适当变化，但以保证该药物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。有益技术效果(1)虽然已有文献报道阿伐麦布在胶质母细胞瘤方面的抗肿瘤活性报道。但关于其具体的抗肿瘤机制并没有报道。本专利技术提出的阿伐麦布通过线粒体通路诱导胶质母细胞瘤的凋亡并且通过p53依赖的途径非特异性阻滞细胞周期来发挥抗肿瘤作用还未见报道。(2)胶质母细胞瘤是恶性程度最高(WHOIV级)、侵袭性最强的胶质瘤，在原发性恶性中枢神经系统肿瘤中发病率最高。一方面由于其瘤体侵袭生长或位于重要功能区及脑深部的特性，使肿瘤难以全切；另一方面因为血脑屏障的阻挡，目前用于治疗胶质母细胞瘤的药物很少，且疗效并不理想。因此，本申请发现该化合物明显的抗胶质母细胞瘤活性，可以作为治疗胶质母细胞瘤的候选药物。附图说明图1是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞不同时间后的细胞存活率变化；图2是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞48h后的细胞凋亡变化；图3是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞48h后的细胞线粒体膜电位变化；图4是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞48h后的caspase3/7蛋白活化水平；图5是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞48h后细胞凋亡相关蛋白的变化；图6是展示不同浓度的阿伐麦布作用U251-MG细胞48h后细胞周期相关蛋白的变化；图7是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞不同时间后的细胞存活率变化；图8是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞48h后的细胞凋亡变化；图9是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞48h后的细胞线粒体膜电位变化；图10是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞48h后的caspase3/7蛋白活化水平；图11是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞48h后细胞凋亡相关蛋白的变化；图12是展示不同浓度的阿伐麦布作用U87-MG细胞48h后细胞周期相关蛋白的变化；具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的阐述，但本专利技术并不受限于此，在不脱离本专利技术的思想和宗旨的情况下，对本专利技术的技术方案所做的任何变化都应落入本专利技术权利要求书所限定的范围内。实施例1～2中所用的生物材料、药品和实验方法如下：细胞：U87-MG和U251-MG(人胶质母细胞瘤细胞株)、可从商业途径中获得，例如中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。药品：准确称量阿伐麦布(北京药渡经纬科技有限公司)，以二甲基亚砜溶解，配成阿伐麦布浓度为30mmol/L的贮存液，在-20℃下保存，使用时用新鲜的培养基稀释到合适的浓度，实施例1～2中使用的培养基为DMEM高糖培养基。CCK8检测细胞增殖：细胞于含10％胎牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L链霉素的DMEM高糖培养基中，37℃、5％CO2的条件下培养。将细胞用胰酶消化后，用血细胞计数板进行计数。按每孔100μL体积接种于96孔细胞培养板(细胞接种量8000-10000个/孔，根据细胞大小和生长速度选择)，5％CO2、37℃培养箱中培养24小时后加入不同浓度梯度的阿伐麦布，5％CO2、37℃培养箱中孵育48小时。弃去培养基，用PBS洗一次，而后每孔加入含有1/10CCK8的无血清本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如式I所示的阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤药物中的应用，/n

【技术特征摘要】
1.如式I所示的阿伐麦布在制备预防或治疗胶质母细胞瘤药物中的应用，





2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的阿伐麦布通过线粒体通路诱导细胞凋亡来实现抗肿瘤作用。


3.根据权利要求2的应用，其特征在于，所述的阿伐麦布通过非特异性阻滞细胞周期从而进一步诱导...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金华，刘金宜，杜冠华，庞晓丛，李婉，
申请(专利权)人：中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11