胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒及检测方法，包括CTCs分离试剂和CTCs鉴定试剂；CTCs分离试剂包括偶联EpCAM和CSV单克隆抗体包被的免疫磁珠，CTCs鉴定试剂包括封闭液、缓冲液、固定液、透化液、染色液和封片剂。将CTCs分离试剂与含有CTCs的血液样本混合，得到分离的CTCs；将分离的CTCs与CTCs鉴定试剂混合，观察细胞染色情况，计算血液样本中的CTCs数目。本发明专利技术可同时对上皮性和间皮性CTCs进行分离，联合多种胃肠恶性肿瘤特异性抗体对富集后的细胞进行鉴定，比单一使用CK抗体的敏感度更高。大部分患者能捕捉到数十至数百个CTCs，与现有临床检测方法相比，CTCs捕捉效率大幅提升，为CTCs下游分子分析奠定了物质基础。

Detection kit and method of circulating tumor cells in gastrointestinal cancer

【技术实现步骤摘要】
胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒及检测方法
本专利技术涉及细胞染色检测领域，尤其涉及的是一种胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
现有技术中，胃肠道恶性肿瘤是我国临床最常见消化系统恶性肿瘤，其发病率和死亡率远高于世界平均水平，且呈发病率和年轻化双线升高趋势。影响胃肠道恶性肿瘤预后的重要指标之一是肿瘤分期，早期胃肠道恶性肿瘤经治疗后，患者的5年存活率可达90～95％以上，但由于胃肠道恶性肿瘤发病早期70％以上患者无明显症状，在我国胃肠道恶性肿瘤早期检出率仅不足10％，绝大多数患者确诊时已为中晚期，此时肿瘤极易发生血管与淋巴管转移，疗效与预后较差，5年生存率长期徘徊在10％左右。目前，胃肠道恶性肿瘤常规临床检测手段有超声、X射线、血清肿瘤标志物、内镜、CT、组织活检等，但传统的检测方法和技术很难发现早期和微小转移病灶，例如影像学无法发现早期微转移；骨扫描发现转移病灶时，疾病已进展至晚期；肿瘤评分和临床分期的综合判断只能判断预后，无法实时提示肿瘤转移情况。CA125、CA199、CA724、CEA等血清肿瘤标本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：包括CTCs分离试剂和CTCs鉴定试剂；所述CTCs分离试剂包括偶联EpCAM和CSV单克隆抗体包被的免疫磁珠，所述CTCs鉴定试剂包括封闭液、缓冲液、固定液、透化液、染色液和封片剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：包括CTCs分离试剂和CTCs鉴定试剂；所述CTCs分离试剂包括偶联EpCAM和CSV单克隆抗体包被的免疫磁珠，所述CTCs鉴定试剂包括封闭液、缓冲液、固定液、透化液、染色液和封片剂。


2.根据权利要求1所述的胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：所述染色液包括多种免疫荧光染色单克隆抗体。


3.根据权利要求2所述的胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：所述免疫荧光染色单克隆抗体为CK、CEA、CA72-4、CD45。


4.根据权利要求1所述的胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：所述封片剂含有细胞核染料。


5.根据权利要求4所述的胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测试剂盒，其特征在于：所述细胞核染料为DAPI。


6.一种胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1、CTCs分离：将CTCs分离试剂与含有CTCs的血液样本混合，使免疫磁珠与CTCs结合，去除液体后得到分离的CTCs；
S2、CTCs鉴定：将分离的CTCs与CTCs鉴定试剂混合，观察细胞染色情况，计算血液样本中的CTCs数目。


7.根据权利要求6所述的胃肠道恶性肿瘤循环肿瘤细胞检测方法，其特征在于：所述S2中，还...

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊，王四化，
申请(专利权)人：深圳天烁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44