一种甲基睾丸素高效转化生产11α-羟基-甲基睾丸素的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种11α‑羟基‑甲基睾丸素的生物合成方法。具体涉及生产菌株为经ARTP诱变与ARTP‑LiCl复合诱变选育获得的蓝色犁头霉CGMCC 14124，生产原料为甲基睾丸素(MT)。本发明专利技术利用蓝色犁头霉CGMCC 14124的选择性羟基化能力，将甲基睾丸素加入培养成熟的发酵培养基中，可以有效合成11α‑羟基‑甲基睾丸素。本发明专利技术利用微生物转化法实现了11α‑羟基‑甲基睾丸素的绿色高效合成，简化操作，降低生产成本和环境污染。

A highly efficient method for the production of 11 \u03b1 - hydroxy - methyltestosterone

【技术实现步骤摘要】
一种甲基睾丸素高效转化生产11α-羟基-甲基睾丸素的方法
：本专利技术涉及生物
，具体涉及利用微生物发酵法在11α-羟基-甲基睾丸素生产方面的应用。
技术介绍
：甾体化合物是含有四个环戊烷多氢菲的萜类化合物，广泛存在于动植物及一些微生物细胞中。甾体化合物大都具有重要的生理活性，对机体起着非常重要的调节作用，广泛应用于疾病治疗和医疗保健，是仅次于抗生素的第二大类药物。11α-羟基甲基睾丸素是生物体内重要的活性物质，作为甲基睾丸丸素的羟基化衍生物，具有更强的同化作用，抑制蛋白质的异生，增进食欲，临床时适用于慢性消耗性疾病，严重感染，创伤、烧伤、手术后等的康复，对生命代谢活动具有重要调节作用同时也可作为其他甾体激素的原料中间体。目前工业上多采用化学合成的方法生产，存在工艺复杂、收率低、生产成本高等问题，且大量化学试剂的使用对生态环境和操作人员都有较大危害，这些限制了大规模工业化生产。自微生物首次合成甾体激素进入商业化以来，微生物转化已经广泛应用于许多甾体药物或药物中间体合成。蓝色犁头霉是目前甾体药物工业化生产中常见的菌株，且经ARTP诱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲基睾丸素高效转化生产11α-羟基-甲基睾丸素的方法，其特征在于，以蓝色犁头霉CGMCC.14124为生产菌株，经过孢子种子培养、发酵培养及生物转化底物甲基睾丸素得到产物11α-羟基-甲基睾丸素，具体步骤如下。/n(1)种子培养/n将蓝色犁头霉孢子悬浮液1mL接种于种子培养基中，在温度26-30℃，转速180-210r/min条件下培养至pH到3.6-4.0时，制得蓝色犁头霉种子液。/n(2)发酵培养/n将种子培养液按7％-18％接种量转接入发酵培养基，25-30℃，170-200r/min发酵培养5-8h后，先使用0.5-1.0g/L的MT进行诱导，待培养pH至3.8时，调节发酵液p...

【技术特征摘要】
1.一种甲基睾丸素高效转化生产11α-羟基-甲基睾丸素的方法，其特征在于，以蓝色犁头霉CGMCC.14124为生产菌株，经过孢子种子培养、发酵培养及生物转化底物甲基睾丸素得到产物11α-羟基-甲基睾丸素，具体步骤如下。
(1)种子培养
将蓝色犁头霉孢子悬浮液1mL接种于种子培养基中，在温度26-30℃，转速180-210r/min条件下培养至pH到3.6-4.0时，制得蓝色犁头霉种子液。
(2)发酵培养
将种子培养液按7％-18％接种量转接入发酵培养基，25-30℃，170-200r/min发酵培养5-8h后，先使用0.5-1.0g/L的MT进行诱导，待培养pH至3.8时，调节发酵液pH至5.6-6.0,补齐剩余底物使得总投料浓度为2-6g/L，开始转化。
(3)底物转化
底物加入发酵液后，在25-32℃，150-220r/min条件下转化40-48h。


2.如权利要求1所述的一种甲基睾丸素高效转化生产11α-羟基-甲基睾丸素的方法，其特征在于，所述发酵培养基组成(g/L)为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：申雁冰，王敏，骆健美，王喜波，王璐，李梦涵，夏梦雷，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12