细胞片形成构件、细胞片形成构件的制造方法、及细胞片的制造方法技术

一种细胞片形成构件，其具备用于形成细胞片的表面，表面具备多个平坦部和多个凹凸部。各平坦部具有在第1方向延伸的形状，且多个平坦部在整个表面沿着与第1方向交叉的第2方向排列。凸部和凹部中的任一方为阶梯构造，各凹凸部包含将相邻的平坦部之间填埋的多个阶梯构造，阶梯构造的间距为100nm以上10μm以下。

Cell sheet forming component, manufacturing method of cell sheet forming component and manufacturing method of cell sheet

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞片形成构件、细胞片形成构件的制造方法、及细胞片的制造方法
本专利技术涉及一种用于形成细胞片的细胞片形成构件、细胞片形成构件的制造方法、及细胞片的制造方法。
技术介绍
以往已提出各种用于培养细胞的方法。例如专利文献1记载的细胞培养方法，使用设有用细微的侧壁区划的多个空间构造的细胞培养用基材，使空间构造相互连通的方向与细胞的伸长方向一致，从而控制细胞的配向性。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2006-191809号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题在上述的细胞培养用基材中，侧壁所具备的侧壁面、上表面等平坦面作为细胞培养的类似基底发挥作用，如此一来，能够使用细胞培养用基材培养的细胞的伸长方向与平坦面的延伸方向相同。另一方面，除了侧壁面、上表面之外，空间构造的底面也是平坦面，而且空间构造的底面为与侧壁面相连的面，也会往与侧壁面的延伸方向、上表面的延伸方向不同的方向扩展。因此，在上述的细胞培养用基材中，细胞的伸长方向容易集中在各平坦面的连接方向、各平坦面的扩展方向，也就是侧壁面的延伸方向以外的其他方向，其结果，从使细胞的伸长方向相同的观点而言，依然有课题尚待解决。本专利技术是有鉴于上述实情而完成的，其目的在于提供一种能够提高细胞片中的细胞的配向性的细胞片形成构件、细胞片形成构件的制造方法、及细胞片的制造方法。用于解决课题的手段用于解决上述课题的细胞片形成构件，其具备用于形成细胞片的表面，所述表面具备多个平坦部和多个凹凸部。各平坦部具有往第1方向延伸的形状，且所述多个平坦部在整个所述表面沿着与所述第1方向交叉的第2方向排列。此外，凸部和凹部的任一方为阶梯构造，各凹凸部包含将相邻的所述平坦部之间填埋的多个所述阶梯构造，所述阶梯构造的间距为100nm以上10μm以下。用于解决上述课题的细胞片形成构件的制造方法包含如下步骤：形成凹版的步骤；及通过所述凹版的转印，形成用于形成细胞片的细胞片形成构件的表面的步骤。所述凹版具备多个平坦部和凹凸部，该多个平坦部具有往第1方向延伸的形状，且在整个所述表面沿着与所述第1方向交叉的第2方向排列，凸部和凹部的任一方为阶梯构造，该凹凸部包含将相邻的所述平坦部之间填埋的多个所述阶梯构造，所述阶梯构造的间距为100nm以上10μm以下。此外，所述形成凹版的步骤包含使用光刻法、胶体蚀刻法、阳极氧化法、及干涉曝光法的至少1种来形成所述凹凸部。用于解决上述课题的细胞片的制造方法包含如下步骤：使细胞粘接在所述细胞片形成构件的表面，在所述细胞片形成构件的表面形成细胞片的步骤，该细胞对于所述平坦部及所述凹凸部中任一方的粘接比对于另一方的粘接具有优势；及从所述细胞片形成构件的表面剥离细胞片的步骤。上述各构成中，平坦部和凹凸部构成用于形成细胞片的表面，且具有一方被另一方区划的关系。因此，对于平坦部的粘接具有优势的细胞也好，或对于凹凸部的粘接具有优势的细胞也好，只要细胞优先对一方的构造体粘接，即对另一方的构造体的粘接形成劣势。因此，在一方的构造体区划另一方的构造体的细胞片形成构件的构造上，配合平坦部与凹凸部之间粘接性不同的细胞的性质，细胞的伸长方向会在双方的构造体的延伸方向、即第1方向上相同。其结果，在往二维方向扩展的细胞片中，能够使细胞的伸长方向在一维方向相同，也就是说能够使细胞的配向性提高。其中，由于细胞片形成构件的表面具备平坦部和凹凸部，对于平坦部的粘接具有优势的细胞和对于凹凸部的粘接具有优势的细胞这两者能够适用共通的细胞片形成构件，也就是说能够提高细胞片形成构件的泛用性。在上述细胞片形成构件中，也可以构成为，所述阶梯构造为凸部，所述凹凸部在介于相邻的所述平坦部之间的凹部的底面具备多个所述凸部，各凸部的前端面与所述平坦部齐平。或者，也可以构成为，在所述细胞片形成构件的厚度方向中，所述凹凸部的前端面的高度与所述平坦部的高度间的差为0.5μm以下，较佳为0.3μm以下。根据这种构成，由于凹凸部的顶面与平坦部成为齐平，或者凹凸部的前端面与平坦部之间的高低差为0.5μm以下，较佳为0.3μm以下，以此方式覆盖凹凸部与平坦部所形成的细胞片中，能够提高其平坦性。在上述细胞片形成构件中，也可以构成为，从与所述表面对向的方向观看，所述阶梯构造具有圆形状，且所述阶梯构造的直径为所述间距的50％以上100％以下，所述阶梯构造的长宽比为0.1以上10以下。根据这种构成，对于平坦部的粘接的优势性和对于凹凸部的粘接的优势性将视细胞所具有的粘接性而容易适当地显现。因此，能够进一步容易地获得使细胞的配向性提高的上述效果。在上述细胞片形成构件中培养的细胞并无特别限定，以生物体内特别是具有配向性而存在之成肌细胞、成纤维细胞、及心肌细胞的至少1种为宜。所述平坦部的短边方向的长度为10μm以上50μm以下，相邻的所述平坦部之间的所述短边方向的长度也可以为10μm以上50μm以下。根据这种构成，平坦部的短边方向的长度及凹凸部的短边方向的长度具有适合成肌细胞、成纤维细胞、及心肌细胞的配向控制的尺寸。因此，在成肌细胞片、成纤维细胞片、及心肌细胞片中能够提高各自的配向性。上述细胞片形成构件的表面也可以具有亲水性或疏水性。上述细胞片形成构件的表面也可以由金属或有机物构成。附图说明图1(a)～(d)为表示细胞片形成构件的一实施方式中的该构件的构成的图，图1(a)为同时表示细胞片形成构件的构造和盘体的立体图，图1(b)为将细胞片形成构件的表面的一部分放大示出的立体图，图1(c)为将细胞片形成构件的表面的一部分放大示出的俯视图，图1(d)为将细胞片形成构件的一部分放大示出的局部剖面图。图2为用于说明图1的细胞片形成构件的制造方法的一例的工艺图。图3(a)～(c)为用于说明使用图1的细胞片形成构件制造细胞片的过程的示意图。图4(a)～(c)为用于说明使用图1的细胞片形成构件制造细胞片的过程的示意图。图5(a)～(c)为用于说明使用图1的细胞片形成构件制造细胞片的过程的示意图。图6为使用图1的细胞片形成构件培养出的成肌细胞的荧光染色图像。图7为作为参考例之使用细胞培养盘培养出的成肌细胞的荧光染色图像。图8为用扫描式电子显微镜对图1的细胞片形成构件的表面进行拍摄的图像。图9为将图8的图像的一部分放大示出的图像。具体实施方式以下针对细胞片形成构件、细胞片形成构件的制造方法、及细胞片的制造方法的一实施方式进行说明。首先说明细胞片形成构件的构成，接着再说明细胞片形成构件的制造方法、细胞片的制造方法。[细胞片形成构件]如图1(a)所示，细胞片形成构件100例如为载置于培养盘(Schale)的培养皿110中的片材。培养盘将细胞悬浮液保持在由培养皿110和盖120所包围的空间。细胞悬浮液所包含的细胞的一例为成肌细胞(myoblast)、成纤维细胞(fibroblast)、心肌细胞。如图1(b)所示，细胞片形成构件100的表面1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞片形成构件，其具备用于形成细胞片的表面，/n所述表面具备多个平坦部和多个凹凸部，/n各平坦部具有往第1方向延伸的形状，且所述多个平坦部在整个所述表面沿着与所述第1方向交叉的第2方向排列，/n凸部和凹部的任一方为阶梯构造，/n各凹凸部包含将相邻的所述平坦部之间填埋的多个所述阶梯构造，所述阶梯构造的间距为100nm以上10μm以下。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170823 JP 2017-160545;20180209 JP 2018-0219931.一种细胞片形成构件，其具备用于形成细胞片的表面，
所述表面具备多个平坦部和多个凹凸部，
各平坦部具有往第1方向延伸的形状，且所述多个平坦部在整个所述表面沿着与所述第1方向交叉的第2方向排列，
凸部和凹部的任一方为阶梯构造，
各凹凸部包含将相邻的所述平坦部之间填埋的多个所述阶梯构造，所述阶梯构造的间距为100nm以上10μm以下。


2.如权利要求1所述的细胞片形成构件，其中，
所述阶梯构造为凸部，
所述凹凸部在介于相邻的所述平坦部之间的凹部的底面具备多个所述凸部。


3.如权利要求2所述的细胞片形成构件，其中，
在所述细胞片形成构件的厚度方向，所述凹凸部中的前端面的高度与所述平坦部的高度间的差为0.5μm以下。


4.如权利要求2或3所述的细胞片形成构件，其中，
在所述细胞片形成构件的厚度方向，所述凹凸部中的前端面的高度为所述平坦部的高度以下。


5.如权利要求1～4中任一项所述的细胞片形成构件，其中，
从与所述表面对向的方向观看，所述阶梯构造具有圆形状，且所述阶梯构造的直径为所述间距的50％以上100％以下，
所述阶梯构造的长宽比为0.1以上10以下。


6.如权利要求1～5中任一项所述的细胞片形成构件，其中，

【专利技术属性】
技术研发人员：得能寿子，本乡弘毅，筱塚启，
申请(专利权)人：王子控股株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP