【技术实现步骤摘要】
一种新型的硅球上超支化放大的荧光信号探针及其制备和应用
:本专利技术涉及一种新型的硅球上超支化放大的荧光信号探针;以及所述荧光信号探针的制备方法及其检测Cu2+的分析应用。
技术介绍
:荧光法具有背景干扰低、成本低、灵敏度高和线性范围宽等多种优点,是检测Cu2+的理想技术。此外,测定Cu2+还使用了基于化学的识别方法,如Cu(I)催化的点击化学反应[Shen,Q.P.et.al.Biosens.Bioelectron.2013,41,663-668.]以及其他特定试剂[Li,F.;Wang,J.et.al.Biosens.Bioelectron.2013,39,82-87]。从HCR进化而来的超分化杂交链式反应(HB-HCR)可以在等温环境下实现,HB-HCR可以产生许多不同长度的树突状DNA纳米结构,具有更高的扩增效率。脱氧核糖核酸自组装树突状DNA纳米结构因其具有良好的生物相容性、结构稳定性、合成方便,在生物和生物医学领域都备受关注[Hu,Y.;Chen,Z.et.al.DrugDelivery2017,24,1 ...
【技术保护点】
1.一种新型的硅球上超支化放大的荧光信号探针,其特征是:利用点击化学反应引发的步行器放大技术结合超支化杂交链式反应(HB-HCR)构建了树枝状扩增的荧光平台,实现了对Cu
【技术特征摘要】
1.一种新型的硅球上超支化放大的荧光信号探针,其特征是:利用点击化学反应引发的步行器放大技术结合超支化杂交链式反应(HB-HCR)构建了树枝状扩增的荧光平台,实现了对Cu2+的灵敏检测。目标Cu2+首先引发点击化学反应和DNA步行器放大过程,将Cu2+转化为大量的DNAS3产物。通过DNAS3与SiO2微球上H1杂交反应,引发了发夹H2、HS-DNA、H3-DNA和LT-DNA之间的超支化杂交链式反应(HB-HCR),组装成新型的树枝状DNA结构,负载大量的荧光Cy5,实现了对Cu2+放大信号的超灵敏荧光检测。
2.一种制备权利要求1所述的硅球上超支化放大的荧光信号探针的方法和应用,其特征方法由下列步骤组成:
步骤1.基于DNA步行器的放大过程:10μL磁珠(MB)、80μLDNA酶(1μM)、4μLS1(1μM)混合后在37℃下温育12h,磁分离得到的MB-DNA分散到80μLPBS(0.1M,pH7.4)。然后取8μLS2(1μM)、不同浓度的Cu2+、1μLAA(1...
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