提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法技术

本发明专利技术提供一种提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，步骤为：1、称取蛋白胨、葡萄糖g、琼脂g，加入蒸馏水煮沸并使其完全溶解，高压灭菌，倒平板、平板划线接种黑曲霉，将接种好黑曲霉的培养基于30℃培养；2、取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水悬浮黑曲霉孢子，调节悬浮液浓度，备用；3、称取藜麦种子粉末1g，在121℃下灭菌20min，接种3～7wt％的步骤二得到的黑曲霉悬浮液，加入料液比为1:0.8～1:1.3的蒸馏水，并在27℃～35℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d～5d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。本发明专利技术将黑曲霉发酵法应用于藜麦种子的发酵过程，能安全有效地提高藜麦种子的总黄酮含量及抗氧化活性，并具有方法简单，成本低的优势。

Fermentation method for improving total flavonoids content and antioxidant activity of quinoa seeds

【技术实现步骤摘要】
提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法
本专利技术涉及涉及一种提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，尤其涉及一种用于提高藜麦种子的总黄酮含量与抗氧化活性的黑曲霉发酵方法，属于食品发酵方法

技术介绍
藜麦作为一种单体植物就可以满足人体的基本营养需求的食物，它不仅氨基酸配比均衡，蛋白质含量高，血糖生成指数低，且富含维生素、矿物质及生物活性物质。藜麦的抗炎、抗病毒、抗癌防癌、降血脂、降血压、降胆固醇、防止动脉粥样硬化、抗氧化等药理作用主要与其黄酮类及多酚类成分有关。但是，根据现有报道，国内外对藜麦的研究大多集中在提取工艺的优化方面，因此，探究提高藜麦种子总黄酮含量的方法具有重大的意义。本专利技术在微生物转化理论指导下，借助黑曲霉活性强、发酵过程中产酶丰富且催化效率高的特性，将黑曲霉固体发酵法应用于藜麦种子的发酵过程中，来提高藜麦种子的总黄酮含量及抗氧化活性，为藜麦的利用及开发提供更多的理论依据。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的问题，本专利技术在微生物转化理论指导下，借助黑曲霉活性强、发酵过程中产酶丰富且催化效率高的特性，将黑曲霉固体发酵法应用于藜麦种子的发酵过程中，来提高藜麦种子的总黄酮含量及抗氧化活性。为了实现上述的技术目的，本专利技术采用如下的技术方案。提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，包括以下的步骤：步骤1，将蛋白胨、葡萄糖、琼脂溶解于蒸馏水中，然后将制备好的沙氏培养基分装，灭菌，倒平板、平板划线，将接种好黑曲霉的培养基培养，至长满平板，得到培养好的黑曲霉。步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水需悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度，备用。步骤3，将藜麦种子粉末灭菌，接种3％～7％的步骤2得到的黑曲霉悬浮液，以藜麦种子粉末为料加入料液比为1:0.8～1:1.3的蒸馏水，并在27℃～35℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d～5d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。按照上述的提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，包括以下的步骤：步骤1，称取蛋白胨6g、葡萄糖24g、琼脂12g置于1000mL烧杯中，加入600mL蒸馏水煮沸并使其完全溶解，将制好的沙氏培养基分装于具塞三角瓶中，在121℃条件下进行高压灭菌20min。倒平板、平板划线，将接种好黑曲霉的培养基于30℃培养，至长满平板，得到培养好的黑曲霉。步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度，使其OD600＝2.0，备用。步骤3，称取藜麦种子粉末1g于干燥三角瓶中，在121℃下灭菌20min，接种3％～7％步骤2得到的黑曲霉悬浮液，加入料液比为1:0.8～1:1.3的蒸馏水，并在27℃～35℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d～5d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。优选的，步骤3的黑曲霉悬浮液接种量为6wt％，料液比为1:1.3，发酵温度为35℃，发酵时间为1d。本专利技术采用上述的技术方案，取得如下的技术效果。(1)藜麦中含有丰富的多酚、黄酮类化合物，表现出高抗氧化活性。而黑曲霉具有很强的外源基因表达能力及高效的蛋白表达、分泌和修饰能力，同时重组子具有很高的遗传稳定性。其生长旺盛、发酵周期短、不产生毒素，被美国FDA认证为安全菌种。本专利技术将黑曲霉发酵法应用于藜麦种子的发酵过程中，能够安全有效地提高藜麦种子的总黄酮含量及抗氧化活性。(2)具有方法简单，成本较低的优势。附图说明图1至图4为以发酵时间、温度、料液比及接种量为单因素，以总黄酮含量为指标，通过亚硝酸钠比色法对采用本专利技术实施例的方法得到的藜麦种子总黄酮含量变化图。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的技术方案进行进一步的描述，使本领域的技术人员可以更好的理解本专利技术并能予以实施。实施例1提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，包括以下的步骤：步骤1，称取蛋白胨6g、葡萄糖24g、琼脂12g置于1000mL烧杯中，加入600mL蒸馏水煮沸并使其完全溶解，分装于具塞三角瓶中，在121℃条件下进行高压灭菌20min，得到沙氏培养基，倒平板，采用平板划线法接种黑曲霉，将接种好黑曲霉的培养基于30℃培养，至长满平板，得到培养好的黑曲霉。步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度，使其OD600＝2.0，备用。步骤3，称取藜麦种子粉末1g于干燥三角瓶中，在121℃下灭菌20min，接种5wt％的步骤2得到的黑曲霉悬浮液，以藜麦种子粉末为料加入料液比为1:1.1的蒸馏水，并在31℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。实施例2提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，包括以下的步骤：步骤1，称取蛋白胨6g、葡萄糖24g、琼脂12g置于1000mL烧杯中，加入600mL蒸馏水煮沸并使其完全溶解，将制好的沙氏培养基分装于具塞三角瓶中，在121℃条件下进行高压灭菌20min。倒平板、平板划线，将接种好黑曲霉的培养基于30℃培养，至长满平板，得到培养好的黑曲霉。步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度，使其OD600＝2.0，备用。步骤3，准确称取藜麦种子粉末1g于干燥三角瓶中，在121℃下灭菌20min，接种6wt％的步骤2得到的黑曲霉悬浮液，以藜麦种子粉末为料加入料液比为1:1.3的蒸馏水，并在35℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。实施例3提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，包括以下的步骤：步骤1，称取蛋白胨6g、葡萄糖24g、琼脂12g置于1000mL烧杯中，加入600mL蒸馏水煮沸并使其完全溶解，将制好的沙氏培养基分装于具塞三角瓶中，在121℃条件下进行高压灭菌20min。倒平板、平板划线，将接种好黑曲霉的培养基于30℃培养，至长满平板，得到培养好的黑曲霉。步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度，使其OD600＝2.0，备用。步骤3，准确称取藜麦种子粉末1g于干燥三角瓶中，在121℃下灭菌20min，接种7wt％的步骤2得到的黑曲霉悬浮液，以藜麦种子粉末为料加入料液比为1:1.2的蒸馏水，并在33℃下150r/min的摇床进行发酵培养1d，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。实施例4至实施例26为了进一步说明本专利技术的提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法的技术效果，以下实施例以发酵时间、温度、料液比及接种量为单因素设置实施例，以及上述四因素三水平正交试验设置实施例。具体的，实施例4至实施例26其余和实施例1相同，区别在于步骤3的接种量、料液比、发酵温度和发酵时间。详见下表。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，其特征在于包括以下的步骤：/n步骤1，制备沙氏培养基，倒平板、平板划线接种黑曲霉，将接种好黑曲霉的培养基培养；/n步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水需悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度；/n步骤3，将藜麦种子粉末灭菌，接种的黑曲霉，加入蒸馏水，摇床进行发酵培养，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，其特征在于包括以下的步骤：
步骤1，制备沙氏培养基，倒平板、平板划线接种黑曲霉，将接种好黑曲霉的培养基培养；
步骤2，取培养好的黑曲霉，用无菌生理盐水需悬浮黑曲霉孢子，调节黑曲霉孢子悬浮液的浓度；
步骤3，将藜麦种子粉末灭菌，接种的黑曲霉，加入蒸馏水，摇床进行发酵培养，得到黑曲霉藜麦固体发酵物。


2.根据权利要求1所述的一种提高藜麦种子总黄酮含量与抗氧化活性的发酵方法，其特征在于包括以下的步骤：
步骤1，称取蛋白胨6g、葡萄糖24g、琼脂12g，加入600mL蒸馏水煮沸并使其完全溶解，在121℃条件下进行高压灭菌20min，倒平板、...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹亮，宋雨，赵钢，赵江林，彭镰心，徐霞，李强，慕娟娟，
申请(专利权)人：成都大学，
类型：发明
国别省市：四川;51