具有海藻糖酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸制造技术

本发明专利技术涉及特别地源自篮状菌属的具有海藻糖酶活性的多肽。本发明专利技术还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生这些多肽的方法和使用这些多肽用于生产乙醇的方法。

Polypeptides with trehalase activity and polynucleotide encoding them

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有海藻糖酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸序列表的引用本申请包含处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。专利技术背景
本专利技术涉及具有海藻糖酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本专利技术还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞以及产生这些多肽的方法。本专利技术还涉及使用本专利技术的海藻糖酶生产发酵产物的方法。
技术介绍
海藻糖是由两个糖单体(葡萄糖)组成的稳定的二糖。海藻糖以多至10％-15％的细胞干重作为对应激的响应积累于酵母中(GrBa等人,(1975)Eur.J.Appl.Microbiol.[欧洲应用生理学杂志]2:29-37)。海藻糖不能被酵母代谢。海藻糖酶将海藻糖切割成两个葡萄糖单元。将海藻糖酶分类于EC3.2.1.28(α,α-海藻糖酶)和EC.3.2.1.93(α,α-磷酸海藻糖酶)。EC类别基于国际生物化学与分子生物学联合会(IUBMB)的命名委员会(NomenclatureCommittee)的推荐。EC类别的描述可见于互联网，例如，在“http://www.e本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有海藻糖酶活性的多肽，该多肽选自下组，该组由以下组成：/n(a)与SEQ ID NO:21的成熟多肽具有至少93％序列同一性或与SEQ ID NO:23的成熟多肽具有至少70％序列同一性的多肽；/n(b)由与SEQ ID NO:20的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少95％序列同一性、或与SEQ ID NO:22的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％序列同一性的多核苷酸编码的多肽；/n(c)SEQ ID NO:21或SEQ ID NO:23的成熟多肽的变体，该变体在一个或多个(例如，若干个)位置处包含取代、缺失和/或插入；以及/n(d)(a)、(b)或(c)的多肽的片...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170628 US 62/526,1331.一种具有海藻糖酶活性的多肽，该多肽选自下组，该组由以下组成：
(a)与SEQIDNO:21的成熟多肽具有至少93％序列同一性或与SEQIDNO:23的成熟多肽具有至少70％序列同一性的多肽；
(b)由与SEQIDNO:20的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少95％序列同一性、或与SEQIDNO:22的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80％序列同一性的多核苷酸编码的多肽；
(c)SEQIDNO:21或SEQIDNO:23的成熟多肽的变体，该变体在一个或多个(例如，若干个)位置处包含取代、缺失和/或插入；以及
(d)(a)、(b)或(c)的多肽的片段，该片段具有海藻糖酶活性。


2.如权利要求1所述的多肽，该多肽具有通过TSA确定的至少60℃、至少61℃、至少62℃、至少63℃、至少64℃、至少65℃、至少66℃、至少67℃，例如至少68℃的热变性温度Td。


3.一种组合物，该组合物包含如权利要求1-2中任一项所述的多肽。


4.一种全培养液配制品或细胞培养组合物，该全培养液配制品或细胞培养组合物包含如权利要求1-2中任一项所述的多肽。


5.一种多核苷酸，该多核苷酸编码如权利要求1-2中任一项所述的多肽。


6.一种核酸构建体或表达载体，该核酸构建体或表达载体包含如权利要求5所述的多核苷酸，该多核苷酸可操作地连接至指导该多肽在表达宿主中的产生的一个或多个异源控制序列。


7.一种重组宿主细胞，该重组宿主细胞包含如权利要求6所述的核酸构建体。


8.如权利要求7所述的重组宿主细胞，其中该细胞是酵母细胞，特别是假丝酵母属、汉逊酵母属、克鲁弗酵母属、毕赤酵母属、酵母菌属、裂殖酵母属或耶氏酵母属细胞，如乳酸克鲁维酵母、卡尔酵母、酿酒酵母、糖化酵母、道格拉氏酵母、克鲁弗酵母、诺地酵母、卵形酵母或解脂耶氏酵母细胞，最特别是酿酒细胞。


9.一种产生具有海藻糖酶活性的多肽的方法，该方法包括在有益于产生该多肽的条件下培养如权利要求7或8所述的宿主细胞。

【专利技术属性】
技术研发人员：康正芳，MD莫朗特，松井知子，KM施诺尔，福山志朗，堤纪子，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK