一种痹痛宁胶囊的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种痹痛宁胶囊的含量测定方法。本发明专利技术通过超高效液相串联质谱(UPLC‑MS/MS)法同时测定痹痛宁胶囊中士的宁、马钱子碱、麻黄碱和伪麻黄碱4种成分含量。本发明专利技术具有建立的方法简单、有效、准确可靠，可用于测定痹痛宁胶囊中士的宁、马钱子碱、麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定，能有效控制该产品的质量，确保药物临床药效的有益效果。

A method for the determination of Bitongning capsule

【技术实现步骤摘要】
一种痹痛宁胶囊的含量测定方法
本专利技术涉及一种含量测定方法，特别是一种痹痛宁胶囊的含量测定方法。
技术介绍
痹痛宁胶囊由马钱子粉、全蝎、僵蚕、麻黄、苍术、乳香、没药、川牛膝、刺五加浸膏、甘草等10味药材组成，适用于寒湿阴络所致的痹病症，症见：筋骨关节疼痛，肿胀，麻木，重着，屈伸不利，遇寒加重者。方中马钱子粉中的士的宁和马钱子碱既是有效成分，也是毒性成分，且有效剂量和中毒剂量比较接近。麻黄中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱为拟肾上腺素药物，是国家规定需要严格管制的毒、麻类成分。因此控制他们在制剂中的含量在一定的范围内，使其既保证临床疗效，又在安全范围内使用。目前士的宁和马钱子碱的检测方法主要有高效毛细管电泳法、分光光度法、薄层扫描法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱法和薄层扫描法等，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的检测方法主要有高效毛细管电泳法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱法。测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和士的宁的检测方法有高效液相色谱法。测定士的宁、马钱子碱和麻黄碱的检测方法有高效液相色谱法、近红外光谱法。测定士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的4种生物碱的文献有一篇，采用的方法为气相色谱-质谱法。为了更好控制痹痛宁胶囊的质量，确保临床药效，本专利技术提供了一种痹痛宁胶囊的含量测定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种痹痛宁胶囊的含量测定方法。本专利技术具有建立的方法简单、有效、准确可靠，可用于测定痹痛宁胶囊中士的宁、马钱子碱、麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定，能有效控制该产品的质量，确保药物临床药效的特点。本专利技术的技术方案：一种痹痛宁胶囊的含量测定方法，所述痹痛宁胶囊由马钱子粉、全蝎、僵蚕、麻黄、苍术、乳香、没药、川牛膝、刺五加浸膏和甘草制成，其特征在于：所述含量测定方法包括对士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定。前述的痹痛宁胶囊的含量测定方法中，所述含量测定方法包括对士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定，具体如下步骤：(1)对照品溶液：精密称取士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱4种对照品，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成对照品溶液，备用；(2)供试品溶液：取痹痛宁胶囊，倾出内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水-浓盐酸20mL，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL，置100mL容量瓶中，加甲醇水至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得；(3)将对照品溶液和供试品溶液通过超高效液相串联质谱法进样测定，将色谱对比后，并分别计算出试品溶液中士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量；所述超高效液相串联质谱法的色谱条件为：采用ACQUITYBEHC18色谱柱：2.1×100mm，1.7μm，流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱：0～6min，4.0％A；6～7min，4.0％→18.0％A；7～9min，18.0％→55.0％A；9～10min，55.0％→100.0％A；10～12min，100.0％A；12～13min，100.0％→4.0％A，13～15min，4.0％A，流速为0.3mL·min-1，柱温为40℃，进样体积为0.3μL；所述超高效液相串联质谱法的质谱条件为：采用电喷雾离子源，多反应监测模式监测，正离子扫描；离子源温度500℃，去溶剂气流速为1000L·Hr-1；碰撞气流速为0.15mL·Min-1毛细管电压0.3kV。前述的痹痛宁胶囊的含量测定方法中，所述步骤(1)中，对照品溶液：精密称取士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱4种对照品各4mg，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成质量浓度均为0.4mg/mL的对照品储备溶液，备用。前述的痹痛宁胶囊的含量测定方法中，所述步骤(2)中，取痹痛宁胶囊10粒，倾出内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水-浓盐酸20mL，甲醇-水-浓盐酸的体积比为50:50:1，称定重量，在500W、频率40kHz的条件下超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL，置100mL容量瓶中，加50％甲醇水至刻度，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，即得。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术建立超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定痹痛宁胶囊中士的宁、马钱子碱、麻黄碱和伪麻黄碱4种成分含量。方法：色谱柱为ACQUITYBEHC18(2.1×100mm，1.7μm)。流动相为0.1％甲酸水-乙腈(梯度洗脱)，流速：0.3mL·min-1，柱温：40℃，进样量：0.3μL。质谱条件采用电喷雾离子源，正离子模式，多反应监测模式扫描。结果：士的宁，马钱子碱，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱线性范围分别在0.05066～0.6586mg·L-1(r＝0.9999)，0.03158～0.4106mg·L-1(r＝0.9998)，0.009266～0.1483mg·L-1(r＝1.000)，0.009620～0.1539mg·L-1(r＝1.000)；精密度、稳定性、重复性试验的RSD均＜2％；平均回收率在97.0％～102.9％，RSD均＜2％；士的宁，马钱子碱，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的检出浓度分别为0.013、0.12、0.14、0.14μg·L-1。结论：建立的方法简单、有效、准确可靠，可用于测定痹痛宁胶囊中士的宁、马钱子碱、麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定，为痹痛宁胶囊建立更全面的质量标准提供依据。实验证明：1材料WatersXEVO-TQ超高效液相串联质谱仪，数控超声波清洗器(KQ-500DE，昆山市超声仪器有限公司)，痕量分析天平(XP26，上海梅特勒托利多有限责任公司)，电子分析天平(XS105DU，上海梅特勒托利多有限责任公司)，纯水仪(明澈D24UV，美国Millipore公司)。对照品士的宁(批号10705-200306)、马钱子碱(批号110706-200505)、盐酸麻黄碱(批号171241-201508)、盐酸伪麻黄碱(批号171237-201208)均购于中国食品药品检定研究院，3批痹痛宁胶囊(贵州恒霸药业有限责任公司，批号20181001、20181201、20181202)，甲醇、乙腈、甲酸均为色谱纯(德国Merck公司)，水为超纯水，其他为分析纯。2方法和结果2.1溶液的制备2.1.1对照品溶液精密称取士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱4种对照品各4mg，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成质量浓度均为0.4mg/mL的对照品储备溶液，备用。2.1.2供试品溶液取痹痛宁胶囊10粒，倾出内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水-浓盐酸(50:50:1)2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种痹痛宁胶囊的含量测定方法，所述痹痛宁胶囊由马钱子粉、全蝎、僵蚕、麻黄、苍术、乳香、没药、川牛膝、刺五加浸膏和甘草制成，其特征在于：所述含量测定方法包括对士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种痹痛宁胶囊的含量测定方法，所述痹痛宁胶囊由马钱子粉、全蝎、僵蚕、麻黄、苍术、乳香、没药、川牛膝、刺五加浸膏和甘草制成，其特征在于：所述含量测定方法包括对士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定。


2.根据权利要求1所述的痹痛宁胶囊的含量测定方法，其特征在于：所述含量测定方法包括对士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定，具体如下步骤：
(1)对照品溶液：精密称取士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱4种对照品，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成对照品溶液，备用；
(2)供试品溶液：取痹痛宁胶囊，倾出内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水-浓盐酸20mL，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL，置100mL容量瓶中，加甲醇水至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得；
(3)将对照品溶液和供试品溶液通过超高效液相串联质谱法进样测定，将色谱对比后，并分别计算出试品溶液中士的宁、马钱子碱、盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量；
所述超高效液相串联质谱法的色谱条件为：采用ACQUITYBEHC18色谱柱：2.1×100mm，1.7μm，流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱：0～6min，4.0％A；6～7min，4.0％→18.0％A；...

【专利技术属性】
技术研发人员：张义全，张建强，赵丽，沈祥春，陶玲，朱志军，
申请(专利权)人：贵州恒霸药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：贵州;52