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一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法技术

技术编号:23759522 阅读:50 留言:0更新日期:2020-04-11 16:47
本发明专利技术属于代谢组学技术领域,具体涉及一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法。本发明专利技术采用核磁共振技术检测二乙基亚硝胺致肝癌大鼠及复方苦参注射液干预后的尿液代谢物,通过多元统计分析方法发现二乙基亚硝胺致肝癌的生物标志物,复方苦参注射液对上述生物标志物均有回调,以此来实现复方苦参注射液治疗肝癌机制的识别及高通量分析。本发明专利技术要解决现有药理学评价方法单一,不能系统、全面地评价中药作用机制的问题。通过对生物标志物进行通路分析,可更全面、高效、快速的从整体水平无偏向性的综合评价复方苦参注射液治疗肝癌作用机制,为中药代谢组学及作用机制的阐明提供示范性研究。

A study method of anti hepatoma mechanism of Compound Kushen injection based on metabonomics

【技术实现步骤摘要】
一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法
本专利技术属于代谢组学
,具体涉及一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法。
技术介绍
代谢组学是对病理、生理刺激或基因改变时生物体系的动态代谢响应所进行的多参数定量分析,可通过揭示新陈代谢过程中代谢产物的变化规律,全面理解病理变化过程及机体内物质的代谢途径,现已被广泛应用于生物学和医学相关领域,如疾病诊断、药物作用机制和毒理学研究等多个方面。代谢组学研究药物引起机体内源性代谢物的整体和系统性变化规律,可直接反映体内生化过程和状态的整体轮廓,与中药研究的整体观和系统观不谋而合。目前代谢组学已经用于各类疾病病理机制和药物作用机制的研究。核磁共振(NMR)、气相色谱-质谱(GS/MS)联用、液相色谱-质谱(LC/MS)联用是三种常用的代谢组学分析技术。原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一,目前占全世界肿瘤死亡原因的第三位,已经成为严重危害人类生命健康、制约社会经济发展的一大类疾病,且发病率呈逐年上升趋势。中药防治恶性肿瘤在缓解临床症状、提高生活质量、预防复发转移、延长生存期等方面本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法,其特征在于:采用核磁共振技术检测二乙基亚硝胺致肝癌大鼠及复方苦参注射液干预后二乙基亚硝胺致肝癌大鼠的尿液代谢物;对获得的

【技术特征摘要】
1.一种基于代谢组学的复方苦参注射液抗肝癌机制研究方法,其特征在于:采用核磁共振技术检测二乙基亚硝胺致肝癌大鼠及复方苦参注射液干预后二乙基亚硝胺致肝癌大鼠的尿液代谢物;对获得的1H-NMR图谱进行代谢轮廓分析,获得数据集;对数据集利用多元变量统计分析方法筛选出具有治疗肝癌作用的潜在尿液生物标志物,利用复方苦参注射液对生物标志物含量的回调变化来实现复方苦参注射液治疗肝癌作用机制的识别及高通量分析;通过对生物标志物进行通路富集分析,筛选出复方苦参注射液治疗肝癌的主要代谢通路。


2.根据权利要求1所述的一种基于代谢组学预测复方苦参注射液治疗肝癌机制的研究方法,其特征在于:所述二乙基亚硝胺致肝癌大鼠模型的构建方法为:将大鼠随机分为空白对照组与二乙基亚硝胺致肝癌模型组,肝癌模型组大鼠自由饮用60mg/L由灭菌水配置的二乙基亚硝胺溶液,每天按照饮用情况更换,建立肝癌大鼠模型。


3.根据权利要求1所述的一种基于代谢组学预测复方苦参注射液治疗肝癌机制的研究方法,其特征在于:所述复方苦参注射液干预二乙基亚硝胺致肝癌大鼠的具体方法为:对造模成功的肝癌大鼠按随机原则分为模型组和复方苦参注射液治疗组,每组10只大鼠,复方苦参注射液治疗组按2mL/kg尾静脉注射给药,空白对照组和模型组注射相同体积质量浓度为0.9%的氯化钠溶液,连续三周。


4.根据权利要求1所述的一种基于代谢组学预测复方苦参注射液治疗肝癌机制的研究方法,其特征在于:所述采用核磁共振技术检测干预后二乙基亚硝胺致肝癌大鼠的尿液代谢物之前需对尿液代谢物进行处理,具体方法为:尿液代谢物中尿液的保存:在给药结束后收集各组大鼠的尿液样本,-80℃储存;尿液代谢物中尿液的前处理:4℃解冻尿液样本,取500μL尿液样品加入200μL磷酸盐缓冲液,0.2MNaH2PO4/NaHPO4,10%D2O,0.01%TSP,pH=7.4,涡旋,于4℃,13000r/min离心10min,取600μL上清液用于核磁测定。


5.根据权利要求1所述的一种基于代谢组学预测复方苦参注射液治疗肝癌机制的研究方法,其特征在于:所述采用核磁共振技术检测二乙基亚硝胺致肝癌大鼠及复方苦参注射液干预后二乙基亚硝胺致肝癌大鼠的尿液代谢物的条件如下:样品于25℃600MHzNMR仪上测定,采用NOE-2DSpectroscopy脉冲序列;测定频率为600.13MHz,扫描次数为64,谱宽12345.7Hz,脉冲时间14s,采样时间2.654s,延迟时间1.0s,采样数据点65536,FID分辨率0.188Hz,采样间隔40.5s,内标为TSP。<...

【专利技术属性】
技术研发人员:王珂欣高丽杜冠华秦雪梅
申请(专利权)人:山西大学
类型:发明
国别省市:山西;14

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