可替代抗生素的饲料的添加剂及其使用方法技术

本发明专利技术属于饲料添加剂领域，特别是指可替代抗生素的饲料的添加剂及其使用方法。所述饲料添加剂包括葡萄糖氧化酶、嗜酸乳杆菌、小檗碱或姜黄素中的两种或三种。试验采用体外共培养的方法，研究了葡萄糖氧化酶、嗜酸乳杆菌、小檗碱、姜黄素组合对大肠杆菌生长的抑制作用。结果表明，0.005%葡萄糖氧化酶与1×10

The additive of alternative antibiotic feed and its usage

【技术实现步骤摘要】
可替代抗生素的饲料的添加剂及其使用方法
本专利技术属于饲料添加剂领域，特别是指可替代抗生素的饲料的添加剂及其使用方法。
技术介绍
大约在20世纪50年代，我国就开始使用抗生素类饲料添加剂用来提高动物的生产性能，但是抗生素产生的毒副作用会导致动物肠胃功能紊乱，并产生抗药、耐药、残留、二重感染等很多问题，给畜禽生产带来了巨大的威胁，寻找可代替抗生素类的饲料添加剂势在必行。嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）是一种能在动物胃肠道内定植的重要益生菌，属革兰氏阳性杆菌，耐酸、耐盐和耐胆汁性强。嗜酸乳杆菌具有调节动物胃肠道菌群平衡、抑制病原微生物生长、提高机体免疫力、提高乳糖消化能力及降低血清胆固醇等作用，已经被广泛应用于畜禽的生产中。葡萄糖氧化酶（Glucoseoxidase，GOD）是一种需氧脱氢酶，能专一氧化β-D-葡萄糖为葡萄糖酸和过氧化氢，并在此过程中消耗O2。目前，葡萄糖氧化酶已广泛应用于食品、医药等领域。1999年，农业部将葡萄糖氧化酶作为允许使用的饲料酶制剂之一。已经有资料报道，葡萄糖氧化酶具有抑菌、促生长作用，且无毒、无抗药性，具有广阔的应用前景。小檗碱（Berberine，BBR），是从黄连根茎中提取的异喹林生物碱，是我国传统中药之一。小檗碱具有显著的抑菌作用，临床上主要作为非处方药治疗胃肠道炎症和细菌性痢疾[7]。本试验选择嗜酸乳杆菌、葡萄糖氧化酶、小檗碱作为抗生素替代品，以盐酸金霉素（CHH）作为抗生素标准品，利用体外抑制大肠杆菌生长试验，研制能够替代抗生素的新型饲料添加剂。姜黄素（Curcumin）是一种从姜科植物姜黄等的根茎中提取，为酸性多酚类物质，通常用作肉类食品着色剂和酸碱指示剂，同时具有抗炎、抗氧化等药理作用。专利CN104366008A，提供了一种竹醋液替代饲料抗生素促生长配方的制备及应用，该专利利用竹醋液替代饲料抗生素促生长配方对于替代抗生素，提高生产性能和减少粪便中氨气有很好的效果。该日粮对于提高肉鸡生产性能的作用优于添加25mg/kg的金霉素。但这种效果并不能达到抑制大肠杆菌的要求，因此迫切需要一种与金霉素作用相当的抗生素替代添加剂。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术提出可替代抗生素的饲料的添加剂及其使用方法，为抗生素的替代提供了一种新型饲料添加剂。本专利技术的技术方案是这样实现的：可替代抗生素的饲料的添加剂，所述饲料添加剂包括葡萄糖氧化酶、嗜酸乳杆菌、姜黄素或小檗碱中的两种或三种。所述饲料添加剂包括使用浓度为0.0025wt%-0.005wt%的葡萄糖氧化酶和1×105-1×107CFU/mL的嗜酸乳杆菌。所述饲料添加剂包括使用浓度0.005wt%的葡萄糖氧化酶和1×105CFU/mL的嗜酸乳杆菌。所述饲料添加剂包括使用浓度为0.0025wt%-0.005wt%的葡萄糖氧化酶、0.0015wt%-0.009wt%的小檗碱、0.005wt%-0.04wt%姜黄素和1×105-1×107CFU/mL的嗜酸乳杆菌。所述饲料添加剂包括使用浓度为0.005wt%的葡萄糖氧化酶、0.0015wt%的小檗碱和1×105的嗜酸乳杆菌。所述饲料添加剂包括使用浓度为0.005wt%的葡萄糖氧化酶、0.01%-0.02wt%的姜黄素和1×105的嗜酸乳杆菌。所述的饲料添加剂的使用方法，步骤为：按比例向饲料中添加葡萄糖氧化酶、小檗碱、姜黄素和嗜酸乳杆菌，达到各自使用浓度后，混匀进行试验。所述试验为流体状态。本专利技术具有以下有益效果：本试验采用体外共培养的方法，研究了葡萄糖氧化酶（GOD）、嗜酸乳杆菌、姜黄素、小檗碱（BBR）组合对大肠杆菌生长的抑制作用。单因素抑菌试验结果表明，0.025%GOD、0.009%BBR、0.04%姜黄素、1×107CFU/mL嗜酸乳杆菌抑菌作用最强（P＜0.05）。组合试验结果表明，0.005%GOD与1×105CFU/mL嗜酸乳杆菌二组合，0.005%GOD、0.0015%BBR、1×105CFU/mL嗜酸乳杆菌三组合，以及0.005%GOD、0.01%-0.02%姜黄素、1×105CFU/mL嗜酸乳杆菌三组合，体外抑制大肠杆菌生长的作用与75.0-150.0mg/kg有效金霉素相当，为抗生素的替代提供了一种新型饲料添加剂。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。材料与方法1.1菌种选择试验所用的大肠杆菌（Escherichiacoli）、嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）均由河南农业大学生物技术与动物营养研究实验室保存。小檗碱（BBR）、姜黄素、葡萄糖氧化酶（酶活为10000U/g）均由河南德邻生物制品有限公司提供，盐酸金霉素（ChlortetracyclineHydrochloride）由福建浦城正大生化有限公司提供，其有效成分含量为90%，试验中表示的金霉素含量皆为有效含量。1.2培养基LB培养基：胰蛋白胨10g，酵母浸粉5g，氯化钠10g，蒸馏水定容至1000mL，pH为7.0-7.2，在121℃、0.15MPa条件下高压灭菌20min，4℃保存备用。MRS培养基：胰蛋白胨20g，酵母浸粉10g，葡萄糖20g，吐温801mL，磷酸氢二钾2g，无水乙酸钠5g，柠檬酸铵2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水定容至1000mL，pH为6.2-6.6，在121℃、0.15MPa条件下高压灭菌20min，4℃保存备用。伊红美蓝培养基（北京奥博星生物技术有限责任公司）：称取42.5g，蒸馏水定容1000mL，pH为7.2±0.2，在121℃、0.15MPa条件下高压灭菌20min备用。1.3仪器设备生物净化工作台（BVM-1000，苏州净化设备有限公司）、电热恒温隔水培养箱（PYX-DHS-BS-Ⅱ，上海跃进医疗器械有限公司）、立式高压蒸汽灭菌锅（LDZX-30KBS，上海申安医疗器械厂）、冰箱（BCD-649WE,青岛海尔股份有限公司）、酸度计（PHS-2C，天津赛得利斯试验分析仪器制造厂）、磁力搅拌器（Jan-79-1，金坛市中大仪器厂）、电热鼓风干燥箱（101，北京中兴伟业仪器有限公司）、摇床（QYC-2102C，上海新苗医疗器械制造有限公司）等。1.4菌种活化与计数将实验室保存的鸡源大肠杆菌接种到LB培养基中，37℃、180r/min摇床培养24h后按照2%接种量接入新鲜的LB培养基中，再于37℃、180r/min摇床培养24h测定活菌数，并把培养液置于4℃冰箱中保存备用。将实验室保存的嗜酸乳杆菌接种到MRS培养基中，37℃、恒温培养箱中静止培养24h后按照2%接种量接入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.可替代抗生素的饲料的添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂包括葡萄糖氧化酶、嗜酸乳杆菌、姜黄素或小檗碱中的两种或三种。/n

【技术特征摘要】
1.可替代抗生素的饲料的添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂包括葡萄糖氧化酶、嗜酸乳杆菌、姜黄素或小檗碱中的两种或三种。


2.根据权利要求1所述的可替代抗生素的饲料的添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂包括使用浓度为0.0025wt%-0.005wt%的葡萄糖氧化酶和1×105-1×107CFU/mL的嗜酸乳杆菌。


3.根据权利要求2所述的可替代抗生素的饲料的添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂包括使用浓度0.005wt%的葡萄糖氧化酶和1×105CFU/mL的嗜酸乳杆菌。


4.根据权利要求1所述的可替代抗生素的饲料的添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂包括使用浓度为0.0025wt%-0.005wt%的葡萄糖氧化酶、0.0015wt...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹清强，陈景岩，常娟，王平，朱群，党晓伟，刘超齐，李茂龙，李慧娟，刘硕，耿启泉，
申请(专利权)人：河南德邻生物制品有限公司，河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南;41