一种电化学免疫传感器和制备方法以及电化学免疫分析方法和试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种电化学免疫传感器和制备方法以及电化学免疫分析方法和试剂盒。该电化学免疫传感器为：在打磨抛光的玻碳电极表面电沉积金纳米颗粒，并固载anti－cTnI

An electrochemical immunosensor and its preparation, electrochemical immunoassay and kit

【技术实现步骤摘要】
一种电化学免疫传感器和制备方法以及电化学免疫分析方法和试剂盒
本专利技术涉及生物医学检测
，具体而言，涉及一种电化学免疫传感器和制备方法以及电化学免疫分析方法和试剂盒。
技术介绍
急性心肌梗塞(AMI)是一种主要导致老年人死亡的致命疾病。世界卫生组织(WHO)预测，到2030年，心血管疾病每年将导致2330万人死亡。对于大多数患者来说，某些前驱症状会在AMI发作前1－2周出现，因此，早期准确诊断AMI标志物可以显著降低死亡的风险。目前已经报道的AMI诊断方法通常是基于单一生物标志物的，这难免会导致很多误诊的情况。多重免疫测定(MIA)意味着在一次检测中可同时检测两个或多个目标蛋白。它与单组分免疫测定方法相比具有更显著优势，包括更高的样品通量，更高的检测效率和准确性，更短的测定时间以及更低的样品需求。已经开发了很多用于疾病生物标志物的多种免疫测定方法，例如荧光，表面等离振子体共振，电化学和化学发光等方面。与上述方法相比，电致化学发光(ECL)由于其响应速度快，背景信号低，灵敏度高和操作简单等独特的优势而显示出巨大的潜力。然而本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种电化学免疫传感器，其特征在于，所述电化学免疫传感器包括基底电极和所述基底电极表面固载的第一抗体，所述第一抗体包括脑利钠肽抗体和心肌肌钙蛋白I抗体，所述基底电极表面沉积有纳米金颗粒，且脑利钠肽抗体和心肌肌钙蛋白I抗体通过自组装的方法修饰在所述纳米金颗粒表面。/n

【技术特征摘要】
1.一种电化学免疫传感器，其特征在于，所述电化学免疫传感器包括基底电极和所述基底电极表面固载的第一抗体，所述第一抗体包括脑利钠肽抗体和心肌肌钙蛋白I抗体，所述基底电极表面沉积有纳米金颗粒，且脑利钠肽抗体和心肌肌钙蛋白I抗体通过自组装的方法修饰在所述纳米金颗粒表面。


2.一种根据权利要求1所述电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括：在基底电极的表面电化学沉积金纳米颗粒后，滴加脑利钠肽抗体溶液和心肌肌钙蛋白I抗体溶液进行共孵育。


3.根据权利要求2所述的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，在基底电极表面电沉积纳米金颗粒包括以下步骤：所述基底电极经抛光、清洗、吹干后，采用0.2－3wt％的HAuCl4溶液，在所述基底电极的表面以－0.2V的恒定电压电沉积10－50s以在基底电极表面电沉积纳米金颗粒。


4.根据权利要求2所述的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，滴加脑利钠肽抗体溶液和心肌肌钙蛋白I抗体溶液进行共孵育包括以下步骤：滴加10μg/mL，5－10μL的脑利钠肽抗体溶液和10μg/mL，5－10μL的心肌肌钙蛋白I抗体溶液，于2－8℃下孵育12－16h；
优选的，还包括滴加牛血清蛋白封闭所述基底电极表面的非特异性的活性位点：滴加1wt％，5－15μL的牛血清白蛋白溶液，于2－8℃下孵育1h，以封闭基底电极表面的非特异性结合位点，然后用0.05－0.15mol/ml的PBS缓冲液中进行淌洗。


5.一种基于权利要求1所述的电化学免疫传感器或权利要求2－4中任一项所述制备方法制备的电化学免疫传感器的电化学免疫分析方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
将所述电化学免疫传感器与待检测的脑利钠肽抗原和心肌肌钙蛋白I抗原的样品溶液进行第一次孵育，然后将经过所述第一次孵育的电化学免疫传感器和能够单独与脑利钠肽抗原结合的第二抗体复合物A溶液以及能够单独与心肌肌钙蛋白I抗原结合的第二抗体复合物B溶液进行第二次孵育；且所述第二抗体复合物A中含有石墨相氮化碳纳米片，所述第二抗体复合物B中含有N－(4－氨基丁基)－N－乙基异鲁米诺。


6.根据权利要求5所述的分析方法，其特征在于，所述第二抗体复合物A的组成为：金纳米粒子－石墨相氮化碳纳米片－脑利钠肽抗体，所述第二抗体复合物B的组成为：金纳米粒子－N－(4－氨基丁基)－N－乙基异鲁米诺－心肌肌钙蛋白I抗体；
优选的，所述第二抗体复合物A通过以下步骤制备得到：将石墨相氮化碳纳米片悬浮...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈时洪，杜佳炜，赵晋文，谭兴容，
申请(专利权)人：西南大学，重庆市第九人民医院，
类型：发明
国别省市：重庆;50