提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基及高效育苗方法技术

本发明专利技术提供了一种提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基及高效育苗方法，属于植物培育技术领域，本发明专利技术所述培养基包括：初代诱导培养基A、增殖培养基B、分化培养基C、壮苗及生根培养基D并应用于铁皮石斛的高效育苗。本发明专利技术能够延长组培苗移栽时间，为工厂化育苗提供技术支撑。解决目前铁皮石斛无性系品种组培苗生产成本较高，无性系原球茎分化率低等问题。

Culture medium and efficient seedling raising method to improve the differentiation rate of protocorm like Dendrobium candidum

【技术实现步骤摘要】
提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基及高效育苗方法
本专利技术属于植物培育
，具体是一种提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基及高效育苗方法。
技术介绍
铁皮石斛又称黑节草，是一种名贵的药食同源植物，１９８７年被国务院列为珍稀野生药用植物加以保护。明代李时珍的《本草纲目》中记载：石斛除痹下气、补内脏虚劳赢瘦，强阴益精。具有提高人体免疫力、抗疲劳、助睡眠、改善胃肠道消化功能等功效，铁皮石斛名列中华“九大仙草”之首。铁皮石斛的药用部分是新鲜或干燥茎，以及铁皮石斛花。铁皮石斛由于自交结实率低，因此难以获得纯合的自交系，因此杂交组合后代存在分离现象，种苗纯度较低，生产一般采用遗传背景相同的种群内不同个体间进行相互授粉，对结实的果子成熟后进行种子无菌播种育苗，目前浙江省育成的“仙斛1号”、“仙斛2号”、“天斛1号”和“森山1号”均采用野生群体优选个体进行授粉培育而成，所有品种个体间农艺性状均有较大的差异，难以满足生产上对鲜食品种农艺和品质性状提出一致性更高的要求，为发展人工规模化栽培，满足市场需求，通过品种间杂交，选择优良单株，进行无性系繁育培育本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于, 所述培养基包括：/n初代诱导培养基A、用于诱导铁皮石斛茎段腋芽萌发并在部分幼芽基部形成拟原球茎；/n增殖培养基B、用于转入并培育初代诱导培养基A中幼苗基部萌发形成的拟原球茎，并使得所述拟原球茎不断分裂增殖形成大量拟原球茎；/n分化培养基C、用于转入并促使增殖培养基B中的所述大量拟原球茎经过分化形成高度为1-2cm的铁皮石斛小苗；/n壮苗及生根培养基D、用于转入所述铁皮石斛小苗并壮苗生根形成高度为3-4cm的大苗。/n

【技术特征摘要】
1.提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于,所述培养基包括：
初代诱导培养基A、用于诱导铁皮石斛茎段腋芽萌发并在部分幼芽基部形成拟原球茎；
增殖培养基B、用于转入并培育初代诱导培养基A中幼苗基部萌发形成的拟原球茎，并使得所述拟原球茎不断分裂增殖形成大量拟原球茎；
分化培养基C、用于转入并促使增殖培养基B中的所述大量拟原球茎经过分化形成高度为1-2cm的铁皮石斛小苗；
壮苗及生根培养基D、用于转入所述铁皮石斛小苗并壮苗生根形成高度为3-4cm的大苗。


2.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于，所述诱导培养基A在1L培养基中的配方及含量为：KNO3:1900mg、NH4NO3:1650mg、KH2PO4:170mg、MgSO4·7H2O:370mg、CaCl2:440mg、KI:0.83mg、H3BO3:6.2mg、MnSO4·4H2O:22.3mg、ZnSO4·7H2O:8.6mg、Na2-EDTA:37.3mg、FeSO4·7H2O:27.8mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg、甘氨酸2.0mg、萘乙酸0.2mg、6-苄氨基嘌呤1~2mg、香蕉0g、琼脂4.4g、白砂糖20g。


3.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于，所述增殖培养基B在1L培养基中的配方及含量为：
KNO3:1267mg、NH4NO3:1100mg、KH2PO4:113mg、MgSO4·7H2O:247mg、CaCl2:293mg、KI:0.83mg、H3BO3:6.2mg、MnSO4·4H2O:22.3mg、ZnSO4·7H2O:8.6mg、Na2-EDTA:37.3mg、FeSO4·7H2O:27.8mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg、甘氨酸2.0mg、萘乙酸0.2~0.3mg、6-苄氨基嘌呤0~0.5mg、香蕉100g、琼脂4.4g、白砂糖30g。


4.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于，所述分化培养基C在1L培养基中的配方及含量为：
KNO3:1250mg、NH4NO3:225mg、KH2PO4:175mg、MgSO4·7H2O:325mg、CaCl2:165mg、KI:0.83mg、H3BO3:6.2mg、MnSO4·4H2O:22.3mg、ZnSO4·7H2O:8.6mg、Na2-EDTA:37.3mg、FeSO4·7H2O:27.8mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg、甘氨酸2.0mg、萘乙酸0.2~0.5mg、6-苄氨基嘌呤0mg、香蕉70g、琼脂4.4g、白砂糖20g。


5.根据权利要求1所述的提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于，所述壮苗及生根培养基D在1L培养基中的配方及含量为：KNO3:1267mg、NH4NO3:1100mg、KH2PO4:113mg、MgSO4·7H2O:247mg、CaCl2:293mg、KI:0.83mg、H3BO3:6.2mg、MnSO4·4H2O:22.3mg、ZnSO4·7H2O:8.6mg、Na2-EDTA:37.3mg、FeSO4·7H2O:27.8mg、烟酸0.5mg、盐酸吡哆醇0.5mg、盐酸硫胺素0.1mg、甘氨酸2.0mg、萘乙酸0.2~0.3mg、6-苄氨基嘌呤0~0.1mg、香蕉70g、琼脂4.4g、白砂糖30g+活性炭0.5g/L。


6.根据权利要求2或3或4或5所述的提高铁皮石斛拟原球茎分化率的培养基，其特征在于，所述培养基各组分配方在1L培养基中的各组分配制过程如下、：
（1）量取约500ml水放入热水锅中并加热；
（2）称取4.4g琼脂粉；
（3）待水温达到80℃时加入琼脂粉，搅拌均匀，加热至沸腾；
（4）加入每种培养基所需要的药品，所述药品包括预先配制的元素母液和微量元素母液；
（5）配制培养基B、C、D时称取70-100g香蕉，将其切成小块并用榨汁机打散榨汁；
（6）将榨好的香蕉汁加至热水锅中；
（7）配制培养基D时加入活性炭0.5g；
（8）加入白砂糖20-30g；
（9）待药品和白砂糖全部溶解后加水定容至1L并搅拌均匀；
（10）用pH试纸调pH值为5.8-6.2；
（11）分装，将配制好的培养基倒入组培瓶，倒入量视组培瓶容量大小而定，一般为容器的1/5左右；
（12）高压蒸汽灭菌，121℃，1.5Mpa，21min；
（13）灭完菌的培养基放入接种室内静置，让其降温后凝固。


7.一种提高铁皮石斛拟原球茎分化率的高效育苗方法，其特征在于，所述高效育苗方法使用如权利要求6所述的培养基，所述高效育苗方法还包括如下：
...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭方其，柴金甫，吴超，袁峰，丁晓瑜，徐智豪，黎侠，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33