特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体而言，提供了一种特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品。该成套sgRNA包括Wip1‑sgRNA1和Wip1‑sgRNA2，其特异性强，可以显著减少脱靶现象，从而准确、高效地靶向修饰猪Wip1基因。该成套sgRNA特异性识别猪Wip1基因的第一外显子，能有效减少CRISPR/Cas9系统引起的脱靶现象，减少非特异性切割对基因组带来的不利影响。

A set of sgRNA for specific recognition of porcine wip1 gene and its application and products

【技术实现步骤摘要】
特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品
本专利技术涉及基因工程
，具体而言，涉及一种特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品。
技术介绍
野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(Wild-typep53-inducedphosphatase1,Wip1)首次被发现是在淋巴瘤的研究中，并被证实它和wild-typep53关系密切；同时通过免疫荧光实验，发现Wip1蛋白位于细胞核内。Wip1基因是一种新的原癌基因，其具有多方面的功能，在细胞生长发育、细胞增殖迁移、DNA损伤修复、肿瘤发生、细胞稳态、疾病、衰老等中均起着重要的调节功能。Wipl是一种丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，人Wip1蛋白的相对分子质量为61KD，有605个氨基酸；小鼠Wip1蛋白的相对分子质量为66KD，有598个氨基酸。Wip1在小鼠胚胎期组织内表达量较成体明显增高。研究表明Wip1基因缺失雄性小鼠的繁殖能力下降，主要原因是Wip1敲除后，精细胞中特定表达的蛋白-精蛋白显著减少。同时，Wip1在异染色质相关的DNA序列的转录调节方面起着重要的作用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA，其特征在于，包括Wip1-sgRNA1和Wip1-sgRNA2；/n所述Wip1-sgRNA1中负责识别靶片段的核苷酸序列如下：/n5’-GUGAGCGUCUUCUCCGACCA-3’(SEQ ID NO.1)；/n所述Wip1-sgRNA2中负责识别靶片段的核苷酸序列如下：/n5’-GGAGGACGUUACUCAGAUCG-3’(SEQ ID NO.2)。/n

【技术特征摘要】
1.一种特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA，其特征在于，包括Wip1-sgRNA1和Wip1-sgRNA2；
所述Wip1-sgRNA1中负责识别靶片段的核苷酸序列如下：
5’-GUGAGCGUCUUCUCCGACCA-3’(SEQIDNO.1)；
所述Wip1-sgRNA2中负责识别靶片段的核苷酸序列如下：
5’-GGAGGACGUUACUCAGAUCG-3’(SEQIDNO.2)。


2.根据权利要求1所述的成套sgRNA，其特征在于，所述Wip1-sgRNA1的核苷酸序列如下：
5’-GUGAGCGUCUUCUCCGACCAGUUUUAGAGCUAGAAAUAGCAAGUUAAAAUAAGGCUAGUCCGUUAUCAACUUGAAAAAGUGGCACCGAGUCGGUGC-3’(SEQIDNO.3)；
优选地，所述Wip1-sgRNA2的核苷酸序列如下：
5’-GGAGGACGUUACUCAGAUCGGUUUUAGAGCUAGAAAUAGCAAGUUAAAAUAAGGCUAGUCCGUUAUCAACUUGAAAAAGUGGCACCGAGUCGGUGC-3’(SEQIDNO.4)。


3.一种用于猪Wip1基因编辑的成套DNA分子，其特征在于，包含编码权利要求1或2所述的成套sgRNA的DNA分子；
优选地，编码Wip1-sgRNA1中负责识别靶片段的核苷酸序列的DNA分子序列如下：
5’-GTGAGCGTCTTCTCCGACCA-3’(SEQIDNO.5)；
优选地，编码Wip1-sgRNA2中负责识别靶片段的核苷酸序列的DNA分子序列如下：
5’-GGAGGACGTTACTCAGATC...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟玉莲，李奎，徐奎，张秀玲，刘志国，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11