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姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法及其应用技术

技术编号:23602642 阅读:62 留言:0更新日期:2020-03-28 04:19
本发明专利技术公开了一种姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法及其应用,本发明专利技术制备的圆瓣姜花、姜花、红姜花等姜花属植物的中期染色体装片,每片的分裂相在20个以上,再应用于CPD染色和FISH杂交实验,CPD染色显示染色带纹较清晰,染色体之间有差异性,同一染色体不同部位带纹也不完全一致,45S rDNA FISH杂交信号清晰,检出率高达90%以上。

Method and application of chromosome metaphase mounting in root tip cells of Zingiber

【技术实现步骤摘要】
姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法及其应用
:本专利技术涉及生物领域,尤其涉及一种姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法及其应用。
技术介绍
:姜花属(HedychiumKoen)是姜科多年生草本植物,全世界有约50个种,中国28个种,其中特有种18个。姜花属植物有许多种重要的传统药用植物,如《中华大词典》记载的草果和姜花,主治胃寒痛、消化不良等,《四川中药志》记载的土羌活,主治风湿筋骨疼痛及跌打损伤等,还有毛姜花可祛风止咳,黄白姜花有解表散寒、利湿消肿、温胃止呕及消食健胃等功效。现代研究发现姜花属植物含有挥发油,可以用来提取香精。姜花属植物株型优美,花朵色彩艳丽,果序纷繁多样,极具园艺观赏价值。然而,姜花属植物遗传背景较模糊,形态变异复杂,导致其分类困难,物种数目不确定,物种进化关系不明朗。这影响了姜花属植物药用价值的开发利用和优良花卉品种的选育。高效制备姜花属植物的中期染色体,染色体数目、染色体核型分析,如4,6-二氨基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)和碘化丙啶(propi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n步骤一、根尖的培养、采集和固定:种植姜花属植物植株至根长到1-1.5cm取根尖,将根尖置于预处理液中进行预处理,再用水漂洗后加入固定液固定得到固定好的根尖;/n步骤二、根尖处理制片:/na)取固定好的根尖0.2-0.3cm左右,双蒸水清洗,再用柠檬酸缓冲液冲洗的导清洗后的根尖;/nb)酶解:清洗后的根尖用质量分数4%的纤维素酶、0.6%的果胶酶和3%的离析酶的混合液28℃下酶解4h然后转入4℃冰箱酶解过夜;/nc)后低渗:吸出混合液,用双蒸水冲洗根尖,再用双蒸水浸泡根尖;/nd)再固定:吸出水,然后加入固定液再...

【技术特征摘要】
1.一种姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一、根尖的培养、采集和固定:种植姜花属植物植株至根长到1-1.5cm取根尖,将根尖置于预处理液中进行预处理,再用水漂洗后加入固定液固定得到固定好的根尖;
步骤二、根尖处理制片:
a)取固定好的根尖0.2-0.3cm左右,双蒸水清洗,再用柠檬酸缓冲液冲洗的导清洗后的根尖;
b)酶解:清洗后的根尖用质量分数4%的纤维素酶、0.6%的果胶酶和3%的离析酶的混合液28℃下酶解4h然后转入4℃冰箱酶解过夜;
c)后低渗:吸出混合液,用双蒸水冲洗根尖,再用双蒸水浸泡根尖;
d)再固定:吸出水,然后加入固定液再固定根尖;
e)制片:取一个根尖于干净的载玻片上,滴一滴固定液,用工具将根尖挤压至糊状,然后滴2-3滴固定液,涂开,使根尖分散;酒精灯上烤至着火,待火自然熄灭,冷却即可得到染色体装片。


2.如权利要求1所述的姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法,其特征在于,步骤e)中,若有未成糊状的根尖,则夹出,弃之不用。


3.如权利要求1所述的姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法,其特征在于,还包括步骤三、保存将染色体装片经空气干燥后,置于-20℃贮存备用。


4.如权利要求1所述的姜花属植物根尖细胞染色体中期分裂相装片的方法,其特征在于,所述步骤一包括如下步骤:
一)将姜花属植物植株移至装有腐殖土与椰糠质量比8:2的套盆中,于室外树下培养;套盆的内盆有排水孔,外盆正常;
二)在移栽后2周后初次取根,以后每次取根间隔1周,取根时将外盆取出,即可取下从内盆排水孔...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵丽娟肖龙骞
申请(专利权)人:怀化学院
类型:发明
国别省市:湖南;43

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