一种STD核酸提取和检测试剂及方法技术

本发明专利技术揭示了一种STD核酸提取和检测试剂及方法，所述试剂包括核酸提取试剂和核酸检测试剂，核酸提取试剂包括细胞裂解液、核酸洗涤液和核酸洗脱液，核酸检测试剂包括可冻干的多重PCR反应缓冲液、STD不同病原体靶标基因的特异性引物及探针，以及内标质控的特异性引物及探针等，所述STD不同病原体包括沙眼衣原体、淋球菌、解脲脲原体和微小脲原体。本发明专利技术提供了一种针对STD核酸的提取、纯化和检测分型的试剂，该试剂灵敏度高、使用操作简便，耗时短，对操作人员的专业要求低，且整个封装试剂可以在常温下运输和储存。

An STD nucleic acid extraction and detection reagent and method

【技术实现步骤摘要】
一种STD核酸提取和检测试剂及方法
本专利技术涉及一种核酸提取纯化领域，尤其是涉及一种STD核酸提取和检测试剂及方法。
技术介绍
性传播疾病(SexuallyTransmittedDisease，STD)常见的病原体有以下几种：沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis，CT)、淋球菌(Neisseriagonorrhoeae，NG)、解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum，UU)、微小脲原体(Ureaplasmaparvum，UP)。其中，目前常规的病原检测技术有：(1)、分离培养技术：病原体分离培养，是早期的病原体检测的金标准。该方法具有较高的特异性和敏感性，但临床检测时间过长，过程繁琐，不适用于大范围检测。(2)、免疫学检测：以基于抗原-抗体的免疫反应，从蛋白水平对病原体进行检测。该方法存在检测灵敏度较低，且特异性受环境等影响较大，检测的窗口期较长，无法满足诊疗需求，仅适用于初筛而不能作为及时确诊的依据，不能够识别同一类病原的不同亚型等问题。(3)、基于PCR的检测方法：包括有普通PCR，荧光PCR法，基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，所述试剂包括核酸提取试剂和核酸检测试剂，所述核酸提取试剂包括细胞裂解液、核酸洗涤液和核酸洗脱液，所述核酸检测试剂包括可冻干的多重PCR反应缓冲液、STD不同病原体靶标基因的特异性引物及探针，以及内标质控基因的特异性引物及探针，所述STD不同病原体包括沙眼衣原体、淋球菌、解脲脲原体和微小脲原体。/n

【技术特征摘要】
1.一种STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，所述试剂包括核酸提取试剂和核酸检测试剂，所述核酸提取试剂包括细胞裂解液、核酸洗涤液和核酸洗脱液，所述核酸检测试剂包括可冻干的多重PCR反应缓冲液、STD不同病原体靶标基因的特异性引物及探针，以及内标质控基因的特异性引物及探针，所述STD不同病原体包括沙眼衣原体、淋球菌、解脲脲原体和微小脲原体。


2.根据权利要求1所述的STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，
所述细胞裂解液包括：10～15mM的Tris-HCl、2.5～5mM的EDTA、30～40％TritonX-100，以及内质控质粒模板；
所述核酸洗涤液包括：2.5～5mM的Tris-HCl、0.1～0.2mM的EDTA、0.7％Nacl；
所述核酸洗脱液包括：1.5～2.5mM的Tris-HCl。


3.根据权利要求1所述的STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，
所述可冻干的多重PCR反应缓冲液包括：50～70mM的Tris-Hcl、15～30mM的KCl、2.5～4.5mM的MgCl2、20～40μg/μL的BSA、0.2mM的dATP、0.4mM的dUTP、0.2mM的dCTP、0.2mM的dGTP、2～3U的DNA聚合酶、0.1～0.2U的TS-UNG酶、0.3～0.5M的海藻糖、0.001～0.002M的PEG8000、0.04～0.08M甘露醇。


4.根据权利要求1所述的STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，所述STD不同病原体靶标基因的特异性引物及探针的序列，以及内标质控的特异性引物及探针的序列为：









其中，F为上游引物序列，R为下游引物序列，P为双标记探针序列。


5.根据权利要求5所述的STD核酸提取和检测试剂，其特征在于，所述PCR检测试剂同时...

【专利技术属性】
技术研发人员：解信美，李红东，苗保刚，李明，彭年才，
申请(专利权)人：苏州天隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32