雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用，具体涉及一系列具有结构式(II)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物在清除β淀粉样蛋白的作用和制备抗阿尔茨海默症药物中的应用。雷帕霉素噻唑类衍生物具有通过促进细胞自噬清除β淀粉样蛋白的作用，该类化合物可改善痴呆小鼠的记忆、空间探索等认知能力，而且还具有低细胞毒性和低免疫抑制活性等方面的优点，该类化合物对应用于制备抗阿尔茨海默症药物具有广阔的市场应用前景。

Application of rapamycin thiazole derivatives in the preparation of anti Alzheimer's drugs

【技术实现步骤摘要】
雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用
本专利技术属于医药研究领域，具体涉及雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用。
技术介绍
阿尔茨海默症(Alzheimer’sdisease，AD)是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病，病理特征为β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结，以及神经元丢失伴胶质细胞增生等，目前尚未有有效的治疗药物。当前药物的研发也是围绕β淀粉样蛋白和Tau蛋白进行。mTOR(mammaliantargetofrapamycin)信号通路整合营养物质和生长因子等细胞外信号，调节包括蛋白质合成和自噬等细胞基础代谢过程，调控细胞的生长和代谢。mTOR信号通路在β淀粉样蛋白(Aβ)和tau蛋白诱导的神经退行性病变中起重要作用已得到证实。研究表明，抗真菌抗生素雷帕霉素(rapamycin，也称西罗莫司，sirolimus)通过抑制mTOR的活性，降低AD小鼠脑内β淀粉样蛋白的水平和聚集，改善小鼠的认知功能。尽管雷帕霉素在改善小鼠认知方面具有明显的效果，但是雷帕霉素本身具有很强的免疫抑制活性及一定的细胞毒性，可能会引起一系列的不良反应，因此寻找具有比雷帕霉素更低细胞毒性和免疫抑制活性的雷帕霉素新衍生物用于治疗阿尔茨海默症具有广阔的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种新的比雷帕霉素更低细胞毒性和免疫抑制活性的雷帕霉素衍生物，用于治疗阿尔茨海默症。本专利技术首次发现了雷帕霉素噻唑类衍生物具有降低β淀粉样蛋白和改善小鼠认知能力的作用，因此可作为制备抗阿尔茨海默症药物的原料来源。因此，本专利技术的第一个目的是提供雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用，所述的雷帕霉素噻唑类衍生物，其结构如式(II)所示：其中，X为“单键”或-O(CH2)n-，其中n为2、3或4；R1为氢、C原子数为1-10的烷基、C原子数为3-7的环烷基、C原子数为2-10的烯基或C原子数为2-10的炔基；R2为氢、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、羧基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、N-烷基氨基、N,N-二烷基氨基、烷基硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、烷氧基甲基、烷氧基乙基、烷基酰基、氨基甲酰基、N-烷基氨基甲酰基、N,N-二烷基氨基甲酰基、氨基磺酰基、N-烷基氨基磺酰基、N,N-二烷基氨基磺酰基或C原子数为1-3的亚烷基二氧基，其中所述烷基的C原子数为1-4，所述烷氧基的C原子数为1-4。本专利技术还提供一种抗阿尔茨海默症药物，其特征在于，含有有效量的所述的雷帕霉素噻唑类衍生物或其药用盐，和药学上可接受的载体。更优选的：本专利技术还提供雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用，所述的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7，其结构如式(I)所示：本专利技术还提供了式(I)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7在清除β淀粉样蛋白活性中的作用，通过细胞凋亡和半数抑制浓度IC50对这类化合物的细胞毒性和免疫抑制活性进行了测试，结果显示出式(I)的化合物相较于雷帕霉素所具备的低细胞毒性和低免疫抑制活性的特性，可显著降低药物的不良反应。本专利技术还提供了式(I)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7在改善痴呆小鼠记忆和空间探索认知能力的作用。本专利技术还提供一种抗阿尔茨海默症药物，其特征在于，含有有效量的式(I)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7或其药用盐，和药学上可接受的载体。通过细胞模型和动物模型相结合的方式，对式(I)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7清除β淀粉样蛋白的作用进行了详细的研究，并对式(I)所示的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7改善小鼠认知能力进行了验证，结果显示出式(I)为代表的雷帕霉素噻唑类衍生物清除β淀粉样蛋白的作用以及该类化合物可改善痴呆小鼠的记忆、空间探索等认知能力，相比于雷帕霉素，雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7抑制N2a-APP695细胞表达Aβ的活性与雷帕霉素相当，但是其具有更低细胞毒性和更低免疫抑制活性等方面的优点，因此可以应用于制备抗阿尔茨海默症药物，具有广阔的市场应用前景。本专利技术所涉及的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7为代表的雷帕霉素噻唑类衍生物公开于专利号为：CN2013107376567，专利技术名称为：含噻唑基雷帕霉素类衍生物及其应用的中国专利中，本领域技术人员可以按照其公开的方法获得，亦可通过商业购买获得。附图说明图1是FIM-X7和雷帕霉素降低N2a-APP695细胞表达的Aβ(*P<0.01，**P>0.05)。图2是FIM-X7与雷帕霉素对N2a-APP695细胞增殖抑制作用的比较(P<0.01)。图3是FIM-X7与雷帕霉素诱导N2a-APP695细胞凋亡效果的比较(*P>0.05，**P<0.01)。图4是FIM-X7与雷帕霉素对淋巴细胞转化抑制活性的比较(P<0.01)。图5是小鼠穿越平台次数比较，注：与NC组相比，**P<0.01。具体实施方式以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7(下称FIM-X7)降低N2a-APP695细胞表达β淀粉样蛋白1材料与主要试剂稳定表达突变型APP695的小鼠神经母细胞瘤N2a细胞(N2a-APP695)由厦门大学医学院神经研究所提供；雷帕霉素(纯度>99％)由福建科瑞药业有限公司生产，本专利技术的雷帕霉素噻唑类衍生物FIM-X7(纯度>95％)由专利技术人实验室福建省微生物研究所mTOR抑制剂研究室合成，其结构如式(I)所示，DMSO购自国药股份有限公司；G418购自Ameresco公司；兔抗mTOR、p-mTOR、4EBP、p-4EBP、APP、P62、LC3B、p-ULK1(757)、p70S6K1、p-p70S6K1和GAPDH购自CST；兔抗IDE和NEP购自Abcam公司；HRP标记羊抗兔IgG二抗购自BioworldTechnology公司；PVDF膜和ECL发光试剂购自Bio-red公司；DMEM培养基、胎牛血清、双抗、PBS、胰酶购自Hyclone公司；OPTI-MEM培养基购自Gibco公司；AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡试剂盒购自凯基生物技术有限公司，BCA蛋白定量试剂盒购自碧云天生物技术有限公司，ELISA试剂盒购自Thermerfish公司。2实验方法2.1ELISA检测FIM-X7对细胞产生β淀粉样蛋白的影响传代培养N2a-APP695细胞[细胞培养基配方为：DMEM:OPTI-MEM(1:1)、10％FBS、100μg/ml硫酸链霉素、100IU/ml青霉素、200μg/mlG418(遗传霉素)，其配制方法是将DMEM培养基和OPTI-MEM按照体积比1:1混本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用，所述的雷帕霉素噻唑类衍生物，其结构如式(II)所示：/n

【技术特征摘要】
1.雷帕霉素噻唑类衍生物在制备抗阿尔茨海默症药物中的应用，所述的雷帕霉素噻唑类衍生物，其结构如式(II)所示：



其中，
X为“单键”或-O(CH2)n-，其中n为2、3或4；
R1为氢、C原子数为1-10的烷基、C原子数为3-7的环烷基、C原子数为2-10的烯基或C原子数为2-10的炔基；
R2为氢、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、羧基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、N-烷基氨基、N,N-二烷基氨基、烷基硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、烷氧基甲基、烷氧基乙基、烷基酰基、氨基甲酰基、N-烷基氨基甲酰基、N,N-二烷基氨基甲酰基、氨基磺酰基、N-烷基氨基磺酰基、N,N-二烷基氨基磺酰基...

【专利技术属性】
技术研发人员：李夸良，黄捷，吕裕斌，陈洲，程元荣，潘福生，李邦良，谢立君，
申请(专利权)人：福建省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35