一种基于模拟酶测定痕量过氧化氢的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于模拟酶测定痕量过氧化氢的方法。于11支比色管中，分别加入B‑R缓冲液、β‑CD‑FeC

A method for the determination of trace hydrogen peroxide based on simulated enzyme

【技术实现步骤摘要】
一种基于模拟酶测定痕量过氧化氢的方法
本专利技术涉及痕量过氧化氢的测定方法，特别是基于β-环糊精、聚乙二醇辛基苯基醚、四羧基铁酞菁三者形成的复合物为模拟酶测定过氧化氢的共振散射光谱法。
技术介绍
过氧化氢作为一种强氧化剂，具有杀菌、消毒、漂白等功能，在医药、食品、化工等行业应用广泛。大气及雨水中过氧化氢普遍存在，是酸雨形成的主要原因。因此，对过氧化氢的检测具有重要的意义。共振散射光谱法因具有操作简单、灵敏度高、检出限低等优点，已被用于很多物质的分析中，在测定过氧化氢方面也逐渐有一些报道。四羧基铁酞菁(FeC4Pc)是一种过氧化物模拟酶，它可催化过氧化氢氧化邻苯二胺(OPD)生成中间产物2,3-二氨基-5,10-二氢吩嗪和最终产物2,3-二氨基吩嗪，2种产物均可诱导纳米金发生聚集，使体系的共振散射强度增强。在反应体系中加入β-环糊精(β-CD)和聚乙二醇辛基苯基醚(OP)后，FeC4Pc与β-CD、OP生成OP-β-CD-FeC4Pc复合物，可改变模拟酶在催化反应中的微环境，进一步提高模拟酶的催化活性。根据反应前后体系共振散射强度的变化可建立一种定量测定痕量过氧化氢的新方法，此方法目前未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种以β-环糊精、聚乙二醇辛基苯基醚、四羧基铁酞菁三者形成的复合物为模拟酶测定过氧化氢的共振散射光谱法。具体步骤为：(1)将β-CD饱和溶液与浓度为1.0×10-6mol/L的FeC4Pc按体积比为1:3的比例混合均匀，放置12小时，得β-CD-FeC4Pc混合溶液。(2)于11支5mL比色管中，分别加入0.06mLpH＝5.0的伯瑞坦-罗比森(Britton-Robinson,B-R)缓冲溶液、0.12mL步骤(1)所得的β-CD-FeC4Pc混合溶液、0.04mL浓度为0.5g/L的聚乙二醇辛基苯基醚(OP)溶液和0.9mL浓度为0.01mol/L的邻苯二胺(OPD)溶液，然后依次加入0.0、0.0001、0.001、0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.1、0.12、0.14mL浓度为8.0×10-6mol/L的H2O2溶液，于27℃水浴中反应20分钟后，再在每支比色管中加入0.6mL浓度为58.0μg/mL的纳米金(AuNPs)溶液，摇匀，立刻用二次蒸馏水稀释至刻度，室温放置10分钟后，用1cm石英比色皿于荧光光度计上以λex＝λem的方式扫描共振散射光谱。在700nm波长处分别测定加有H2O2溶液的共振散射强度I700nm和不加H2O2的试剂空白溶液的共振散射强度I0，计算共振散射强度的差值ΔI700nm＝I700nm-I0，其共振散射强度的差值ΔI700nm与H2O2浓度c在1.60×10-10～2.24×10-7mol/L范围内成线性关系，线性回归方程为ΔI＝0.8420×109c-0.6400，相关系数0.9983，检出限8.90×10-11mol/L；另取池塘水、新鲜雨水和河水过滤，取0.2mL滤液同法测定共振散射强度值，计算出池塘水、新鲜雨水和河水中H2O2的含量。本专利技术测定方法选择性好、灵敏度高。附图说明图1为本专利技术实施例空白与6.4×10-8mol/LH2O2的共振散射光谱图；图中标记：a：空白；b：pH5.0B-R缓冲液-0.5g/LOP-0.01mol/LOPD-OP-β-CD-FeC4Pc-6.4×10-8mol/LH2O2-AuNPs。具体实施方式实施例：(1)将β-CD饱和溶液与浓度为1.0×10-6mol/L的FeC4Pc按体积比为1:3的比例混合均匀，放置12小时，得β-CD-FeC4Pc混合溶液。(2)于11支5mL比色管中，分别加入0.06mLpH＝5.0的伯瑞坦-罗比森(Britton-Robinson,B-R)缓冲溶液、0.12mL步骤(1)所得的β-CD-FeC4Pc混合溶液、0.04mL浓度为0.5g/LOP溶液和0.9mL浓度为0.01mol/LOPD溶液，然后依次加入0.0、0.0001、0.001、0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.1、0.12、0.14mL浓度为8.0×10-6mol/LH2O2溶液，于27℃水浴中反应20分钟后，再在每支比色管中加入0.6mL浓度为58.0μg/mL的纳米金(AuNPs)溶液，摇匀，立刻用二次蒸馏水稀释至刻度，室温放置10分钟后，用1cm石英比色皿于荧光光度计上以λex＝λem的方式扫描共振散射光谱。在700nm波长处分别测定加有H2O2溶液的共振散射强度I700nm和不加H2O2的试剂空白溶液的共振散射强度I0，计算共振散射强度的差值ΔI700nm＝I700nm-I0，其共振散射强度的差值ΔI700nm与H2O2浓度c在1.60×10-10～2.24×10-7mol/L范围内成线性关系，线性回归方程为△I＝0.8420×109c-0.6400，相关系数0.9983，检出限8.90×10-11mol/L；另取池塘水、新鲜雨水和河水过滤，取0.2mL滤液同法测定共振散射强度值，代入上述回归方程中，计算出池塘水、新鲜雨水和河水中H2O2的含量。同时做加标回收实验，结果见表1。表1水样分析结果(n＝5)样品测定值(10-8mol/L)回收率(％)RSD(％)池塘水3.9398.032.1雨水2.62101.173.2河水2.35100.333.2。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定痕量过氧化氢的方法，其特征在于具体步骤为：/n（1）将β-CD饱和溶液与浓度为1.0×10

【技术特征摘要】
1.一种测定痕量过氧化氢的方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将β-CD饱和溶液与浓度为1.0×10-6mol/L的FeC4Pc按体积比为1:3的比例混合均匀，放置12小时，得β-CD-FeC4Pc混合溶液；
（2）于11支5mL比色管中，分别加入0.06mLpH=5.0的伯瑞坦-罗比森缓冲溶液、0.12mL步骤（1）所得的β-CD-FeC4Pc混合溶液、0.04mL浓度为0.5g/L的聚乙二醇辛基苯基醚溶液和0.9mL浓度为0.01mol/L的邻苯二胺溶液，然后依次加入0.0、0.0001、0.001、0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.1、0.12、0.14mL浓度为8.0×10-6mol/L的H2O2溶液，于27℃水浴中反应20分钟后，再在每支比色管中加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐宁莉，王文平，慕欣悦，梁文汇，王仪敏，单雅琦，
申请(专利权)人：桂林理工大学，
类型：发明
国别省市：广西;45