米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用。将米卡芬净用于治疗缺血/再灌注损伤，尤其是治疗心肌组织缺血，更尤其是对心肌缺血/再灌注的保护作用，能显著减轻心肌缺血/再灌注损伤。

【技术实现步骤摘要】
米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用
本专利技术涉及米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用，属于生物医药领域。
技术介绍
心肌梗死主要是由心脏缺血引起。据预测，至2020年，全国心肌梗死病人可能达900多万，如果没有及时再灌注或没有侧支循环存在时，心肌细胞将造成不可逆地损伤并被几乎无收缩功能的纤维疤痕组织所代替。因此，再灌注治疗是限制梗塞面积和改善缺血后心脏功能的常用手段；然而除缺血外，再灌注本身也会给心肌造成损伤，统称为“心肌缺血/再灌注(I/R)损伤”。但再灌注治疗往往伴随着一些心肌损伤，引起病理生理学病变。由缺血后再灌注引起的进一步损伤被称为I/R损伤。心肌I/R损伤涉及氧化应激、钙超载、能量代谢障碍、炎症反应等多种机制，导致心肌细胞出现坏死、凋亡等多种死亡方式。米卡芬净为棘白菌素类抗真菌药，棘白菌素类抗真菌药能抑制真菌细胞壁生成，通过非竞争性抑制葡聚糖合成酶，导致真菌细胞生长过程中细胞壁葡聚糖缺乏，渗透压失常，最终产生真菌细胞溶解。米卡芬净是半合成的新型棘白菌素类抗真菌药，对于念珠菌、曲霉菌等有良好的抑制活性，目前主要用于侵袭性曲霉菌的治疗，不良反应少，但是否具有抗缺血/再灌注损伤作用尚未见报道。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案如下：本专利技术所述米卡芬净的结构式如下所示米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用。进一步地，所述缺血/再灌注损伤包括心肌缺血/再灌注损伤、脑缺血/再灌注损伤、肝缺血/再灌注损伤和肾缺血/再灌注损伤中的一种或几种。进一步地，所述心肌缺血/再灌注损伤包括缺血性心脏病。进一步地，所述应用中的给药方式为腹腔注射、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、口服给药中的一种。进一步地，所述应用中的给药方式为腹腔注射给药。进一步地，所述治疗缺血/再灌注损伤药物可以制备成药剂学上可以接受的任意一种剂型。进一步地，所述治疗缺血/再灌注损伤药物的剂型包括注射剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液、滴丸中的一种。本专利技术人在离体细胞药物筛选过程中，发现米卡芬净能降低大鼠心肌梗死面积和血清肌酸激酶活性，减少心肌细胞死亡。本专利技术通过实验表明，米卡芬净可显著降低心肌缺血梗死体积、血清肌酸激酶活性，减少心肌细胞死亡。因此，米卡芬净能用于制备治疗治疗缺血/再灌注损伤药物，具有良好的开发应用前景。本专利技术扩大了米卡芬净的适应症，可适用于心肌缺血/再灌注损伤。本专利技术涉及的米卡芬净在制备治疗治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用属于首次公开，对于可显著降低心肌缺血梗死体积、血清肌酸激酶活性，减少心肌细胞死亡，是意想不到的，与米卡芬净的已知用途毫不相关，也不存在现有其他化合物给出相关启示，具备突出的实质性特点，用于治疗缺血/再灌注损伤具有显著的进步。附图说明图1：米卡芬净对大鼠心肌梗死面积及血清肌酸激酶活性的影响；缺血30分钟给药，A-米卡芬净给药后，大鼠心肌组织TTC染色及梗死体积测定，B-米卡芬净给药后，血清肌酸激酶活性。图2：米卡芬净对低氧复氧(H/R)处理H9c2细胞坏死(LDH释放率)的影响：米卡芬净给药后，心肌细胞培养液中LDH释放率。具体实施方式以下通过实验来进一步说明其药物活性。动物实验：米卡芬净对心肌缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用。实施药品：市购获得。米卡芬净溶于DMSO。实验动物：体重250～300g的健康雄性SD大鼠。将实验动物在温度25℃、相对湿度60％、自由饮水、定时定量的环境中饲养一周，然后按实验各分组要求腹腔给药。大鼠心肌缺血模型建立方法：SPF级Sprague-Dawley大鼠用3％戊巴比妥钠(0.1mL/kg)进行腹腔注射麻醉后，固定于鼠板上，剔除颈部和左胸的毛发。将大鼠肢体连接到心电图机，观察手术过程中大鼠心电图的变化。钝性分离颈部肌肉，暴露气管，在气管上剪开一个“T”型切口，将与呼吸机连接的软管的另一端插入大鼠气管，并用丝线固定。呼吸机参数设置为潮气量为7mL/kg，频率每分钟53次。待大鼠呼吸平缓后，于左胸第三、四肋间处用止血钳钝性分离各层肌肉，固定胸骨，轻轻挑开心包膜，暴露整个心脏。待心跳恢复规律以后，快速挤出心脏，在肺动脉圆锥与左心耳之间可观察到明显的左冠状静脉，用5-0缝合线穿一截塑料软管结扎冠状动脉左前降支，或从左心耳下方2-3mM处穿针至肺动脉圆锥下方，迅速将心脏复位并快速结扎。监测大鼠心电图变化，以ST段抬高，并同时能肉眼观察到心尖处变白等指标判定心肌梗死。缺血1小时后，剪开心脏结扎处的塑料软管，结扎线即断开，心脏恢复血流灌注。再灌注3小时后，剪开开胸处的胸骨，心尖取血2-3mL。心尖采血后取出心脏，剪掉结扎处上方的所有心肌组织，除去右心室及室间隔。－20℃冰箱冷冻30min后，取出，将心脏切成厚薄均匀的片块，加入1％TTC染液(PBS配制)37℃共孵育15min。染色结束，去除染液，PBS洗涤一次，4％多聚甲醛固定24小时后取出心脏切片，观察染色情况并拍照。梗死区域呈现白色，非梗死区呈现红色；ImageJ软件测定心肌梗死面积。实验分组：将实验动物随机分为6组，即：正常对照组(Control组)：不进行手术处理；假手术组(Sham组)：对大鼠心脏进行手术，但不做血管结扎；心肌缺血/再灌注组(I/R组)：结扎左冠状动脉前降支1小时，剪线，再灌注3小时；心肌缺血/再灌注组+米卡芬净低剂量组(I/R+micafunginL，4mg/kg):在大鼠缺血30min后腹腔注射给药，给药剂量4mg/kg；心肌缺血/再灌注组+米卡芬净高剂量组(I/R+micafunginH，10mg/kg):在大鼠缺血30min后腹腔注射给药，给药剂量10mg/kg；心肌缺血/再灌注组+溶媒组(vehicle+I/R，2％DMSO)：在大鼠缺血30min后腹腔注射溶媒2％DMSO收集心肌组织并测定相关指标：大鼠心肌梗死面积测定及血清肌酸激酶活性检测。血清肌酸激酶(CK)活性检测缺血/再灌注手术结束后，心尖采血1-2mL，3000rpm，4℃，离心10min后取上清，-40℃保存。按照试剂盒说明书测定血清CK活性步骤如下：取10mLR2溶解一瓶R1配成工作液，取4μL血清，加到200μLCK试剂盒工作液中，37℃孵育2min，酶标仪下波长设定为340nm，分别在0、1、2、3min时读取吸光度A0，A1，A2，A3，计算每分钟平均吸光度的变化(△A)，计算血清中CK的浓度(U/L)。H9c2细胞的H/R损伤模型的建立及其分组H9c2细胞长至融合度为90％时，传代并种板，用含10％FBSDMEM的正常培养基于95％空气、5％CO2、37℃细胞培养箱中培养。待细胞长至融合度为70-80％左右时，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.米卡芬净在制备治疗缺血/再灌注损伤药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述缺血/再灌注损伤包括心肌缺血/再灌注损伤、脑缺血/再灌注损伤、肝缺血/再灌注损伤和肾缺血/再灌注损伤中的一种或几种。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述心肌缺血/再灌注损伤包括缺血性心脏病。


4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述应用中的给药方式为腹腔注射、静脉注射、肌...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗秀菊，唐励静，王婀莉，周媛静，刘为宁，王倩琳，彭军，刘斌，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43