一种载体中棕榈蓟马聚集信息素释放速率的测定方法技术

本发明专利技术属于农业虫害防治生理指标测定技术领域，具体涉及一种棕榈蓟马聚集信息素(R)‑lavandulyl 3‑methyl‑3‑butenoate释放速率的测定方法。该方法将固相微萃取技术和气相色谱‑质谱联用技术相结合，通过测定载体中(R)‑lavandulyl 3‑methyl‑3‑butenoate的释放量进行释放速率的测定，其中载体为PVC管载体，固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为10000ng。固相微萃取所使用的萃取头为100μm的Polydimethylsiloxane Coating萃取头。本发明专利技术所述的方法能够实现棕榈蓟马信息素(R)‑lavandulyl 3‑methyl‑3‑butenoate在载体中释放速率的快速、准确测定，该方法为明确信息素组分在载体上的释放模式提供了可行方法。

A method for the determination of release rate of aggregation pheromone of Palmetto thrips in carrier

【技术实现步骤摘要】
一种载体中棕榈蓟马聚集信息素释放速率的测定方法
本专利技术属于农业虫害防治生理指标测定
，具体涉及一种载体中棕榈蓟马聚集信息素释放速率的测定方法。
技术介绍
蓟马是农作物上常见的重要害虫，其通过直接取食作物和间接传播病毒给作物造成了巨大的经济损失。目前在全球分布比较广且给农作物造成巨大危害的蓟马种类主要有花蓟马属的花蓟马(Frankliniellaintonsa)和西花蓟马(F.occidentalis)以及蓟马属的棕榈蓟马(Thripspalmi)等。由于蓟马具有个体微小、隐秘性强、繁殖力强、极易产生抗药性等特点，化学防治防控效果不是非常理想。再加上农药的大量使用在控制虫害的同时，也带来了农药残留超标、环境污染、害虫抗药性与再猖獗等一系列问题，发展绿色防控技术迫在眉睫。昆虫信息素是一种非化学控制措施，不仅可以进行害虫种群监测和防治，同时也可以和其他防治措施相结合以提高虫害防治效果。聚集信息素是信息素的一种，由雌虫和雄虫或者任一性别的昆虫产生，能够引起雌、雄两性同种昆虫聚集。已有三种主要蓟马害虫的聚集信息素被分离鉴定。花蓟马属的西花蓟马和花蓟马的聚集信息素主要活性成分相同，为neryl-(S)-2-methylbutanoate(苨肉基(S)-2-甲基丁酸酯)和(R)-lavandulylacetate((R)-薰衣草乙酸酯)。蓟马属的棕榈蓟马的聚集信息素活性组分为(R)-lavandulyl3-methyl-3-butenoate((R)-3-甲基-3-丁烯酸薰衣草酯)。由于昆虫信息素的组分多具有挥发性，在自然条件下易挥发和降解，需要借助缓释载体来保护信息素免受环境降解，保持信息素的稳定均匀释放。信息素在载体中的持效期与其释放速率密切相关。当前，没有公开对蓟马聚集信息素在不同缓释载体的释放速率进行测定的稳定方法。固相微萃取法(solidphasemicroextraction,SPME)是一种新型样品前处理方法,该技术集取样、萃取、浓缩于一体，不需要有机溶剂，具有快速高效、成本低、安全性高，能够与其他仪器联用等众多优点，在昆虫信息素研究中得到了广泛应用。固相微萃取法的成功应用与萃取时条件的选取密切相关。影响固相微萃取的因素包括样品量多少、PH值、萃取时间、萃取温度、萃取涂层种类等，对于人工合成聚集信息素组分在诱芯载体中聚集信息素组分的萃取条件尚未明确，操作简单、快速、灵敏度高的测定方法对于研究信息素在载体中的释放规律至关重要。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种载体中蓟马聚集信息素释放速率的测定方法，可以快速、准确地测定不同载体中信息素的释放量。本专利技术采用固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术研究蓟马三种信息素在橡胶塞和PVC管两种载体中的释放速率，通过对比不同萃取时间和不同剂量下的释放速率，筛选适宜于不同信息素的最佳萃取条件。本专利技术小组惊奇地发现在温度25±1℃、相对湿度60％±5％条件下，使用固相微萃取进行载体中释放速率测定时针对不同的信息素，不同的载体具有不同的适应性，固相微萃取并不适宜于任何剂量的任何信息素在任意一种载体中释放速率的测定。本专利技术的目的之一是提供一种载体中蓟马信息素(R)-lavandulylacetate释放速率的测定方法，该方法将固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用技术相结合，通过测定载体中(R)-lavandulylacetate的释放量进行释放速率的测定，作为优选的一种方案，所述载体为橡胶塞载体，所述固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为1000ng、10000ng或100000ng。本专利技术小组发现，在橡胶塞载体中，剂量为1000ng、10000ng和100000ng的(R)-lavandulylacetate的释放速率在萃取时间分别为30min、1h和2h时没有显著变化，即实验结果在萃取30min、1h和2h都相对稳定可靠，为实现快速检测，优选萃取时间为30min；而在PVC管载体中，这三种剂量的(R)-lavandulylacetate的释放速率在萃取时间分别为30min、1h和2h时具有明显变化，说明固相微萃取的萃取时间会对释放速率测定结果产生明显较大的影响，此时应用该方法进行测定所得到的结果并不稳定，说明该方法并不适宜于在以PVC管为载体的(R)-lavandulylacetate释放速率的测定。作为优选的一种方案，所述固相微萃取所使用的萃取头为100μm的PolydimethylsiloxaneCoating萃取头。作为优选的一种方案，所述固相微萃取的萃取条件为温度25±1℃，相对湿度60％±5％，光照周期为14L:10D。作为优选，所述的测定方法包括如下步骤：(1)将制备好的诱芯放置在温度25±1℃，相对湿度60％±5％，光照周期为14L:10D的人工气候室中，采用100μm的PolydimethylsiloxaneCoating萃取头萃取30min；(2)将萃取的样品通过气相色谱-质谱联用仪进行分析，根据标准曲线计算释放量；(3)根据释放量和时间计算得到释放速率。作为优选，该测定方法可应用于测定橡胶塞载体中(R)-lavandulylacetate的释放量或释放速率。本专利技术的另一个目的是提供一种载体中蓟马信息素neryl-(S)-2-methylbutanoate释放速率的测定方法，该方法将固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用技术相结合，通过测定载体中neryl-(S)-2-methylbutanoate的释放量进行释放速率的测定，作为优选的一种方案，所述载体为橡胶塞载体或PVC管载体，所述固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为10000ng或100000ng。本专利技术小组发现，在橡胶塞或PVC管载体中，10000ng和100000ng的neryl(S)-2-methylbutanoate的释放速率在萃取时间分别为30min、1h和2h时没有显著变化，即实验结果在萃取30min、1h和2h都相对稳定可靠，为实现快速检测，优选萃取时间为30min；而剂量为1000ng的neryl(S)-2-methylbutanoate在橡胶塞载体中的释放速率无法检测，在PVC管载体中的释放速率在萃取时间分别为30min、1h和2h时具有明显变化，说明固相微萃取的萃取时间会对释放速率测定结果产生明显较大的影响，此时应用该方法进行测定所得到的结果并不稳定，说明该方法不适宜于在以橡胶塞或PVC管为载体的剂量为1000ng的neryl(S)-2-methylbutanoate释放速率的测定。作为优选的一种方案，所述固相微萃取所使用的萃取头为100μm的PolydimethylsiloxaneCoating萃取头。作为优选的一种方案，所述固相微萃取的萃取条件为温度25±1℃，相对湿度60％±5％，光照周期为14L:10D。作为优选，所述的测定方法包括如下步骤：(1)将制备好的诱芯放置在温度25±1℃，相对湿度60％±5％，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种载体中棕榈蓟马信息素(R)-lavandulyl 3-methyl-3-butenoate释放速率的测定方法，该方法将固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用技术相结合，通过测定载体中(R)-lavandulyl 3-methyl-3-butenoate的释放量进行释放速率的测定，其特征在于，所述载体为PVC管载体，所述固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为10000ng。/n

【技术特征摘要】
1.一种载体中棕榈蓟马信息素(R)-lavandulyl3-methyl-3-butenoate释放速率的测定方法，该方法将固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用技术相结合，通过测定载体中(R)-lavandulyl3-methyl-3-butenoate的释放量进行释放速率的测定，其特征在于，所述载体为PVC管载体，所述固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为10000ng。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相微萃取所使用的萃取头为100μm的PolydimethylsiloxaneCoating萃取头。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相微萃取的萃取条件为温度25...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓维，吕要斌，章金明，张治军，林文彩，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33