一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法及其制得的压片技术

技术编号:23443876 阅读:123 留言:0更新日期:2020-02-28 18:39
本发明专利技术提供了一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法及其制得的压片,方法包括以下步骤:将健康的草莓植株根部清洁后,保湿放置;将新长的根尖剪下,清洗备用;去除根尖断面,放入8‑羟基喹啉中,避光处理;用KCl浸泡根尖;用固定液冷藏固定根尖;清洗固定后的根尖,将其放入HCl中水浴解离;清洗解离后的根尖,对其滴加70%冰醋酸;将根尖置于载玻片上,制片,以待镜检。本发明专利技术通过确定每一步的处理时间、处理温度以及操作方法,获得了一种成熟、稳定、分裂相多、均匀、清晰、可重复性高染色体压片技术,为开展种鉴定、倍性鉴定和种间亲缘关系确定提供必要的技术支持。

A rapid method for obtaining the chromosome of strawberry root tip

【技术实现步骤摘要】
一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法及其制得的压片
本专利技术涉及草莓根尖染色体压片方法,特别涉及一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法及其制得的压片。
技术介绍
草莓属于蔷薇科(Rosaceae)蔷薇亚科(Rosoideae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。其近缘种植物包括蛇莓属(Duchesnea)和委陵菜属(Potentilla),它们的染色体基数均为x=7。草莓属倍性丰富,自然界中分布有二倍体(2n=2x=14)、四倍体(2n=4x=28)、六倍体(2n=6x=42)、八倍体(2n=8x=56)等不同的倍性。草莓属种质资源丰富,已知全世界约有24个野生种,我国有11个草莓野生种的自然分布,野生草莓资源不仅对不良环境具有较好的生态适应性,还蕴藏着丰富的抗性基因,野生草莓资源是草莓新品种改良的潜力所在,是栽培种改良非常重要的遗传资源。目前,资源圃资源的分类鉴定是一项常规性工作,倍性鉴定在植物遗传育种上具有重要的作用,准确鉴定资源的倍性水平对于品种的鉴定、杂交组合的选配、杂交后代材料的前筛选、亲缘关系的鉴定等均具有十分重要的意本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于,包括以下步骤:/n步骤1:材料预处理/n将健康的草莓植株根部清洁后,保湿放置30-50h;/n步骤2:取材/n将新长出的根尖在0.8-1.2cm处剪下,并将剪下的根尖清洗后备用;/n步骤3:浓缩、低渗/n去除根尖断切面后,将其放入0.002M的8-羟基喹啉中,室温下避光处理2-4h后,处理后用0.075M的KCl浸泡根尖20-40min;/n步骤4:固定、解离/n用固定液将根尖冷藏固定24h以上,然后清洗去除固定液后,再将根尖放入1M的HCl中,水浴10-20min进行解离;/n步骤5:制片预处理/n将解离后的根尖清洗后,向其滴加70%冰醋...

【技术特征摘要】
1.一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:材料预处理
将健康的草莓植株根部清洁后,保湿放置30-50h;
步骤2:取材
将新长出的根尖在0.8-1.2cm处剪下,并将剪下的根尖清洗后备用;
步骤3:浓缩、低渗
去除根尖断切面后,将其放入0.002M的8-羟基喹啉中,室温下避光处理2-4h后,处理后用0.075M的KCl浸泡根尖20-40min;
步骤4:固定、解离
用固定液将根尖冷藏固定24h以上,然后清洗去除固定液后,再将根尖放入1M的HCl中,水浴10-20min进行解离;
步骤5:制片预处理
将解离后的根尖清洗后,向其滴加70%冰醋酸,放置3-5min;
步骤6:制片
将根尖置于载玻片上,滴加70%的冰醋酸后,盖上盖玻片,当细胞分散均匀后,再在载玻片上滴加固定液,然后将压片加热固定,以待镜检。


2.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤1中用潮湿的报纸或者纸巾将根部包裹以保湿,置于25℃放置48h。


3.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤2具体操作过程为,在上午9:00-10:00之间,选取新长出的粗根尖,在离根尖1cm处剪下,并将剪下的根尖用去离子水清洗后备用。


4.根据权利要求1所述的一种快速获得草莓根尖染色体的压片方法,其特征在于:步骤3具体操作过程...

【专利技术属性】
技术研发人员:庞夫花赵密珍周宇韬王珑静陈晓东蔡伟建王静
申请(专利权)人:江苏省农业科学院
类型:发明
国别省市:江苏;32

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