利用血液生物标志物诊断肌肉衰弱相关疾病的方法和试剂盒技术

本发明专利技术涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物和试剂盒，所述组合物和试剂盒包含用于测量凝溶胶蛋白和四连接素的表达水平的试剂，并且本发明专利技术涉及通过使用所述组合物和试剂盒来诊断肌肉衰弱相关疾病的方法。根据本发明专利技术的用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物、试剂盒和方法使得可以通过分子诊断以容易和快速的方式诊断肌肉衰弱相关疾病，从而系统地管理肌肉衰弱相关疾病，同时提高针对肌肉衰弱相关疾病的治疗功效。

Methods and kits for the diagnosis of muscle weakness related diseases by blood biomarkers

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用血液生物标志物诊断肌肉衰弱相关疾病的方法和试剂盒
本专利技术涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物和试剂盒，该组合物和试剂盒包含用于测量凝溶胶蛋白或四连接素的表达水平的试剂，并且本专利技术涉及通过使用所述组合物和试剂盒来诊断肌肉衰弱相关疾病的方法。
技术介绍
每个人的肌肉质量在50至70岁时减少约10％至15％，在70至80岁时减少至少30％，这会导致肌肉力量和功能下降。特别地，肌肉减少症是指由于衰老而导致的肌肉力量的减少和骨骼肌质量的减少。肌肉减少症最重要的特征不仅是肌肉质量的减少，而且还观察到了肌纤维类型的变化。1型和2型肌纤维的厚度以相似的速率下降，而在肌肉减少症下，2型肌纤维的厚度没有明显变化，但1型肌纤维的厚度却明显减小。据报道，这种肌肉减少症在老年人中引起衰老和功能障碍(RoubenoffR.,Can.J.Appl.Physiol.26,78-89,2001)。导致肌肉衰弱的疾病包括：随年龄发展的肌肉减少症；由蛋白质代谢失衡和肌肉使用减少引起的肌肉萎缩；肌营养不良症；恶病质；和随着饥饿、衰弱疾病(例如癌症等)和衰老而发展的心肌萎缩(acardiotrophy)。肌肉萎缩或肌肉消耗可以定义为由于肌肉本身的疾病、控制肌肉的神经损伤或肌肉废用而发生的肌肉组织的消耗或损失。常见原因可能是由于肌肉废用而发生的所谓的“废用性萎缩”。即，在社交活动减少的人的情况下，肌张力本身降低，从而导致进行性萎缩。通过积极运动可以在某种程度上使这种萎缩恢复。与此不同，如果一个人必须躺在床上，就会发生严重的肌肉消耗。此外，居住在没有重力(没有摩擦力)的地方的人也由于钙和肌肉力量减少而表现出肌肉力量下降的症状。另外，除了废用以外的原因可以大致分为两种。首先，由控制肌肉的神经损伤引起的肌肉萎缩包括以下疾病。肌萎缩性侧索硬化症(ALS；也称为卢贾里格氏症(LouGehrig'sdisease))是一种由于使肌肉移动的运动神经周围的髓鞘异常而没有发生对肌肉的神经传导，造成肌肉运动性丧失，从而导致肌肉萎缩的疾病。吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barresyndrome)(急性炎症性脱髓鞘性多神经病)是一种类似ALS的由于髓鞘的结构缺陷而发生在儿童中的疾病。吉兰-巴雷综合征是一种从腿部肌肉开始渐进爬升至上身肌肉，最终使呼吸肌(隔膜肌)瘫痪，导致由于呼吸困难而死亡的疾病。第二，由肌肉疾病引起的肌肉萎缩本身包括以下疾病。重症肌无力是一种导致将电信号传输至肌纤维的神经递质乙酰胆碱传输异常的疾病。发生这种疾病的原因是，由于突触后肌纤维中乙酰胆碱受体的先天性或获得性缺乏或抗体攻击引起的受体数量减少，神经冲动没有传递至肌肉。肌营养不良症是一种发生在肌肉本身中而不会损害中枢神经系统或周围神经系统的遗传性疾病。这种疾病仅在出生后一年或一年半内就可以被诊断出来，但在大多数情况下在2至4岁时出现，在某些情况下也可能会在成熟年龄出现。肌营养不良症是指30多种遗传性疾病的集合，这些遗传性疾病会导致在自主运动中使用的骨骼肌渐进性衰弱和退化。在所有类型的肌营养不良症中，肌肉渐进性退化和衰弱，最终许多患者失去行走能力。这种肌营养不良症分为九大类。具体地，根据肌肉衰弱的程度和分布、发作的年龄、进展速度、症状的严重程度、家族史等将肌营养不良症分为杜氏肌营养不良症、贝克尔肌营养不良症、肢带肌营养不良症、埃-德二氏肌营养不良症(Emery-Dreifussmusculardystrophy)、面肩胛肱型肌营养不良症、强直性肌营养不良症、眼咽肌营养不良症、远端肌营养不良症和先天性肌营养不良症。恶病质或消耗综合症的特征是体重减轻、肌肉萎缩疲劳、虚弱、食欲降低等。在恶病质的情况下，即使摄入营养也不能使体重减轻得到恢复。恶病质可能发生在患有癌症、AIDS、乳糜泻、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、多发性硬化症、充血性心力衰竭、肺结核、家族性淀粉样多神经病、汞中毒(肢端疼痛)和激素缺乏等疾病的患者中。恶病质在这些患者中的发生可被认为是患者疾病严重程度的增加，并且患有恶病质的患者由于虚弱和疲劳的增加而可能使不活动性增加，并且他们可能无法有效响应常规治疗。肌肉减少症也是恶病质的病理症状。肌肉减少症是由多种因素引起的，但是对每种因素的研究仍然不足。它是由生长激素的减少或神经学改变，生理活动的改变，新陈代谢的改变，性激素、脂肪或分解代谢性细胞因子的数量增加，以及蛋白质的合成和分化之间的平衡变化所引起的(RoubenoffR.andHughesV.A.,J.Gerontol.A.Biol.Sci.Med.Sci.55,M716-M724,2000)。另外，由于人口老龄化，肌肉减少症正在迅速增加，并且最近已在ICD-10-CM(临床修订版)中进行了编号，分配了疾病代号M62.84，因此其重要性已经提高。但是，尚未开发出用于诊断可能在整个老年人群中出现的肌肉老化的测试工具。目前，使用物理测试(手握力度、步行速度等)和双能X射线吸收计量法(DEXA)射线照相术(或CT)作为测试工具。但是，上述测试的问题在于它们非常不方便，引起辐射危害，并且不经济。因此，迫切需要研究和开发能够通过分子诊断工具代替如上所述的常规方法来以简单的方式诊断包括肌肉减少症的肌肉衰弱相关疾病的方法。现有技术文献专利文件KR10-2015-0131556(2005年11月25日)；KR10-2011-0001068(2011年1月6日)。
技术实现思路
技术问题本专利技术涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量四连接素蛋白表达水平的试剂。本专利技术还涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量凝溶胶蛋白表达水平的试剂。本专利技术还涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量四连接素和凝溶胶蛋白的表达水平的试剂。本专利技术还涉及用于诊断肌肉衰弱相关疾病的试剂盒，所述试剂盒包含用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量四连接素和凝溶胶蛋白的表达水平的试剂。本专利技术还涉及用于提供诊断肌肉衰弱相关疾病的信息的方法，该方法包括以下步骤：(a)测量获自对象的生物样品中四连接素和凝溶胶蛋白的表达水平；和(b)当四连接素和凝溶胶蛋白的表达水平高于正常组时，确定该对象患有肌肉衰弱相关疾病。本专利技术还涉及用于提供诊断肌肉衰弱相关疾病的信息的方法，该方法包括以下步骤：(a)测量从对象获得的生物样品中的四连接素、凝溶胶蛋白和以下任何一种或多种蛋白的表达水平，该一种或多种蛋白选自巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、白介素6(IL-6)、SPARC(富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)；(b)根据步骤(a)中测得的表达水平计算风险评分；(c)将计算出的风险评分与参考水平进行比较，当风险评分等于或高于参考水平时，确定对象患有肌肉衰弱相关疾病。技术方案通过分子诊断技术而非诸如物理测试或射线照相术的方法，本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量凝溶胶蛋白和四连接素蛋白表达水平的试剂。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170621 KR 10-2017-00784881.一种用于诊断肌肉衰弱相关疾病的组合物，所述组合物包含用于测量凝溶胶蛋白和四连接素蛋白表达水平的试剂。


2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物进一步包含用于测量选自巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、白介素6(IL-6)、SPARC(富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)中的任何一种或多种蛋白质的表达水平的试剂。


3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述肌肉衰弱相关疾病是选自肌肉减少症、肌肉萎缩、肌营养不良症、恶病质和心肌萎缩中的任何一种或多种。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其特征在于，用于测量蛋白质表达水平的试剂是对基因编码的蛋白质具有特异性的抗体。


5.一种用于诊断肌肉衰弱相关疾病的试剂盒，所述试剂盒包含用于测量凝溶胶蛋白和四连接素蛋白表达水平的试剂。


6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包含用于测量选自巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、白介素6(IL-6)、SPARC(富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)中的任何一种或多种蛋白质的表达水平的试剂。


7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述肌肉衰弱相关疾病是选自肌肉减少症、肌肉萎缩、肌营养不良症、恶病质和心肌萎缩中的任何一种或多种。


8.根据权利要求5至7中任一项所述的试剂盒，其特征在于，用于测量蛋白质表达水平的试剂是对基因编码的蛋白质具有特异性的抗体。


9.根据权利要求5至7中任一项所述的试剂盒，其特征在于，测量蛋白质表达水平使用选自酶联免疫吸附(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、夹心分析、蛋白质印迹、免疫沉淀、免疫组织化学染色、荧光免疫测定、酶底物显色、抗原抗体聚集、荧光激活细胞分选(FACS)、质谱分析、MRM(多重反应监测)测定、采用一组多重胺特异性稳定同位素试剂的测定(iTRAQ，同位素标记相对和绝对定量)和蛋白质芯片测定中的任何一种来进行。


10.一种用于提供诊断肌肉衰弱相关疾病的信息的方法，所述方法包括以下步骤：
(a)测...

【专利技术属性】
技术研发人员：权基善，郭周妍，李承敏，崔贞伊，李光杓，权殷秀，
申请(专利权)人：韩国生命工学研究院，
类型：发明
国别省市：韩国;KR