一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用，该高地芽孢杆菌已于2019年3月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.17338，实验室液体培养采用的LB液体培养基和解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基。本发明专利技术提出的一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用，实验表明不接菌的空白对照溶液中的有效磷浓度远低于高地芽孢杆菌SM01的发酵液中有效磷浓度，即高地芽孢杆菌SM01是一种高效解磷真菌，本发明专利技术的高地芽孢杆菌菌株具有生长速度快、解磷能力强、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，具有良好的应用前景。

A kind of Bacillus subtilis with phosphorus releasing function and its application

【技术实现步骤摘要】
一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及到解磷微生物肥料领域，特别涉及一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
磷元素是继氮元素之后对植物生长发育第二重要的元素，约占植物干重的0.2％，是参与能量代谢、核酸与细胞合成、部分酶调控的主要成分，对促进植物的生长发育和新陈代谢起着重要的作用，是生态系统中不可替代的组分。统计资料表明，全球有40%的耕地存在磷缺乏的现象，我国有74%的耕地土壤缺磷，其重要原因是由于固定化作用，土壤中的磷主要是以难溶性的化合物存在，绝大部分不能被植物直接吸收利用，仅有0.1%的磷能被植物直接吸收利用。磷肥的施用，虽然在一定程度上能缓解磷的不足，但磷肥中75%～90%的磷都会很快被吸附到土壤颗粒表面或与土壤中的金属离子（Fe、Al、Ca等）结合生成难溶性的磷酸盐。因此即使大量施用化学磷肥，也不能完全解决土壤磷素缺乏这一问题。解磷微生物能将土壤中难溶性化合态磷转化为植物能够吸收利用的可溶性磷，可提高土壤中磷元素的利用率。目前已见报道的具有解磷能力的微生物种类繁多，包括细菌、真菌、放线菌以及蓝藻，其中具有解磷能力的细菌数量占土壤中总微生物数量的1%到50%，具有解磷能力的放线菌数量占土壤中总微生物数量的10%～50%，而具有解磷能力的真菌数量仅占土壤中总微生物数量的0.1%~0.5%。不同种类的解磷微生物，其解磷能力存在巨大的差异，并且主要受菌株遗传特性和生长环境的影响。解磷微生物解磷机理非常复杂，主要是有机酸起作用，还有些菌株由于生长过程中产生其它的螯合物质，从而导致磷矿粉的溶解。除了具有解磷作用，解磷菌还具有固氮、产植物激素、产铁载体、分泌抗生素等功能，从而能促进作物的生产、增加作物的产量、提高作物抗病害能力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用，可以利用高地芽孢杆菌的高效解磷功能来解决土壤中大量磷不能被植物直接吸收利用的问题，本具有解磷功能的高地芽孢杆菌不仅可以利用被固定态、吸附态的磷，有效缓解土壤中缺磷的现状，而且对提高磷肥利用率，减少磷肥的使用所造成的环境污染，甚至对提高作物产量及其品质，都具有重要的现实意义。一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，该高地芽孢杆菌已于2019年3月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.17338,保藏日期为2019年3月18日分类命名为高地芽孢杆菌Bacillusaltitudinis，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。优选的，所述实验室液体培养采用的LB液体培养基和解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基：其中实验室液体培养采用的LB液体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：胰蛋白胨5-15g；酵母提取物3-16g；氯化钠8-15g；蒸馏水800-1200mL；其中解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：葡萄糖5-15g；(NH4)2SO40.3-0.6g；NaCl0.2-0.5g；KCl0.2-0.5g；MgSO4·7H2O0.2-0.5g；FeSO4·7H2O0.02-0.05g；MnSO4·4H2O0.02-0.04g；Ca3(PO3)28-12g；去离子水800-1300ml。优选的，所述实验室液体培养采用LB液体培养基的pH调至6.8~7.0，解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基的pH调至6.9-7.1。一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01制备的微生物菌剂，所述微生物菌剂包括：固体培养基配方和大量发酵培养配方，其中固体培养基配方和大量发酵培养配方两者组成成分相同，其中包括固料和无机盐溶液，固料和无机盐的比例为质量比98.7∶0.3；所述固料由质量比为稻壳∶玉米粉∶豆粕粉∶麸皮=50∶24∶20∶6的组成；所述无机盐按质量百分比计，包含11%磷酸二氢钾，9%硫酸镁，15%硫酸铵，65%轻质碳酸钙。本专利技术要解决的另一技术问题是提供一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：S1：制备所述高地芽孢杆菌的种子液；S2：将S1制备的种子液接种到固体培养基中，27~29℃下恒温培养。S3：将S2培养的培养物用无菌水按质量比1∶15的比例混合，过滤，将滤液接种至大量发酵培养基，在室温27~29℃、相对湿度85%以上的发酵室中进行发酵培养。优选的，所述S3中的发酵培养基与固体培养基成分相同。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提出的一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用，实验表明不接菌的空白对照溶液中的有效磷浓度远低于高地芽孢杆菌SM01的发酵液中有效磷浓度，即高地芽孢杆菌SM01是一种高效解磷真菌，本专利技术的高地芽孢杆菌菌株具有生长速度快、解磷能力强、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，具有良好的应用前景。附图说明图1为本专利技术的高地芽孢杆菌SM01有效磷测定标准曲线。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。请参阅图1，一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，该高地芽孢杆菌已于2019年3月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.17338。实验室液体培养采用的LB液体培养基和解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基：其中实验室液体培养采用LB液体培养基的pH调至6.8~7.0，解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基的pH调至6.9-7.1，实验室液体培养采用的LB液体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：胰蛋白胨5-15g；酵母提取物3-16g；氯化钠8-15g；蒸馏水800-1200mL；其中解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：葡萄糖5-15g；(NH4)2SO40.3-0.6g；NaCl0.2-0.5g；KCl0.2-0.5g；MgSO4·7H2O0.2-0.5g；FeSO4·7H2O0.02-0.05g；MnSO4·4H2O0.02-0.04g；Ca3(PO3)28-12g；去离子水800-1300ml。实施例一：取原料：配置实验室液体培养采用的LB液体培养基，其中胰蛋白胨5g；酵母提取物4g；氯化钠8g；蒸馏水850mL；pH调至6.9。配置蒙金娜无机磷固体培养基，其中葡萄糖10g；(NH4)2SO40.6g；NaCl0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，该高地芽孢杆菌已于2019年3月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No. 17338。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，该高地芽孢杆菌已于2019年3月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.17338。


2.根据权利要求1所述的一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，包括实验室液体培养采用的LB液体培养基和解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基：
其中实验室液体培养采用的LB液体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：
胰蛋白胨5-15g；
酵母提取物3-16g；
氯化钠8-15g；
蒸馏水800-1200mL；
其中解磷菌筛选采用的蒙金娜无机磷固体培养基配方包括以下质量分数配比的组份：
葡萄糖5-15g；
(NH4)2SO40.3-0.6g；
NaCl0.2-0.5g；
KCl0.2-0.5g；
MgSO4·7H2O0.2-0.5g；
FeSO4·7H2O0.02-0.05g；
MnSO4·4H2O0.02-0.04g；
Ca3(PO3)28-12g；
去离子水800-1300ml。


3.根据权利要求1所述的一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌SM01，所述实验室液体培养采用LB液...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丙尧，马江燕，马春艳，高伟，牛赡光，马海林，杜振宇，刘方春，李宗泰，刘幸红，朱升祥，张淑静，王霞，张文馨，李宜明，高嘉，
申请(专利权)人：山东省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：山东;37