一种金钱鱼精子冷冻保存方法技术

技术编号:23325724 阅读:59 留言:0更新日期:2020-02-14 23:14
本发明专利技术公开了一种金钱鱼精子冷冻保存方法,其包括精液采集、精液稀释、精子冷冻保存和精子解冻四个步骤,先挑选雄性金钱鱼在背肌注射人绒毛膜促性腺激素,然后再采用人工腹部挤压法采集金钱鱼的精液,然后将精液与抗冻液混合得到金钱鱼精子的保存液,所述稀释液为TS‑2稀释液、TS‑19稀释液、Hank’s液、Cortland稀释液和灭菌海水中的任意一种与二甲亚砜混合配制的;接着将精子保存液注入冻存管中,再采用分段逐步降温法进行冷冻,然后浸入液氮长期保存;取用时将装有精子保存液的冻存管从液氮中取出,然后置于温度为42℃的水浴锅中解冻。本发明专利技术方法能够长期保存金钱鱼的精子,且解冻复苏后精子成活率和授精率高。

A cryopreservation method for the sperm of goldfish

【技术实现步骤摘要】
一种金钱鱼精子冷冻保存方法
本专利技术属于生物学低温冷冻保存
,具体涉及一种金钱鱼精子冷冻保存方法。
技术介绍
南海是世界第三大陆缘海,面积约350万km2,其中我国管辖海域面积约201万km2。由于其海域辽阔、水质优良、海洋资源丰富,鱼、虾、贝、藻等海洋生物种类、品种众多,总计约有4168种,约占全国相应类群种类的52.2%。随着全球经济的加快及南海周边国家竞相发展海洋经济,我国也加快南海区海洋资源的开发步伐。但是伴随着海洋经济的加快发展,我国已出现了渔业种质资源衰退;海域污染情况日趋严重;赤潮频频;近海生态环境恶化等问题,这些严重影响和制约我国海洋经济的健康发展。因此,保护好海洋生态环境的同时,我们也要注重保护原有野生资源、注重种质保存,为今后实现可持续发展提供途径。金钱鱼(Scatophagusargus),又名金鼓鱼,原产于东南亚的沿海地区,其体长为25~30cm,适宜生活在水温为22~25℃的环境中,金钱鱼属于金钱鱼科,体略呈椭圆形,侧扁而高,背鳍硬棘与软条间具有深缺刻,体表呈褐色,腹缘银白色,鱼体上有许多深色圆斑。金钱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种金钱鱼精子冷冻保存方法,其特征在于:包括如下步骤:/n(1)精液采集:挑选体重为190~220g的2龄金钱鱼,在背肌注射150IU/kg的人绒毛膜促性腺激素,在水温27~28℃条件下催产20h以上,期间观察雄鱼精液量的变化,然后将金钱鱼麻醉后用干毛巾擦干鱼体生殖孔周围水分和黏液,再沿着中线轻轻挤压腹部至生殖孔流出乳白色精液,用注射器吸取精液,防止尿液、血液和水混入,将采集的精液注入冻存管中;/n(2)精液稀释:先将步骤(1)中采集到的精液与抗冻液按照体积比为1:1的比例混合稀释得到保存液,所述抗冻液包括以下体积分数的组分:5~15%二甲亚砜,余量为稀释液;所述稀释液为TS-2稀释液,T...

【技术特征摘要】
1.一种金钱鱼精子冷冻保存方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)精液采集:挑选体重为190~220g的2龄金钱鱼,在背肌注射150IU/kg的人绒毛膜促性腺激素,在水温27~28℃条件下催产20h以上,期间观察雄鱼精液量的变化,然后将金钱鱼麻醉后用干毛巾擦干鱼体生殖孔周围水分和黏液,再沿着中线轻轻挤压腹部至生殖孔流出乳白色精液,用注射器吸取精液,防止尿液、血液和水混入,将采集的精液注入冻存管中;
(2)精液稀释:先将步骤(1)中采集到的精液与抗冻液按照体积比为1:1的比例混合稀释得到保存液,所述抗冻液包括以下体积分数的组分:5~15%二甲亚砜,余量为稀释液;所述稀释液为TS-2稀释液,TS-19稀释液、Hank’s液、Cortland稀释液和灭菌海水中的任意一种;
(3)精子冷冻保存:将步骤(2)得到的保存液注入冻存管中,再将冻存管置于在4℃下的冷冻仓中平衡30min,接着按照每分钟降低5℃的速度降温至-20℃,然后在-20℃下平衡5min,再按照每分钟降低10℃的速度降温至-80℃,然后在-80℃下平衡5min,接着立即将装有保存液的冷冻管放入液氮罐中,在-196℃下长期保存;
(4)精子解冻:将装有精子保存液的冻存管提到液氮液面上平衡3~5min,然后迅速将冷冻管放置于42℃水浴锅中解冻,再将解冻后的精子保存液置于4℃下保存备用。


2.根据权利要求1所述的金钱鱼精子冷冻保存方法,其特征在于:步骤(2)中所述抗冻液还包括浓度为0...

【专利技术属性】
技术研发人员:彭敏陈秀荔杨春玲曾地刚
申请(专利权)人:广西壮族自治区水产科学研究院
类型:发明
国别省市:广西;45

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