能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂及使用方法技术

本发明专利技术属于蚊虫防治技术领域，公开了一种能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂及使用方法，能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂是球形芽孢杆菌，能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的亚致死剂量为0.0162±0.0014mg/l。本发明专利技术发现亚致死剂量球形芽孢杆菌处理斯氏按蚊四龄幼虫可导致存活蚊虫的传疟能力增强；发现亚致死剂量球形芽孢杆菌可能通过改变蚊肠道菌群组成和下调蚊天然免疫抗疟关键分子的表达导致疟疾传播能力增强。本发明专利技术有助于明确亚致死剂量球形芽孢杆菌的使用对按蚊传疟能力的影响，指导球形芽孢杆菌的合理应用和制定相应对策，为通过媒介防治阻断疟疾传播奠定基础。

Biological insecticides that can enhance the malaria transmission ability of Anopheles stephensi and their application methods

【技术实现步骤摘要】
能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂及使用方法
本专利技术属于蚊虫防治
，尤其涉及一种能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂及使用方法。
技术介绍
目前，最接近的现有技术：球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus,Bs)是一种在自然界中广泛分布、形成亚末端膨大孢子囊和球形芽孢的好气芽孢杆菌。作为主要生物杀虫剂之一Bs常用于蚊虫防治，其作用机制是通过Bs在蚊幼虫肠道内产生Mtx和Bin等毒性蛋白而损伤蚊肠上皮细胞。尽管Bs在蚊虫防治中的应用越来越广泛，然而相关应用基础研究还远远不够。比如，在实际应用中经常有使用不规范(如剂量选择不合适)和药效随时间下降而未及时补药等情况，导致对蚊幼虫的杀伤作用减弱，部分蚊虫在用药后存活，这不仅会造成在人为选择压力下加速耐药性的出现，也可能造成存活蚊虫的传病能力改变从而对蚊传疾病的流行带来负面影响。综上所述，现有技术存在的问题是：球形芽孢杆菌的不合理应用可能导致人为Bs亚致死剂量现象的出现和部分蚊虫在用药后存活，由此可能加速耐药性的出现和改变存活蚊虫的传病能力。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂的使用方法，其特征在于，所述能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂的使用方法包括：/n第一步，球形芽孢杆菌对斯氏按蚊四龄幼虫杀伤效果的检测：/n实验条件为：室温28℃，相对湿度为80％，每日日光灯照明12h；/n在6个搪瓷盘中分别加入1L去氯自来水及100条斯氏按蚊四龄幼虫；/n配制球形芽孢杆菌悬浊液，分别加入上述6个搪瓷盘中，使各盘中球形芽孢杆菌终浓度呈递增分布，并依次做好标记；/n加药后每天记录各盘中的幼虫死亡数；/n每个浓度重复3次试验；/n利用Probit analysis生物测定方法，获得球形芽孢杆菌杀伤斯氏按蚊四龄幼虫的亚致死剂量0...

【技术特征摘要】
1.一种能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂的使用方法，其特征在于，所述能够导致斯氏按蚊传疟能力增强的生物杀虫剂的使用方法包括：
第一步，球形芽孢杆菌对斯氏按蚊四龄幼虫杀伤效果的检测：
实验条件为：室温28℃，相对湿度为80％，每日日光灯照明12h；
在6个搪瓷盘中分别加入1L去氯自来水及100条斯氏按蚊四龄幼虫；
配制球形芽孢杆菌悬浊液，分别加入上述6个搪瓷盘中，使各盘中球形芽孢杆菌终浓度呈递增分布，并依次做好标记；
加药后每天记录各盘中的幼虫死亡数；
每个浓度重复3次试验；
利用Probitanalysis生物测定方法，获得球形芽孢杆菌杀伤斯氏按蚊四龄幼虫的亚致死剂量0.0162±0.0014mg/l；
第二步，亚致死剂量球形芽孢杆菌处理对存活按蚊传疟能力的影响分析：
利用亚致死剂量0.0162±0.0014mg/l球形芽孢杆菌处理1000条斯氏按蚊四龄幼虫，作为Bs组，同时设置不加药的对照组；
48h后，收集各组活蛹于碗中，并放入蚊笼内进行饲养；
在液氮中取出冻存的约氏疟原虫BY265荧光株，注射入2只昆明小鼠的腹腔，3d后进行传代；
传代小鼠原虫血症达到8-10％后，用于饲喂按蚊；
3-5天龄按蚊饥饿处理8-12h后，用感染BY265的小鼠进行饲血，饲血时间为1-2小时；
饲血后9-11天解剖蚊胃，观察卵囊情况，包括感染疟原虫的蚊虫数及每个蚊胃上...

【专利技术属性】
技术研发人员：王英，于莎莎，秦杰，王盼，张艳玲，郑鸿，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50