本发明专利技术涉及诊断方法领域。更具体地，本发明专利技术涉及一种鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者的方法，该方法包括步骤：确定受试者的测试样品中microRNA‑574‑5p的量，将确定的量与参考进行比较，并且基于所述比较，将患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者鉴定为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者。此外，本发明专利技术还包括microRNA‑574‑5p或在患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者的样品中与之特异性结合的检测试剂的用途，用于鉴定容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者，和用于实施本发明专利技术方法的装置以及试剂盒。
Mirna-574-5p as biomarker of PGE dependent tumor stratification
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】MIRNA-574-5P作为前列腺素E依赖性肿瘤分层的生物标志物本专利技术涉及诊断方法领域。更具体地，本专利技术涉及一种鉴定容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者的方法，该方法包括步骤：确定受试者的测试样品中miRNA-574-5p的量，将确定的量与参照进行比较，并且基于所述比较，将患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者鉴定为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者。此外，本专利技术还包括miRNA-574-5p或在患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者的样品中与之特异性结合的检测试剂的用途，用于鉴定该受试者是否容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗，和用于实施本专利技术方法的装置以及试剂盒。非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的肺癌形式，约占所有病例的80％。尽管在NSCLC的管理和诊断方面取得了最新进展，但5年生存率约为18％。然而，已经报道了针对靶向治疗的反应的可变性，并且可能涉及细胞增殖和存活的补偿性信号传导途径的激活。这些替代机制之一涉及前列腺素(PG)E2对表皮生长因子受体的反式激活(Pai，2002)。该类前列腺素在包括肺癌肿瘤在内的多种癌症类型的发生和发展中起着核心作用。在炎症和癌症中，参与增强PGE2生物合成的主要途径是将花生四烯酸转化为前列腺素H2(PGH2)的环氧化酶(COX)-2和催化PGH2异构化为PGE2的微粒体前列腺素E合成酶-1(mPGES-1)的协同活性(Jakobsson，1999)。在NSCLC中，COX-2和mPGES-1通常都被上调，但是它们的相对过表达程度却有所不同，因此表明了不同的潜在调节机制。非甾体类抗炎药(NSAID)可以抑制PGE2的生物合成，该类药物包括选择性和非选择性COX抑制剂(Patrignani，2015)。然而，仅在具有过表达COX-2或以体内PGE2生物合成减少为特征的肿瘤个体中发现存活率显著增加(Hughes，2008)。防止PGE2生物合成增强的另一种方法可能涉及使用仅影响mPGES-1活性的药物，例如选择性mPGES-1抑制剂化合物III(CIII，苯并咪唑)，该药物以对其它前列腺素合成酶的边际抑制效果抑制鼠和人重组mPGES-1(Leclerc，2013年)。该药物还深刻抑制源自肺腺癌的人肺上皮细胞系A549细胞中以及LPS刺激的人全血(即在血浆蛋白存在下)中的PGE2生物合成(Leclerc，2013)。NSAID和PEG合成酶抑制剂的治疗价值在肿瘤学领域引起了很大争议，因为并非所有患者似乎都适合于所述治疗。microRNA(miRNA)(一类小的非编码RNA)的表达失调已占据肺癌发展和进程的中心阶段。其中，已鉴定出miR-574-5p，它代表了早期NSCLC14的生物标志物。此外，该miRNA通过下调人类肺癌中检查点抑制基因1来促进肿瘤进展(Li，2012年)。miR-574-5p的过表达可能区分转移性肺癌患者，并促进NSCLC细胞系的迁移和侵袭(Zhou，2016年)。但是，到目前为止，尚无任何方法可以对诸如NSAIDs或PEG合成酶抑制剂等治疗药物的治疗产生反应或无反应使诸如NSCLC的肿瘤分层。然而，这种分层方法将是非常需要的。因此，本专利技术涉及一种用于鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者的方法，该方法包括以下步骤：a)确定受试者的测试样品中miRNA-574-5p的量；b)将确定的量与参照进行比较；和c)基于所述比较，将患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者鉴定为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者。本专利技术的方法优选是离体方法。而且，除了上面明确提到的那些步骤之外，它还可以包括其他步骤。例如，其他步骤可以涉及样品预处理或评估通过该方法获得的结果。该方法可以手动执行或通过自动化辅助。优选地，步骤(a)，(b)和/或(c)可以全部或部分地通过自动化来辅助，例如通过用于步骤(a)中的确定的合适的机器人和感官设备或在步骤(b)或(c)中计算机实施的比较和/或在数据处理设备上运行的诊断算法。本文所用的术语“受试者”是指动物，优选哺乳动物，例如实验室动物，例如小鼠或大鼠，农场动物，例如猪，牛，马或山羊，或宠物，例如猫或狗。更优选地，受试者是人。如本文其他地方所述，本专利技术所述的受试者应患有前列腺素E依赖性肿瘤。如本文所用，术语“前列腺素E依赖性肿瘤”是指肿瘤癌实体，其生长和/或发展依赖于前列腺素E的形成。优选地，所述肿瘤选自下组：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、头颈癌、甲状腺乳头状癌、低危和高危神经胶质瘤、神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、子宫颈癌、脑瘤和胃癌。更优选地，所述肿瘤是肺癌，并且最优选地，是非小细胞肺癌。如本文所用，术语“鉴定”是指给受试者赋予特征，即是否容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的特征。如本领域技术人员将理解的，这种分配通常不旨在对于100％的待研究受试者是正确的。但是，该术语要求分配(即鉴定)对于受试者的统计学显著部分(例如，同期组群研究中的同期组群)是正确的。本领域技术人员可以使用各种众所周知的统计评估工具例如，置信区间的确定，p值确定，t检验(Student'st-test)，曼-惠特尼检验等来确定一部分是否具有统计意义，而无需费力。有关详细信息，请参见Dowdy和Wearden，《统计研究》，JohnWiley&Sons，纽约，1983年。优选的置信区间为至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％。p值优选为0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。如本文所用，术语“容易接受治疗”是指受试者能够对本专利技术所指的治疗作出反应。受试者的反应优选是治疗反应。治疗反应是指受试者显示疾病，病症或与所述疾病或病症相关的症状的改善，治愈或其他改善。此外，该术语还可以表示接受治疗剂量的受试者对所述治疗没有不良反应。通常，这种不良反应会导致与治疗相关的有害副作用。术语“前列腺素E形成的抑制剂”是指能够在体内阻止或减少前列腺素E形成的化合物或组合物。优选地，所述减少是统计上显著的减少。前列腺素E形成的抑制剂可衍生自各种类型的化学分子或其组合物。它可以是人工合成的化合物或组合物，或者是天然来源的，例如来自植物，植物部分或微生物。可以通过本领域技术人员已知的测试来确定化合物或组合物是否能够阻止或降低体内前列腺素E的形成，并且尤其是在下面的所附实施例中进行了详细描述。优选地，前列腺素E形成的抑制剂是微粒体前列腺素E-合成酶-1的抑制剂或拮抗剂。此外，也已报道非甾体类抗炎药会干扰前列腺素E的形成。因此，优选地，前列腺素E形成的抑制剂是非甾体抗炎药(NSAID)和/或微粒体前列腺素E-合成酶-1的抑制剂(mPGES1抑制剂)。更优选地，所述NSAID选自下组：选择性COX-2抑制剂，优选帕瑞昔布(parecoxib)、依托考昔(etoricoxib)或塞来昔布(celecoxib)；COX1-选择性抑制剂，优选低剂量阿司匹林；和非选择性COX1/2抑制剂，优选萘普生(nap本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者的方法，该方法包括以下步骤：/na)确定受试者的测试样品中microRNA-574-5p的量；/nb)将确定的数量与参考进行比较；和/nc)基于所述比较，鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170612 EP 17175535.81.一种鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者的测试样品中microRNA-574-5p的量；
b)将确定的数量与参考进行比较；和
c)基于所述比较，鉴定患有前列腺素E依赖性肿瘤的受试者为容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗的受试者。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述参考来自患有前列腺素E依赖性肿瘤的一个受试者或一组受试者，所述受试者已知容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述测试样品中的microRNA-574-5p量基本上相同或增加表示受试者容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗，并且其中测试样品中microRNA-574-p的量减少表示受试者不容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述参考来自(i)非肿瘤组织样品或来自(ii)患有前列腺素E依赖性肿瘤的一个受试者或一组受试者，这些受试者已知不容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗，或(iii)一个健康受试者或一组健康受试者。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述测试样品中的microRNA-574-5p的量基本上相同或减少表示受试者不容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗，并且其中所述测试样品中的microRNA-574-5p的量增加表示受试者容易接受使用前列腺素E形成的抑制剂的治疗。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述样品是组织样品或体液样品。
7.根据权利要求6的方法，其特征在于，所述体液样品选自下组：全血，血清、血浆、尿液和淋巴液。
8.根据权利要求1至7中任一项的方法，其特征在于，所述肿瘤选自下组：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、头颈癌、乳头状甲状腺癌、低和高风险神经胶质瘤、神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、子宫颈癌、脑瘤和胃癌。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·斯坦希尔，M·J·索尔，B·苏斯，I·鲍曼，P·雅各布森，
申请(专利权)人：弗劳恩霍夫应用研究促进协会，
类型：发明
国别省市：德国;DE
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