一种从金花茶提取的化合物及其制备抗肿瘤药物应用制造技术

本发明专利技术公开了一种从金花茶中提取分离的新型化合物金花茶酚E，并公开了金花茶酚E在制备抗肿瘤药物中的应用，金花茶提取物金花茶酚E抑制PIM1激酶的活性，能够抑制肿瘤细胞存活，抑制肿瘤细胞的克隆形成，抑制肿瘤细胞的增殖能力，并且能够诱导肿瘤细胞周期阻滞、细胞凋亡，具有抗肿瘤药物制备应用前景。

A compound extracted from Camellia and its application in the preparation of antitumor drugs

【技术实现步骤摘要】
一种从金花茶提取的化合物及其制备抗肿瘤药物应用
本专利技术属于天然提取化合物技术，具体涉及一种具有抗肿瘤活性的金花茶提取物金花茶酚E及其制药应用。
技术介绍
癌症是全球范围内死亡率极高的一种疾病，且发病率仍在持续升高，最新全球癌症统计报告显示，2018年癌症新发病例1910万，癌症新增死亡病例870万。目前，癌症的治疗方法主要有化学药物治疗、放射治疗以及手术切除等，这些治疗方法在杀死肿瘤细胞的同时，通常也会对正常细胞造成损害，副作用极大。近年来，靶向疗法逐渐兴起，该疗法针对已经明确的与肿瘤密切相关的位点进行治疗，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会波及肿瘤周围的正常组织细胞，有效降低毒副作用，大大提高了癌症患者的生存率。乳腺癌作为全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率居全球女性肿瘤的首位，在亚洲人群中以每年2％的速度增加。相较于其他亚型，三阴性乳腺癌侵袭性更强、预后更差，并且缺乏有效的分子靶点。随着分子生物学的发展及对肿瘤细胞信号通路的深入研究，一些参与调节肿瘤细胞信号转导的关键激酶逐渐成为抗肿瘤药物筛选的热门靶点。一些调节其重要信号通路的中药提取逐渐进入人们的视野，其中PIM1作为重要靶点在许多疾病的进展中发挥了重要的作用，在抗肿瘤方面发挥着药物研发的巨大潜质[1][2]。根据世界卫生组织的报道，肿瘤即癌症是世界第二大死因，全球近六分之一的死亡是由癌症造成的。自20世纪40年代以来抗肿瘤药物发展迅速，目前国内外临床上广泛使用的抗肿瘤药物有100多种。经过70多年的发展，抗肿瘤药物在提高患者的生活质量及延长生存时间方面取得了明显进展。近10年FDA批准近40个抗肿瘤新分子实体药物上市。抗癌药物主要分为细胞毒类小分子药物及天然产物抗癌药物和分子靶向药物，以紫杉醇为代表，天然产物来源的化合物在抗肿瘤药物的研发占据了重要的位置，我国丰富的中药材是抗肿瘤药物的宝库，中药材发现抗肿瘤的天然活性物质也是当代中药研究的重要主题。金花茶作为我国一级保护植物，具有极高的药用价值，近年来随着其提取工艺的进步，金花茶提取物由于其具有多样的生物活性而备受关注，其抗肿瘤作用的化学成分、药理作用及其机制受到了关注[3]。因此，本专利技术提取了一类金花茶化合物，并通过计算虚拟对接技术、酶学筛选技术、细胞水平的筛选技术发现了具有抗肿瘤活性的一种从金花茶提取的化合物，抗肿瘤实验结果显示化合物具有良好的抗癌活性。参考文献：[1]THEOCUYPERSH,SELTENG,QUINTW,etal.Murineleukemiavirus-inducedT-celllymphomagenesis:Integrationofprovirusesinadistinctchromosomalregion[J].Cell,1984,37(1):141-150.[2]WANGZ,BHATTACHARYAN,MEYERMKE,etal.PIM1NegativelyRegulatestheActivityofPTP-U2SPhosphataseandInfluencesTerminalDifferentiationandApoptosisofMonoblastoidLeukemiaCells[J].ArchivesofBiochemistryandBiophysics,2001,390(1):9-18.[3]张武君,赵云青,刘保财,黄颖桢,陈菁瑛,邹福贤.金花茶成分及药理作用研究进展[J].亚热带农业研究,2018,14(01):66-72.
技术实现思路
专利技术目的：针对上述现有技术，本专利技术提供了一种具有抗肿瘤活性的金花茶提取的化合物及其制备抗肿瘤药物应用。技术方案：本专利技术公开了一种具有抗肿瘤活性的金花茶提取物单体成分金花茶酚E，其结构如式I所示：上述金花茶酚E，分子式为C39H32O15，代号YR-65，化学名为：Kaempferol3-O-(3”,6”-O-trans-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranoside。本专利技术还进一步公开了所述金花茶酚E在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。具体的，所述肿瘤为乳腺癌。所述化合物I具有很好的酶学抑制作用。所述金花茶酚E对于乳腺癌细胞具有细胞毒作用，进一步研究发现此外在不同浓度下，金花茶酚E对乳腺癌细胞系具有生长抑制、周期阻断以及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。有益效果：本专利技术所述的金花茶提取化合物结构简单、提取路线简便、原料易得及反应条件温和，获得的化合物具有良好的PIM1酶学抑制效果和抗肿瘤活性，从而有效地抑制抗肿瘤关键靶点PIM1，进而杀死乳腺癌肿瘤细胞，具有抗肿瘤药物研发价值。附图说明图1是金花茶酚E电喷雾质谱；图2是金花茶酚E对PIM1酶活的影响；图3是金花茶酚E对MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞存活的影响；图4给予金花茶酚E干预后MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞平板克隆实验；图5给予金花茶酚E干预后MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞生长曲线；图6金花茶酚E诱导MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞周期阻滞；图7金花茶酚E诱导MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞凋亡；图8YR-65对MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞核形态的影响。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术作出详细说明。药物来源：防城港普通种金花茶(CamellianitidissimaChi)；2016年7月采摘于防城港，中国，广西。试剂和仪器：细胞株：MDA-MB-231细胞：人乳腺癌细胞株，贴壁生长，购于中国科学院上海细胞库；MDA-MB-468细胞：人乳腺癌细胞株，贴壁生长，购于中国科学院上海细胞库。实施例1金花茶天然提取活性物提取工艺：取金花茶干花6kg，粉碎到约40目后用95％的乙醇高温回流提取3次，每次时间分别为3h、2h、1h。合并提取液，用旋转蒸发仪50℃低压回收工业乙醇，得金花茶花乙醇提取浸膏1500g。加6L超纯水使其充分混悬后，加入等体积二氯甲烷萃取3次，40℃低压旋蒸去二氯甲烷后，得金花茶花二氯甲烷萃取部位52g，剩余水相部分再加入等体积水饱和乙酸乙酯萃取3次，40℃低压回收乙酸乙酯后，得金花茶花乙酸乙酯萃取部位266.2g；乙酸乙酯相经过硅胶柱柱层析分离得到17个组分。随后17个组分别分经过硅胶层析柱，SephadexLH-20凝胶柱、C18色谱柱、MCI层析柱和HPLC制备柱处理分离后，从组分3中分离得到化合物23(6.8mg)、化合物31(82mg)和化合物36(5.6mg)；从组分5中分离得到化合物44(7.4mg)；从组分8中分离得到化合物37(1.9mg)；从组分9中分离得到化合物14(21mg)和化合物43(2.5mg)；从组分10中分离得到化合物1(2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如式I所示的化合物：/n

【技术特征摘要】
1.如式I所示的化合物：





2.权利要求1所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为乳腺癌。


4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾爱群，袁胜涛，赵廷丽，龚晓峰，孙立，杨蕊，
申请(专利权)人：海南大学，中国药科大学，
类型：发明
国别省市：海南;46