一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法技术

本发明专利技术涉及抗肿瘤活性的物质技术领域，尤其是一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其步骤为：(1)取去油后的鸦胆子药渣粗碎处理；(2)粉碎后药渣进行酶处理，然后提取浓缩；(3)对浓缩后的药液进行水解和酶解反应处理；(4)处理后的药液经过有机溶剂梯度洗脱分离得初提物；(5)初提物经过冷冻干燥得到干粉；(6)取干粉上硅胶柱进行层析分离得出有效成分。(7)再把有效成分用有机溶剂溶解，用溶剂滴定，收集黄白色沉淀物，本发明专利技术能够对鸦胆子药渣充分的利用起来，减少中药资源浪费，通过水解处理和酶促反应改变鸦胆子中苷类成分的配糖体机构，稳定其结构，提高有效成分的含量和纯度，进而简化生产工序，提高疗效，降低其毒性。

A preparation method of Brucea javanica

【技术实现步骤摘要】
一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法
本专利技术涉及抗肿瘤活性的物质
，具体领域为一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法。
技术介绍
鸦胆子是苦木科鸦胆子属植物Bruceajavanica(L.)Merr的成熟果实，又名老鸦胆，苦参子等，其味苦、性寒，有小毒，归大肠、肝经。鸦胆子具有清热解毒、截疟、止痢、腐蚀赘疵的功效。用于治疗热性赤痢或便血、疟疾、鸡眼等症。现代药理学研究证明鸦胆子中含有大量的苦木内酯类化合物，这类化合物具有抗疟疾、抗阿米巴痢疾、拒食素、杀虫剂、抗炎和抗癌等生物活性。鸦胆子油主要存在于鸦胆子仁中，由鸦胆子成熟过程中的糖类转化而成。鸦胆子含油量约为20％，其主要由油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸等组成。鸦胆子油在临床上主要用于辅助治疗癌症，对多种肿瘤均有较好的疗效，如肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、食道癌等。1、目前对鸦胆子中抗肿瘤成分报道的比较多，尤其对鸦胆子脂肪油中抗肿瘤成分研究及制备方法比较多，目前上市的抗肿瘤药物主要是鸦胆子油乳制剂，而对于去油后鸦胆子中抗肿瘤成分的研究比较少。2、大多数药厂把去油后鸦胆子药材弃去，造成药材资源的浪费。3、现有报道的制备方法过于复杂、而且富集出来的有效成分量比较低，只适合研究试验用，不适合大工业生产。另外鸦胆子中抗肿瘤成分活性太强、毒性较大，结构也不稳定、容易失活。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，以解决现有技术中鸦胆子制备复杂、效率低、资源浪费的问题。r>为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种鸦胆子抗肿瘤新成分的制备方法，其步骤为：(1)取去油后的鸦胆子药渣，进行粗碎处理；(2)粉碎后的药渣进行石油醚处理和纤维素酶酶解，然后进行提取浓缩；(3)对浓缩后的药液进行水解和酶解反应处理；(4)处理后的药液经过有机溶剂梯度洗脱分离得到初提物；(5)初提物经过真空干燥和冷冻干燥得到干粉；(6)取干粉上硅胶柱进行层析分离得出抗肿瘤的有效成分或有效部位。(7)再把层析出的有效成分或有效部位用有机溶剂溶解，再用极性小的溶剂添加，收集沉淀出的有效成分即为目标成分。优选的，根据步骤(1)，原料来源于去油后的药渣，药渣粗碎处理的目数为6-30目。优选的，根据步骤(2)，其具体浓缩液提取步骤为：粉碎后的药渣先用1％-10％的纤维素酶进行酶解8h-72h，再用石油醚温浸4h-36h进行处理，然后分别用10％-90％的乙醇进行回流提取2-5次，最后合并提取液，并进行30-60℃真空浓缩，得到密度为0.6-1.2的浓缩液。优选的，根据步骤(3)，水解处理方式为：浓缩药液中加入10％—40％的盐酸或硫酸、草酸调节ph值到2-6，水解过程中加入官能团保护剂。优选的，根据步骤(3)，水解处理方式还为：浓缩药液中加入10％—40％的氢氧化钠溶液调节PH值到9-13，水解过程中加入官能团保护剂。优选的，根据步骤(3)，酶解处理方式为：酸碱水解后，药液中加入1％—20％的葡萄糖苷酶、乳糖苷酶，酶解温度为30-60℃，酶解时间4h-24h。优选的，根据步骤(4)，其具体步骤为：处理后的药液分别用石油醚、二氯甲烷进行搅拌萃取，取二氯甲烷层，或者处理后的药液分别用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层。优选的，根据步骤(5)，其具体步骤为：分离得到的二氯甲烷层或者乙酸乙酯层真空浓缩得到干膏，并冷冻干燥得到干粉，备用。优选的，根据步骤(6)，其具体步骤为：取干粉上硅胶柱进行层析分离，分别采用1:100到1:20递增比例的二氯甲烷和甲醇、乙酸乙酯和石油醚进行层析分离，得到含有目标成分的有效部位溶液。优选的，根据步骤(7)，其具体步骤为：有效部位药液浓缩干燥，再用二氯甲烷溶解，再用石油醚或者乙醚进行滴加，根据滴加的量不同，时间的不同，会先后得到不同时间段的淡黄色沉淀物，取相应时间段的提取物，即得到目标成分。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：通过该方法能够对鸦胆子药渣充分的利用起来，减少中药资源的浪费，同时该制备方法能够提高筛选的抗肿瘤成分的含量，并稳定其结构，进而纯化富集出该类抗肿瘤新成分或者新部位；另外该制备方法适合于大工业化生产；并通过该项制备工艺中水解处理和酶促反应能够改变鸦胆子中苷类成分的配糖体机构，方便目标成分的富集，提高目标成分的含量和纯度，进而提高药物的生物利用度；同时通过该项工艺的研究制备能够稳定成分结构，提高疗效，降低其毒性；该制备方法对其中有机苷类成分进行部分糖苷键的断裂和结构修饰，提高抗肿瘤有效成分或者有效部位的含量和稳定性；该制备方法中只需硅胶层析柱的纯化富集方法即可得到抗肿瘤有效成分或者有效部位，该制备方法适合大工业生产。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供一种技术方案：一种鸦胆子抗肿瘤新成分的制备方法，其步骤为：(1)取去油后的鸦胆子药渣，进行粗碎处理；(2)粉碎后的药渣进行石油醚处理和纤维素酶酶解，然后进行提取浓缩；(3)对浓缩后的药液进行水解和酶解反应处理；(4)处理后的药液经过有机溶剂梯度洗脱分离得到初提物；(5)初提物经过真空干燥和冷冻干燥得到干粉；(6)取干粉上硅胶柱进行层析分离得出抗肿瘤的有效成分或有效部位。(7)再把层析出的有效成分或有效部位用有机溶剂溶解，再用极性小的溶剂添加，收集沉淀出的有效成分即为目标成分。根据步骤(1)，原料来源于去油后的药渣，药渣粗碎处理的目数为6-30目。根据步骤(2)，其具体浓缩液提取步骤为：粉碎后的药渣先用1％-10％的纤维素酶进行酶解8h-72h，再用石油醚温浸4h-36h进行处理，然后分别用10％-90％的乙醇进行回流提取2-5次，最后合并提取液，并进行30-60℃真空浓缩，得到密度为0.6-1.2的浓缩液。根据步骤(3)，水解处理方式为：浓缩药液中加入10％—40％的盐酸或硫酸、草酸调节ph值到2-6，水解过程中加入官能团保护剂。根据步骤(3)，水解处理方式还为：浓缩药液中加入10％—40％的氢氧化钠溶液调节PH值到9-13，水解过程中加入官能团保护剂。根据步骤(3)，酶解处理方式为：酸碱水解后，药液中加入1％—20％的葡萄糖苷酶、乳糖苷酶，酶解温度为30-60℃，酶解时间4h-24h。根据步骤(4)，其具体步骤为：处理后的药液分别用石油醚、二氯甲烷进行搅拌萃取，取二氯甲烷层，或者处理后的药液分别用石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层。根据步骤(5)，其具体步骤为：分离得到的二氯甲烷层或者乙酸乙酯层真空浓缩得到干膏，并冷冻干燥得到干粉，备用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征在于：其步骤为：/n(1)取去油后的鸦胆子药渣，进行粗碎处理；/n(2)粉碎后的药渣进行石油醚处理和纤维素酶酶解，然后进行提取浓缩；/n(3)对浓缩后的药液进行水解和酶解反应处理；/n(4)处理后的药液经过有机溶剂梯度洗脱分离得到初提物；/n(5)初提物经过真空干燥和冷冻干燥得到干粉；/n(6)取干粉上硅胶柱进行层析分离得出抗肿瘤的有效成分或有效部位。/n(7)再把层析出的有效成分或有效部位用有机溶剂溶解，再用极性小的溶剂添加，收集沉淀出的有效成分即为目标成分。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征在于：其步骤为：
(1)取去油后的鸦胆子药渣，进行粗碎处理；
(2)粉碎后的药渣进行石油醚处理和纤维素酶酶解，然后进行提取浓缩；
(3)对浓缩后的药液进行水解和酶解反应处理；
(4)处理后的药液经过有机溶剂梯度洗脱分离得到初提物；
(5)初提物经过真空干燥和冷冻干燥得到干粉；
(6)取干粉上硅胶柱进行层析分离得出抗肿瘤的有效成分或有效部位。
(7)再把层析出的有效成分或有效部位用有机溶剂溶解，再用极性小的溶剂添加，收集沉淀出的有效成分即为目标成分。


2.根据权利要求1所述的一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征在于：根据步骤(1)，原料来源于去油后的药渣，药渣粗碎处理的目数为6-30目。


3.根据权利要求1所述的一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征在于：根据步骤(2)，其具体浓缩液提取步骤为：粉碎后的药渣先用1％-10％的纤维素酶进行酶解8h-72h，再用石油醚温浸4h-36h进行处理，然后分别用10％-90％的乙醇进行回流提取2-5次，最后合并提取液，并进行30-60℃真空浓缩，得到密度为0.6-1.2的浓缩液。


4.根据权利要求3所述的一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征在于：根据步骤(3)，水解处理方式为：浓缩药液中加入10％—40％的盐酸或硫酸、草酸调节ph值到2-6，水解过程中加入官能团保护剂。


5.根据权利要求1所述的一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：周明刚，杨俊清，靳桂贞，
申请(专利权)人：联盟博大北京科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11