纳米复合材料、电化学microRNA生物传感器的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种以铁基金属有机框架(MOF)和端氨基树枝状大分子(PAMAM)功能化富勒烯(C

Preparation and application of nanocomposites and electrochemical microRNA biosensors

【技术实现步骤摘要】
纳米复合材料、电化学microRNA生物传感器的制备方法及应用
本专利技术涉及纳米复合材料、电化学microRNA生物传感器
，具体涉及一种C60@PAMAM-MOF新型纳米复合材料，以及一种夹心型电化学microRNA生物传感器制备方法及应用。
技术介绍
特发性肺纤维化是一种以肺实质纤维破坏为特征的严重肺部疾病，其准确的诊断一直困扰着人类。迄今，随着特发性肺纤维化发病率逐年上升，甚至高于某些癌症故又被称为“不是癌症的癌症”，但导致该病的原因大多都与肺上皮细胞和成纤维细胞增生、积聚和损伤有关。microRNA是目前用于疾病诊断研究最为广泛的血清学生物标志物，它是一类内源性非编码小分子RNA，在特发性肺纤维化患病初期会出现上皮细胞的损伤和纤维化等，这些均导致microRNA的异常表达。研究表明，血清中miR-3675-3p在特发性肺纤维化中明显升高且未在其他疾病中有相似的表达谱，可能是特发性肺纤维化的特异性microRNA。因此，测定血清中的miR-3675-3p对于特发性肺纤维化的诊断具有重要意义。目前microRNA的检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种C

【技术特征摘要】
1.一种C60@PAMAM-MOF纳米复合材料，其特征在于，通过相转移法以如下步骤制备：
(1)制备PAMAM-MOF溶液：将MOF溶于超纯水中，加入PAMAM室温搅拌9-11h，然后对混合溶液离心、洗涤并分散至超纯水中，获得PAMAM-MOF溶液；
(2)制备C60@PAMAM-MOF溶液：在PAMAM-MOF溶液中加入乙醇混匀，将混匀后溶液加入至C60甲苯溶液中室温搅拌30-36h，离心获得的沉淀物分别用无水乙醇和超纯水洗涤并分散至超纯水中，即得C60@PAMAM-MOF纳米复合材料。


2.根据权利要求1所述的C60@PAMAM-MOF纳米复合材料，其特征在于，所述步骤(1)中MOF的浓度为0.25-4mg/mL，PAMAM的使用量为100-200μL；所述步骤(2)中乙醇的使用量为20mL，所述C60甲苯溶液的浓度为1mg/mL。


3.根据权利要求1所述的C60@PAMAM-MOF纳米复合材料，其特征在于，所述步骤(2)中洗涤沉淀物的步骤为：依次用无水乙醇、无水乙醇和超纯水洗涤。


4.一种用于检测miR-3675-3p的电化学microRNA生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将电极表面进行预处理，得到洁净的电极；
(2)将CS-AB分散液滴加至洁净的电极表面，并于空气中晾干；
(3)将Pt@AuNPs纳米粒溶液滴加至步骤(2)获得的干燥的电极表面，并于空气中晾干；
(4)将巯基修饰的捕获探针滴加至步骤(3)获得的干燥的电极表面，并将电极室温孵育10-12h，然后用超纯水冲洗干净后滴加BSA溶液，再次室温孵育30-60min；
(5)将步骤(4)获得的电极用DEPC水冲洗干净后，滴加不同浓度miR-3675-3p于电极表面，于25-45℃下孵育0.5-3h；
(6)将步骤(5)获得的电极用DEPC水冲洗干净后，将示踪标记物滴加至电极表面，再于37℃下孵育2h，即获得用于检测miR-3675-3p的电化学microRNA生物传感器，
其中，所述步骤(6)中的所述示踪标记物采用如权利要求1-3任一项所述的C60@PAMAM-MOF纳米复合材料制备。


5.根据权利要求4所述的电化学microRNA生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)对电极表面的预处理为：分别用0.3μm和0.05μm的氧化铝抛光粉在麂皮上抛光电极，再...

【专利技术属性】
技术研发人员：白丽娟，袁拥华，左建丽，赵敏，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50