一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种监测pre‑mRNA剪接效率的双报告基因探针及制备方法，所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C，所述的基因片段A、B、C按照A‑B‑C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A为Fluc，所述的片段B由exon 1、Intron、exon 2组成，所述的片段C为Rluc。所述的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。通过对本发明专利技术的报告基因分子影像探两种荧光素酶产生的信号比值Fluc/Rluc进行分析，实时、无创地分析在体pre‑mRNA的剪接效率，为调控pre‑mRNA剪接的药物研究提供了有效的筛选工具。

A double reporter gene probe for monitoring the splicing efficiency of pre mRNA and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针及制备方法
本专利技术属于分子生物学和基因工程
，具体涉及一种监测pre-mRNA的双报告基因影像探针及制备方法。
技术介绍
Pre-mRNA剪接过程的化学本质包含两步转酯反应。该化学反应在细胞中难以自行发生，需要剪接体的参与完成。剪接体是指进行Pre-mRNA剪接时形成的多组分复合物，主要是由小分子的核RNA和蛋白质组成。它是在剪接过程的各个阶段随着SNRNA的加入而形成的。也就是说在完整的pre-mRNA上形成的一个剪接中间体。剪接体本身需要一些小核RNA参与。这些小核RNA不会翻译出任何蛋白，但对于调控遗传活动起到重要作用。因为许多人类疾病都可以归咎于基因的错误剪接或针对剪接体的调控错误。据知人类35％的遗传紊乱是由于基因突变导致单个基因的可变剪接引起的。还有一些疾病的起因是剪接体蛋白的突变影响了许多转录本的剪接。还有一些癌症也与剪接因子的错误调控有关。现在研究者们通过免疫沉淀、基因敲除、交联质谱、建立体外剪接反应系统等研究手段，初步建立起剪接体的组装、激活与解聚的发生过程，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针，其特征在于，所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C，所述的基因片段A、B、C按照A-B-C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A为Fluc，所述的片段B由exon 1、Intron、exon 2组成，所述的片段C为Rluc。/n

【技术特征摘要】
1.一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针，其特征在于，所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C，所述的基因片段A、B、C按照A-B-C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A为Fluc，所述的片段B由exon1、Intron、exon2组成，所述的片段C为Rluc。


2.根据权利要求1所述的一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针，其特征在于，所述的片段A的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述的片段B的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述的片段C的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。


3.根据权利要求1所述的一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针，其特征在于，所述的探针的核苷酸序列如SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员：王福，郭镔，郑海锋，解锦荣，陈思，王希楠，施潇蕊，毛文杰，
申请(专利权)人：西安电子科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61