一种数字PCR液滴形成方法技术

本发明专利技术提供一种数字PCR液滴形成方法，包括以下步骤：向PCR试剂腔室内注入数字PCR溶液，使数字PCR溶液进入与所述PCR试剂腔室连通的液滴喷孔，形成数字PCR溶液液体；向液滴形成腔室中添加液滴形成油，其中，所述液滴形成腔室由导热板、盖板及设置于所述盖板的侧面的倒U型台阶共同围成；采用汽化部件使部分所述数字PCR溶液液体汽化并将剩余所述数字PCR溶液液体快速推入所述液滴形成腔室中的所述液滴形成油中，以形成所述数字PCR液滴。本发明专利技术使用热泡技术进行高速数字PCR液滴形成，具有高效的数字PCR油利用率，并可进行原位PCR温控及原位数字PCR信号收集。

A drop formation method of digital PCR

【技术实现步骤摘要】
一种数字PCR液滴形成方法
本专利技术属于生物医药领域，尤其是疾病检测领域，涉及一种一体化原位数字PCR系统及液滴形成方法。
技术介绍
聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，PCR)提出至今已有20年时间，期间PCR已发展成为分子生物学领域的一项关键技术和常规技术，极大地推动了生命科学各个领域的发展。特别是90年代后期，美国ABI公司推出的实时荧光定量PCR(realtimePCR，qPCR)技术及相关产品更是将PCR由体外合成及定性/半定量检测技术发展成为一种高灵敏、高特异性和精确定量的基因分析技术。尽管经过十几年时间的迅速发展，qPCR技术已经用于除外伤和营养缺乏症外所有疾病的诊断，但是，在PCR扩增过程中影响其扩增效率的因素有很多，不能保证在反应过程中扩增效率保持不变和实际样品与标准样品以及不同样品之间的扩增效率是相同的，由此导至其定量分析所依赖的基础——循环阈值(CT)不是恒定不变的。因此qPCR的定量只是“相对定量”，其准确度和重现性依然不能够满足分子生物学定量分析的要求。20世纪末，Voge本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种数字PCR液滴形成方法，其特征在于，包括以下步骤：/n向PCR试剂腔室内注入数字PCR溶液，使数字PCR溶液进入与所述PCR试剂腔室连通的液滴喷孔，形成数字PCR溶液液体；/n向液滴形成腔室中添加液滴形成油，其中，所述液滴形成腔室由导热板、盖板及设置于所述盖板的一侧面的倒U型台阶共同围成；/n采用汽化部件使部分所述数字PCR溶液液体汽化并将剩余所述数字PCR溶液液体快速推入所述液滴形成腔室中的所述液滴形成油中，以形成所述数字PCR液滴。/n

【技术特征摘要】
1.一种数字PCR液滴形成方法，其特征在于，包括以下步骤：
向PCR试剂腔室内注入数字PCR溶液，使数字PCR溶液进入与所述PCR试剂腔室连通的液滴喷孔，形成数字PCR溶液液体；
向液滴形成腔室中添加液滴形成油，其中，所述液滴形成腔室由导热板、盖板及设置于所述盖板的一侧面的倒U型台阶共同围成；
采用汽化部件使部分所述数字PCR溶液液体汽化并将剩余所述数字PCR溶液液体快速推入所述液滴形成腔室中的所述液滴形成油中，以形成所述数字PCR液滴。


2.根据权利要求1所述的数字PCR液滴形成方法，其特征在于：所述汽化部件包括加热部件，通过加热所述数字PCR溶液液体使其部分汽化。


3.根据权利要求2所述的数字PCR液滴形成方法，其特征在于：通过控制所述加热部件的发热时间、发热次数及发热间隔时间来控制所述数字PCR液滴的形成速度。

【专利技术属性】
技术研发人员：吴炫烨，关一民，
申请(专利权)人：上海新微技术研发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31