一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法与应用，具体涉及生物技术领域，具体包括有以下步骤：步骤一：取人体肺内活细胞作为细胞悬液，采用催化抗体作为抗体催化剂，将抗体催化剂添加至细胞悬液内部。本发明专利技术通过采用催化抗体作为抗体催化剂，有效的提高了OJ自身抗体的活跃性，使其更加易于检测，并由荧光染色的抗体结合微粒与OJ自身抗体相互结合，并利用抗体结合微粒吸附膜与抗体结合微粒之间的吸附作用，使得OJ自身抗体更加有效的被检测出来，提高了OJ自身抗体检测的准确性和高效率性，改变了以往的单一的荧光标记以及放射性法检测，避免了发生检测失误的状况，利于肌炎症患者的早期诊断，具备较高的诊断性能。

【技术实现步骤摘要】
一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法与应用
本专利技术涉及生物
，更具体地说，本专利技术涉及一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法与应用。
技术介绍
抗合成酶综合征，是一种因自身的肌炎特异性抗体功能紊乱，而产生的临床疾病。自从1980年Nishikai首次发现抗Jo-1抗体、并证实该抗体与肌炎密切相关后，人们又陆续发现抗PL-7、PL-12、OJ及EJ等抗氨酰-tRNA合成酶抗体。它们与抗SRP、Mi-2及抗Mas抗体等同属于“肌炎特异性自身抗体”。它们在DM和PM患者血清中的阳性率约为25％～40％。这些抗体阳性的患者，不论抗体的种类，基本临床表现是一致的，即都具有所谓的“抗合成酶综合征”(抗Jo-1抗体综合征)。至今发现的以上5种抗合成酶抗体中，抗Jo-1抗体在肌炎中是最常见的，阳性率为15％～30％，在特发性多肌炎中的阳性率为25％～45％，而在皮肌炎中的阳性率一般小于10％，其他4种抗合成酶抗体在肌炎中的阳性率均不超过5％，但在皮肌炎的阳性率高于多肌炎。在同一患者中一般不同时存在这5种抗体，但可与其他自身抗体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法，其特征在于，具体包括有以下步骤：/n步骤一：取人体肺内活细胞作为细胞悬液，采用催化抗体作为抗体催化剂，将抗体催化剂添加至细胞悬液内部，轻微晃动细胞悬液，在适宜温度环境下静置半小时；/n步骤二：制作抗体结合微粒，并将抗体结合微粒置于荧光抗体悬浮液内部并进行搅拌，将染色后的抗体结合微粒置于适宜温度下保存半个小时，并将染色后的抗体结合微粒倒入到细胞悬液内部，采用气流法进行搅拌，使得抗体结合微粒与细胞悬液内的OJ自身抗体相互结合在一起；/n步骤三：制作抗体结合微粒吸附膜，采用具有与抗体结合微粒相互结合的抗原做原材料，该抗体结合微粒吸附膜内为100ul/孔；...

【技术特征摘要】
1.一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法，其特征在于，具体包括有以下步骤：
步骤一：取人体肺内活细胞作为细胞悬液，采用催化抗体作为抗体催化剂，将抗体催化剂添加至细胞悬液内部，轻微晃动细胞悬液，在适宜温度环境下静置半小时；
步骤二：制作抗体结合微粒，并将抗体结合微粒置于荧光抗体悬浮液内部并进行搅拌，将染色后的抗体结合微粒置于适宜温度下保存半个小时，并将染色后的抗体结合微粒倒入到细胞悬液内部，采用气流法进行搅拌，使得抗体结合微粒与细胞悬液内的OJ自身抗体相互结合在一起；
步骤三：制作抗体结合微粒吸附膜，采用具有与抗体结合微粒相互结合的抗原做原材料，该抗体结合微粒吸附膜内为100ul/孔；
步骤四：将上述步骤过程中的细胞悬液缓慢倒置在抗体结合微粒吸附膜上，细胞悬液依次穿过多层抗体结合微粒吸附膜，在倾倒的时候，需要手动晃动多层抗体结合微粒吸附膜，使得细胞悬液能够全面吸附在抗体结合微粒吸附膜上；
步骤五：将多层抗体结合微粒吸附膜缓慢翻转，将上面附着的抗体结合微粒倾倒下来，在显微镜下进行操作并观察，由荧光标记的抗体结合微粒来确定OJ自身抗体。


2.根据权利要求1所述的一种抗合成酶综合征OJ自身抗体的检测方法，其特征在于：所述步骤一中细胞悬液用碳...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵洪军，周亚欧，宁旺斌，刘思佳，
申请(专利权)人：中南大学湘雅医院，
类型：发明
国别省市：湖南;43