一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用，所述神经导向因子Sema选自Sema 3a蛋白，Sema 3a蛋白可以选自天然蛋白或重组蛋白。另一方面，本发明专利技术公开了一种基于神经导向因子Sema的搽剂及其制备方法，所述搽剂包括：神经导向因子Sema和溶剂，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50‑100μg/mL。

The application of SEMA, a nerve guiding factor, in the preparation of liniment for the treatment of osteoarthritis

【技术实现步骤摘要】
一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种神经导向因子Sema大分子蛋白在制备治疗骨关节炎搽剂中的用途。
技术介绍
骨关节炎(OA)是指以软骨丢失及伴有关节周围骨反应为特点的一种滑膜关节病，又称骨关节病、退行性骨关节病、肥大性或增生性关节炎等，是全球范围内最常见的风湿性疾病。骨关节炎是由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。骨关节炎是中老年人群中最常见的关节疾病，调查研究显示，60岁以上的人群中患病率可达50％，75岁以上人群中则达80％，该病致残率高达53％，调查显示，骨关节炎已成为老年人致残头号杀手。骨关节炎病症大多起病隐袭，进展缓慢，受累关节可间断出现轻中度钝痛，且所述病症可因过度活动、气候变化等原因诱发或加重，严重者症状体征明显且持续不缓解，甚至出现关节畸形、功能障碍。骨关节炎的治疗目的是减轻症状，延缓关节结构改变，维持关节功能，提高生活质量。2000年ACR制定的OA治疗指南以及欧洲风湿病学会联盟(EULAR)对膝OA治疗的建议基本都是三个方面，即非药物治疗、药物治疗、手术治疗。其中，在药物治疗中非甾体抗炎药(NSAIDs)是一类化学结构不同的具有抗炎、止痛、解热等功能的非类固醇药物，常用于骨关节炎的治疗。值得注意的是，一些试验观察到某些NSAIDs抑制软骨合成，加速软骨退化，此外，口服非甾体抗炎药经常会导致胃肠道问题(尤其是对于老年患者)，长期使用通常伴有肾脏、肝脏和其他功能异常。除了NSAIDs，类固醇类药物由于可迅速改善症状而经常应用于骨关节炎治疗，但频繁使用类固醇药物可能损害关节，所以应慎重考虑类固醇注射治疗。其次，使用透明质酸注射液关节腔内注射，即粘弹性补充疗法在治疗骨关节炎病症中越来越普遍，在中国销售的关节腔内注射制剂含鸡冠花来源的透明质酸钠，平均分子量为800,000道尔顿。其虽然具有缓解疼痛、抗炎特性、改善关节活动度、暂无严重药物不良反应等效应，但却无法抑制骨关节炎进程且仅对早期骨关节炎有效。Semaphorin蛋白家族是一类以半胱氨酸富集区域为特征的一组分泌型或膜相关的蛋白家族,最初作为影响神经发育的神经轴突导向因子而被发现，Semaphorin是一大类分泌型或跨膜型糖蛋白分子，参与机体多项重要生理过程的调节，包括调控神经系统的轴突发育、血管形成、骨分化、心血管发育等。根据其组成特点将其分为8型，其中有部分家族蛋白分子参与免疫功能的调节从而将其命名为ImmuneSemaphorin，如Semaphorin4D(Sema4D，又名CD100)、Semaphorin3A(Sema3A)、和Semaphorin7A(Sema7A)等。其中，Sema3A最早被发现，也是最经典的Sema家族成员之一，可调控和引导神经轴突的生长。近年来研究发现Sema3A除发挥神经轴突导向作用外，还与细胞迁移、肿瘤生长、血管生成、骨代谢及免疫调节等多种机体的病理生理现象密切相关。非专利文献“Semaphorin3A在类风湿关节炎患者血清及外周血单个核细胞中的表达及意义”中提到Semaphorin3A(Sema3A)在类风湿关节炎(RA)患者外周血及血清中的表达水平，探讨Sema3A在RA发病机制中的作用。结果显示RA患者血清Sema3A水平显著高于健康人，且血清Sema3A水平与血小板计数、ESR、IgM、类风湿因子、HRF-IgG呈正相关。非专利文献“骨改建中潜在的作用靶点-信号素Sema3A的研究进展”中研究证明Sema3A具有促进成骨细胞生成以及同时抑制破骨细胞生成的功能，且骨折愈合与神经纤维长入骨痂密切相关，神经生长导向因子Sema3A可通过调控感觉神经纤维长入调节骨量代谢。专利文献“一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法”公开了一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法。所述专利技术构建了含有Sema3A基因序列的重组质粒，通过将Sema3A重组质粒和辅助包装质粒转染进入293T细胞获得Sema3A慢病毒载体，慢病毒载体在polybrene的协助下将Sema3A基因导入脂肪干细胞，显著地促进了脂肪干细胞的成骨分化，同时也抑制了脂肪干细胞向成脂方向的分化，导入Sema3A基因可以更好地将脂肪干细胞应用于促进骨缺损愈合和种植体骨结合。虽然现有技术公开了Sema3A用于治疗骨相关疾病的应用，而且仅是针对骨的治疗，而未涉及软骨，本专利技术所述的骨关节炎是由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤。因此，本专利技术所述的药物制剂与现有制剂应用的疾病病种不同，且现有技术未曾公开由Sema大分子蛋白作为有效成分制备的搽剂在治疗骨关节中的应用。
技术实现思路
为了改善现有技术的缺陷，本专利技术提供一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用，另外，本专利技术提供一种基于神经导向因子Sema的搽剂及其制备方法。第一方面，本专利技术提供一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用，所述神经导向因子Sema的序列选自下列氨基酸序列中的一种：1)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为如SEQIDNO:1所示序列的全部或部分；2)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为与SEQIDNO:1具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性程度的序列；3)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列与SEQIDNO:1所示序列的差异不超过5、4、3、2或1个氨基酸；4)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为SEQIDNO:1的变体，其中所述变体与SEQIDNO:1的差异包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的序列或至少一个N-/C-末端延伸。优选的，所述神经导向因子Sema选自Sema3a蛋白，所述Sema3a蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。本专利技术中SEQIDNO:1的氨基酸序列如下所示：第二方面，本专利技术提供一种基于神经导向因子Sema的搽剂，所述搽剂包括：神经导向因子Sema和溶剂，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50-100μg/mL。优选的，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50-70μg/mL。在本专利技术的优选实施方式中，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50μg/mL。所述神经导向因子Sema的序列选自下列氨基酸序列中的一种：1)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为如SEQIDNO:1所示序列的全部或部分；2)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为与SEQIDNO:1具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性程度的序列；3)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列与SEQIDNO:1所示序列的差异不超过5、4、3、2或1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用，所述神经导向因子Sema的序列选自下列氨基酸序列中的一种：/n1)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为如SEQ ID NO:1所示序列的全部或部分；/n2)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为与SEQ ID NO:1具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性程度的序列；/n3)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示序列的差异不超过5、4、3、2或1个氨基酸；/n4)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为SEQ ID NO:1的变体，其中所述变体与SEQID NO:1的差异包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的序列或至少一个N-/C-末端延伸。/n

【技术特征摘要】
1.一种神经导向因子Sema在制备治疗骨关节炎搽剂中的应用，所述神经导向因子Sema的序列选自下列氨基酸序列中的一种：
1)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为如SEQIDNO:1所示序列的全部或部分；
2)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为与SEQIDNO:1具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性程度的序列；
3)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列与SEQIDNO:1所示序列的差异不超过5、4、3、2或1个氨基酸；
4)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为SEQIDNO:1的变体，其中所述变体与SEQIDNO:1的差异包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的序列或至少一个N-/C-末端延伸。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述神经导向因子Sema选自Sema3a蛋白，所述Sema3a蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。


3.一种权利要求1所述的基于神经导向因子Sema的搽剂，所述搽剂包括：神经导向因子Sema和溶剂，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50-100μg/mL。


4.根据权利要求3所述的搽剂，其特征在于，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50-70μg/mL。


5.根据权利要求4所述的搽剂，其特征在于，所述神经导向因子Sema在溶剂中的浓度为50μg/mL。


6.根据权利要求3所述的搽剂，其特征在于，所述神经导向因子Sema的序列选自下列氨基酸序列中的一种：
1)所述神经导向因子Sema的氨基酸序列为如SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄石书，王立平，杨帆，吴迪伟，尤炫合，高大双，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51