【技术实现步骤摘要】
一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法及应用
本专利技术属于生物传感检测
，涉及基于一种电化学(EC)和光电化学(PEC)双比率传感器的制备方法及应用，具体涉及一种基于二茂铁(Fc)和亚甲基蓝(MB)体系的链霉素双比率传感器的制备方法及应用。
技术介绍
链霉素(STR)，是一种氨基糖苷类抗生素，由于其杀菌效果好，价格低廉，因此，其用药频繁、超量用药等滥用问题日益突出，造成药物残留在农作物、水体和土壤中。长期摄入含有链霉素残留的瓜果、蔬菜、农产品等会直接或间接威胁人、畜健康，研究还表明农用链霉素具有潜在致畸作用。因此，对链霉素的检测很有必要。采用两种检测方法同时对目标物进行分析，可得到双信号输出，更精准检测目标物，适用于残留检测分析。采用比率方法对目标物进行分析，使用两个信号的比值实现对目标物的定量检测，可以有效降低环境干扰。将双检测方法与比率方法结合构建传感器进行检测还未见报道。
技术实现思路
本专利技术旨在耦合电化学比率和电化学-光电化学比率传感技术，构筑一种基于F...
【技术保护点】
1.一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备金纳米粒子(Au NPs)水溶液，备用；/n(2)氧化铟锡玻璃(ITO)电极经预处理后，备用；/n(3)设计杂交链式反应中各核苷酸链的碱基：sDNA，Fc-rp-Fc，Fc-Apt，HP1和HP2；/n然后，将sDNA、Fc-rp-Fc和Fc-Apt进行混合，在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的杂化结构Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA；/n将HP1和HP2分别在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的发夹结构，处理后的HP1和HP2溶液等物质的量混合形成HP1和HP2发...
【技术特征摘要】
1.一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备金纳米粒子(AuNPs)水溶液，备用；
(2)氧化铟锡玻璃(ITO)电极经预处理后，备用；
(3)设计杂交链式反应中各核苷酸链的碱基：sDNA，Fc-rp-Fc，Fc-Apt，HP1和HP2；
然后，将sDNA、Fc-rp-Fc和Fc-Apt进行混合，在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的杂化结构Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA；
将HP1和HP2分别在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的发夹结构，处理后的HP1和HP2溶液等物质的量混合形成HP1和HP2发夹结构的混合溶液；
(4)将步骤(1)制备的AuNPs水溶液修饰到步骤(2)预处理后的氧化铟锡玻璃电极表面，并在空气中干燥，此时，产品标记为AuNPs/ITO；
(5)在一定温度下，将步骤(3)制备的Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA杂化结构在步骤(4)修饰好的电极上作用一定时间，通过金巯键的作用固定在电极表面，此时，产品标记为Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA/AuNPs/ITO；
(6)将步骤(5)得到的产品Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA/AuNPs/ITO修饰一定量的巯基己醇(MCH)，孵育一定时间，以封闭AuNPs未结合的特异性位点；继续修饰不同浓度STR溶液，室温下孵育一定时间,之后用PBS对产品进行清洗，此时，产品标记为Fc-rp-Fc/sDNA/AuNPs/ITO；
(7)将步骤(3)制备的HP1和HP2发夹结构的混合溶液在步骤(6)修饰好的电极上，室温下孵育一定时间，此时，得到的产品标记为HP2/HP1…/Fc-rp-Fc/sDNA/AuNPs/ITO；
(8)将步骤(7)制得的产品HP2/HP1…/Fc-rp-Fc/sDNA/AuNPs/ITO修饰一定浓度的亚甲基蓝(MB)溶液，室温下孵育一定时间,之后用PBS对产品进行清洗，得到链霉素的电化学和光电化学双比率适配体传感器。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，制备AuNPs水溶液的步骤为：首先，配制0.1mol·L-1氯金酸溶液和100mg·mL-1柠檬酸三钠溶液；取200μL0.1mol·L-1氯金酸溶液和25mL超纯水置于三颈烧瓶中,油浴加热至其沸腾完全；然后加入0.25mL100mg·mL-1柠檬酸三钠溶液，继续反应15min，自然冷却至室温，避光放置于4℃冰箱中备用。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，氧化铟锡玻璃电极的预处理步骤为：...
【专利技术属性】
技术研发人员：由天艳，申秀丽，刘东，朱成喜，李玉叶，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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