本实用新型专利技术公开了一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，包括微孔膜(1)，微孔膜(1)设有固定件(2)，固定件(2)上设有反应槽(6)；反应槽(6)上设有上盖(7)；固定件(2)的一侧设有可升降载物台(3)，固定件(2)下方设置有存储仓(5)；所述的存储仓(5)中充填有吸水物质。细胞悬液通过微孔膜时，由于采用吸引过滤截留方式，使大于膜孔径的细胞截留在反应容器内，吸附于膜面。由于吸水物质吸引速度稳定、吸引力度柔和、缓慢基本无压力，使细胞贴服于膜的表面。
A kind of integrated reaction device for cell enrichment and staining
【技术实现步骤摘要】
一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置
本技术属于医学器械领域，具体涉及一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，主要用于体液(血液、尿液、胸腹水、脑脊液、关节积液、唾液、痰液、分泌物、咽喉及宫颈拭子等)中的有核细胞(恶性肿瘤细胞、血液病细胞、心血管脱落细胞、母体血胎儿细胞及微生物细胞)等的吸印富集与吸印染色鉴定，具有重要的临床应用价值。
技术介绍
目前，从体液中富集有核病理细胞，其中主要手段为：(1)基于CTC(外周血肿瘤细胞)依赖抗体捕获富集血液中的恶性细胞：由于恶性细胞抗原表达的差异性或缺失、捕获效率差异性很大(有时相当低)，可能出现较多的假阳性或假阴性；(2)采用依赖细胞大小ISET式的细胞过滤截留技术富集CTC，由于采用正压和负压驱动或吸引液体中的细胞通过微孔膜，其细胞被压力或吸引力被动的积压和积压在微孔膜表面、可改变或破坏细胞的形态结构、或堵塞微孔膜、或穿透微孔膜进入废弃液中，导致不能准确的染色鉴定或漏检，出现假阳性或假阴性；(3)脱落细胞检查：采集的目标细胞少，杂细胞多，难以准确灵敏的检测鉴定体液中已出现的病理细胞。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，基于微孔膜的毛细微滤反应方法与反应装置，不依赖于抗体，通过微孔膜毛细微滤装置来富集截留体液中的有核病理细胞；并在富集截留有核病理细胞的微孔膜上进行细胞化学、细胞免疫学和细胞遗传学反应，通过毛细微滤装置吸收反应过的液体或洗涤液体，完成细胞的富集与鉴定程序。对体液中出现的恶性细胞、心血管脱落细胞、母体血胎儿细胞及微生物细胞吸印与富集。根据本技术的一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，包括微孔膜，微孔膜设有固定件，固定件上设有反应槽；反应槽上设有上盖；固定件的一侧设有可升降载物台，固定件下方设置有存储仓；所述的存储仓中充填有吸水物质。所述的微孔膜具体为聚碳酸酯膜、聚醚砜膜、硝酸纤维素薄膜等。在优选实施例中，微孔膜还可以设置有刚性膜支持物，如硅片网、金属网等。所述的微孔膜与固定件相连接；所述的固定件为普通玻片式：将两片玻片制孔，将微孔膜粘着或夹在孔中间，用环形垫支撑夹紧微孔膜(防止细胞和反应液泄露)；其中一玻片上粘结有待盛液体的反应槽，用于加体液或反应液。所述的微孔膜与固定件相连接；所述的固定件为3D打印玻片式：分有适当孔径的上下两片，上片直接在孔的上方打印待盛液体的反应槽，将微孔膜粘在或夹在上下片的两孔之间，用环形垫支撑夹紧微孔膜。所述的反应槽的内径与微孔膜的直径相等。所述的反应槽的外径与上盖的内径相等。所述的反应槽的高度与上盖的高度之比为1：(1.1～1.2)。所述的存储仓的内径与反应槽内径的比值为(1.5～1.6)：1。所述的固定件通过插口连接可升降载物台。所述的体液中有核细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置还包括底座，所述的可升降载物台与底座连接；所述的存储仓设置在底座中。所述的微孔膜、反应槽、存储仓上下同轴设置。所述的吸水物质包括吸水纸(包括滤纸、卫生巾、卫生纸等)、吸水海绵、吸水树脂或吸水棉等。相对于现有技术，本技术的有益效果为：从体液中检测这些感染的病原微生物，目前主要是采用培养、涂片免疫学方法进行检测与鉴定，其中培养与后续鉴定时间长、操作较为复杂，特别是不适宜用于急诊和ICU(重症监护病房)病人标本检验。如应用抗生素等还可导致病原体变异，难以检出。涂片检测灵敏度低。免疫学检测一般是检测病原的抗体(抗原量相对较低、难以检出)，难以做到早期检验与早期诊断。本装置实际上就是一个有核细胞富集与染色一体化实验室，由吸水物质部分来吸取接收和驱动样品液与反应液体流动，反应液覆盖、混悬细胞液体，由微孔膜过滤截留目标物(恶性细胞、病原生物)，通过吸水物质吸收、驱动样品和反应液体，在微孔膜上完成一切反应。(1)基于吸水物质吸取截留物质：细胞悬液通过微孔膜时，由于采用吸引过滤截留方式，使大于膜孔径的细胞截留在反应容器内，吸附于膜面。由于吸水物质吸引速度稳定、吸引力度柔和、缓慢基本无压力，使细胞贴服于膜的表面。(2)低速过滤截留：低速过滤截留其剪切力小，不破坏细胞的形态结构。(3)可设定吸印反应时间：使反应物(抗原抗体、标记物等试剂)与细胞充分接触并持续反应一定的时间，达到充分反应并反应完全增加检测灵敏度之目的。(4)可设定洗涤时间和洗涤次数：充分的洗涤可除去非特异性物质或未结合剩余的反应物，增加检测反应的特异性。(5)微孔膜的应用：因为膜的孔径是基于检验物质的直径大小而指定的(如检测CTC时给定膜的孔径一般为8um,检测白血病细胞时给定膜的孔径一般为5um,检测结核杆菌时给定膜的孔径一般为0.8um,其它微生物细胞截留的微孔膜孔径根据需要而应用，蛋白质芯片检测抗原、病原体或抗体用0.4um的硝酸纤维素膜。)(6)物理方式捕获富集多类恶性细胞(癌细胞、肉瘤细胞、血液病细胞和黑色素瘤细胞)和病原生物包括细菌、真菌、寄生虫及病毒等致病生物。(7)检测标本种类多、包括血液、尿液、唾液、脑脊液、胸腹水等，几乎概括了人和动物所有能取得的检测样本。(8)简便快速、在2小时内可得到细胞病理学或病原学检测结果。本技术基于检测体液中的恶性细胞和病原生物，专利技术有核细胞富集与染色一体化装置用于体液中(特别是血液)的恶性细胞和病原生物的捕获富集与染色鉴定。达到对体液中出现的恶性细胞的早期检测和鉴定、指导临床用药、检测转移和复发的目的。达到早期准确检测和鉴定病原生物，用于感染性疾病的急诊检验、ICU病人的即刻检验、重大公共传染病的及时筛查等目的。附图说明图1为本技术提供的细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置的结构示意图。图2为本技术提供的细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置的微孔膜结构示意图。其中：1为微孔膜、2为固定件、3为可升降载物台、4为底座、5为存储仓、6为反应槽、7为上盖、8为插口、10为细胞、11为渗透孔。具体实施方式下面通过附图和具体实施例对本技术做进一步说明，本领域技术人员应该理解，如下所述并不用于对本技术作出任何限制。参见图1，一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，包括微孔膜1，微孔膜1设有固定件2，固定件2上设有反应槽6；反应槽6上设有上盖7；固定件2的一侧设有可升降载物台3，固定件2下方设置有存储仓(吸水装置)5；存储仓5中充填有吸水物质。可升降载物台3与底座4连接；存储仓5设置在底座4中。具体情况下，微孔膜1、反应槽6、存储仓5上下同轴设置(或对齐设置)。反应槽6的内径与微孔膜1的直径相等。反应槽6的外径与上盖7的内径相等。反应槽6的高度与上盖7的高度之比为1：(1.1～1.2)。存储仓5的内径与反应槽6内径的比值为(1.5～1.6)：1。具体参见图2，微孔膜1具体可以为聚碳酸酯膜、聚醚砜膜、硝酸纤维素薄膜等，微孔膜1具本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，其特征在于：包括微孔膜(1)，微孔膜(1)设有固定件(2)，固定件(2)上设有反应槽(6)；反应槽(6)上设有上盖(7)；固定件(2)的一侧设有可升降载物台(3)，固定件(2)下方设置有存储仓(5)；所述的存储仓(5)中充填有吸水物质。/n
【技术特征摘要】
1.一种细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，其特征在于：包括微孔膜(1)，微孔膜(1)设有固定件(2)，固定件(2)上设有反应槽(6)；反应槽(6)上设有上盖(7)；固定件(2)的一侧设有可升降载物台(3)，固定件(2)下方设置有存储仓(5)；所述的存储仓(5)中充填有吸水物质。
2.根据权利要求1所述的细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，其特征在于，所述的微孔膜(1)包括聚碳酸酯膜、聚醚砜膜、硝酸纤维素薄膜。
3.根据权利要求1所述的细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，其特征在于：所述的微孔膜(1)与固定件(2)相连接；所述的固定件(2)为普通玻片式：将两片玻片制孔，将微孔膜(1)粘着或夹在孔中间，用环形垫支撑夹紧微孔膜；其中一玻片上粘结有待盛液体的反应槽(6)，用于加体液或反应液。
4.根据权利要求1所述的细胞吸印富集与吸印染色一体化反应装置，其特征在于：所述的微孔膜(1)与固定件(2)相连接；所述的固定件(2)为3D打印玻片式：分有适当孔径的上下两片，上片直接在孔的上方打印待盛液体的反应槽(6)，将微孔膜(1)粘在或夹在上下片的...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖乐义，刘元柱，米明仁，杨勤英，李娟，宋继波，刘健，
申请(专利权)人：青岛北大新世纪言鼎生物医学科技有限公司，
类型：新型
国别省市：山东;37
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