提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA及其应用制造技术

本发明专利技术公开了提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA及其应用，amiRNA的核酸序列如SEQ ID NO.4所示，利用表达小RNA的策略，表达人工miRNA，获得具有较好的抗PSTVd效果的转基因马铃薯，且与野生型马铃薯在生物学表型上没有明显的差异，该方法不需要长的病源cDNA片段，有效的小RNA不会被大量由长cDNA片段产生的无效的小RNA所稀释，没有同源性的人工miRNA序列可以避免“脱靶”，不会造成植物发育缺陷；还可以可以避免长片段RNA同源互补对农业生产应用中带来的生物安全问题；并且也可以为其他作物的转基因抗病育种工作提供一些理论借鉴，促进我国作物分子抗病育种研究的发展。

【技术实现步骤摘要】
提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA及其应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA，还涉及提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA的应用。
技术介绍
马铃薯纺锤块茎类病毒(Potatospindletuberviroid，PSTVd)是影响马铃薯种薯质量的重要病害。该病害能够随着种薯的无性繁殖逐代传播，而且随着带毒代数的增加，症状越来越重，产量急剧降低，块茎变小，龟裂、畸形，基本失去商品性，更无种用价值。国内外解决马铃薯种薯退化的主要方式是通过茎尖剥离、组织培养方式进行汰除病毒，建立脱毒种薯繁育体系，生产健康种薯。但存在以下问题，在众多的病原菌中，马铃薯纺锤块茎类病毒病不同于病毒，是没有蛋白外壳的裸露的亚病毒，是不能通过茎尖剥离、组织培养来汰除，一旦发现就只能淘汰，无法实现脱毒。PSTVd可进入细胞核是由于类病毒序列或结构区域与细胞内运输因子相互作用，形成核酸-蛋白复合物，这个复合物将协助类病毒进入细胞核内。有研究表明，植物的转录因子类病毒结合蛋白1(VIRP1)能被类病毒利用，协助类病毒在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA，其特征在于：所述amiRNA的核酸序列如SEQ IDNO.4。/n

【技术特征摘要】
1.提升马铃薯PSTVd抗性的amiRNA，其特征在于：所述amiRNA的核酸序列如SEQIDNO.4。


2.提升马铃薯PSTVd抗性的前体amiRNA，其特征在于：所述前体amiRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.8所示。


3.含有权利要求2所述前体amiRNA的重组载体。


4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体由SEQIDNO.8所示序列插入pCAMBIA1300-221载体的XbaI和SacI之间。


5.权利要求1所述的amiRNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕典秋，刘尚武，郭惠珊，房媛媛，赵建华，宿飞飞，李辉，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50