【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型昆虫抑制蛋白相关申请的引用本申请要求2017年4月3日提交的美国临时申请号62/480,614的权益,该临时申请全文以引用方式并入本文。序列表的并入名为“MONS443WO-sequence_listing.txt”的文件创建于2018年4月2日,其中包含序列表的计算机可读形式。该文件为653千字节(在中测得),同时以电子方式提交(使用美国专利局EFS-Web归档系统(UnitedStatesPatentOfficeEFS-Webfilingsystem)),并且其全文以引用方式并入本申请。
本专利技术整体涉及昆虫抑制蛋白领域。公开了一类新型的对作物植物和种子的农业相关害虫表现出昆虫抑制活性的蛋白。具体地讲,所公开的蛋白对作物植物和种子的农业相关害虫(特别是害虫的鞘翅目(Coleopteran)和鳞翅目(Lepidopteran)物种)具有杀昆虫活性。提供了含有编码一种或多种所公开的毒素蛋白的重组多核苷酸构建体的植物、植物部分和种子。
技术介绍
提高重要的农业植物(尤其包括玉米、大豆、甘蔗、稻、小麦、蔬菜和棉花)的作物产量已经变得越来越重要。除了越来越需要农业产品来为不断增长的人口供给食物、衣物并提供能量之外,预测与气候相关的影响以及来自不断增长的人口使用除农业活动之外的土地的压力将会减少可用于耕作的耕地。这些因素导致对食品安全的悲观预期,特别是在植物生物工艺学和农艺操作缺乏重大改进的情况下。鉴于这些压力,在工艺学、农业技术和害虫管理方面的环境可持续改进是在有限量的可用于耕作的耕地 ...
【技术保护点】
1.一种重组核酸分子,其包含可操作地连接至编码杀虫蛋白或其杀虫片段的多核苷酸区段的异源启动子,其中:/na.所述杀虫蛋白包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:22、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ IDNO:34、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:53、SEQ IDNO:55、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:65、SEQ IDNO:67、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:77、SEQ I ...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170403 US 62/480,6141.一种重组核酸分子,其包含可操作地连接至编码杀虫蛋白或其杀虫片段的多核苷酸区段的异源启动子,其中:
a.所述杀虫蛋白包含SEQIDNO:2、SEQIDNO:4、SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:16、SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:24、SEQIDNO:26、SEQIDNO:28、SEQIDNO:30、SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:43、SEQIDNO:46、SEQIDNO:48、SEQIDNO:50、SEQIDNO:53、SEQIDNO:55、SEQIDNO:57、SEQIDNO:59、SEQIDNO:61、SEQIDNO:63、SEQIDNO:65、SEQIDNO:67、SEQIDNO:69、SEQIDNO:71、SEQIDNO:73、SEQIDNO:75、SEQIDNO:77、SEQIDNO:79、SEQIDNO:81、SEQIDNO:83、SEQIDNO:85、SEQIDNO:87、SEQIDNO:89、SEQIDNO:91、SEQIDNO:93、SEQIDNO:95、SEQIDNO:97、SEQIDNO:99、SEQIDNO:101、SEQIDNO:103、SEQIDNO:105、SEQIDNO:107、SEQIDNO:109、SEQIDNO:111、SEQIDNO:113、SEQIDNO:115、SEQIDNO:117、SEQIDNO:119、SEQIDNO:121、SEQIDNO:123、SEQIDNO:125或SEQIDNO:127的氨基酸序列;或者
b.所述杀虫蛋白包含:
i.与SEQIDNO:18、SEQIDNO:20、SEQIDNO:22、SEQIDNO:24、SEQIDNO:26、SEQIDNO:28、SEQIDNO:63、SEQIDNO:65、SEQIDNO:67、SEQIDNO:69、SEQIDNO:75、SEQIDNO:85、SEQIDNO:87、SEQIDNO:89、SEQIDNO:91、SEQIDNO:93、SEQIDNO:95、SEQIDNO:97、SEQIDNO:99、SEQIDNO:101、SEQIDNO:103、SEQIDNO:105、SEQIDNO:107或SEQIDNO:109具有至少75%同一性的氨基酸序列;或
ii.与SEQIDNO:111、SEQIDNO:113、SEQIDNO:115、SEQIDNO:119、SEQIDNO:125或SEQIDNO:127具有至少80%同一性的氨基酸序列;或
iii.与SEQIDNO:121或SEQIDNO:123具有至少85%同一性的氨基酸序列;或
iv.与SEQIDNO:2、SEQIDNO:4、SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:14、SEQIDNO:34、SEQIDNO:43、SEQIDNO:46、SEQIDNO:48、SEQIDNO:50、SEQIDNO:57、SEQIDNO:71、SEQIDNO:73、SEQIDNO:77、SEQIDNO:79、SEQIDNO:81或SEQIDNO:117具有至少90%同一性的氨基酸序列;或
v.与SEQIDNO:12、SEQIDNO:16、SEQIDNO:30和SEQIDNO:59具有至少93%同一性的氨基酸序列;或
vi.与SEQIDNO:53或SEQIDNO:55具有至少94%同一性的氨基酸序列;或
vii.与SEQIDNO:32、SEQIDNO:61或SEQIDNO:83具有至少99%同一性的氨基酸序列;或
c.所述多核苷酸区段在严格杂交条件下与具有SEQIDNO:1、SEQIDNO:3、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7、SEQIDNO:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:13、SEQIDNO:15、SEQIDNO:17、SEQIDNO:19、SEQIDNO:21、SEQIDNO:23、SEQIDNO:25、SEQIDNO:27、SEQIDNO:29、SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:35、SEQIDNO:36、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:44、SEQIDNO:45、SEQIDNO:47、SEQIDNO:49、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:54、SEQIDNO:56、SEQIDNO:58、SEQIDNO:60、SEQIDNO:62、SEQIDNO:64、SEQIDNO:66、SEQIDNO:68、SEQIDNO:70、SEQIDNO:72、SEQIDNO:74、SEQIDNO:76、SEQIDNO:78、SEQIDNO:80、SEQIDNO:82、SEQIDNO:84、SEQIDNO:86、SEQIDNO:88、SEQIDNO:90、SEQIDNO:92、SEQIDNO:94、SEQIDNO:96、SEQIDNO:98、SEQIDNO:100、SEQIDNO:102、SEQIDNO:104、SEQIDNO:106、SEQIDNO:108、SEQIDNO:110、SEQIDNO:112、SEQIDNO:114、SEQIDNO:116、SEQIDNO:118、SEQIDNO:120、SEQIDNO:122、SEQIDNO:124或SEQIDNO:126的核苷酸序列的多核苷酸杂交。
2.如权利要求1所述的重组核酸分子,其中:
a.所述重组核酸分子包含用于在植物中表达所述杀虫蛋白的序列;或者
b.所述重组核酸分子在植物细胞中表达以产生杀虫有效量的所述杀虫蛋白;或者
c.所述重组核酸分子与载体可操作地连接,并且所述载体选自由质粒、噬菌粒、杆粒、粘粒以及细菌或酵母人工染色体组成的组。
3.如权利要求1所述的重组核酸分子,所述重组核酸分子被限定为存在于宿主细胞内,其中所述宿主细胞选自由细菌和植物细胞组成的组。
4.如权利要求3所述的重组核酸分子,其中所述细菌宿主细胞来自选自由以下组成的组的细菌属:农杆菌属、根瘤菌属、芽孢杆菌属、短芽孢杆菌属、埃希氏菌属、假单胞菌属、克雷伯氏菌属、泛菌属和欧文氏菌属。
5.如权利要求4所述的重组核酸分子,其中所述芽孢杆菌属物种为蜡状芽孢杆菌或苏云金芽孢杆菌,所述短芽孢杆菌属为侧孢短芽孢杆菌,或者所述埃希氏菌属为大肠杆菌。
6.如权利要求3所述的重组核酸分子,其中所述植物细胞是双子叶或单子叶植物细胞。
7.如权利要求6所述的重组核酸分子,其中所述植物宿主细胞选自由以下组成的组:苜蓿、香蕉、大麦、豆、西兰花、包菜、芸苔、胡萝卜、木薯、蓖麻、菜花、芹菜、鹰嘴豆、大白菜、柑橘、椰子、咖啡、玉米、三叶草、棉花、葫芦、黄瓜、花旗松、茄子、桉树、亚麻、大蒜、葡萄、啤酒花、韭葱、莴苣、火炬松、粟、甜瓜、坚果、燕麦、橄榄、洋葱、观赏植物、棕榈树、牧草、豌豆、花生、胡椒、木豆、松树、马铃薯、白杨树、南瓜、辐射松、萝卜、油菜籽、稻、根茎、黑麦、红花、灌木、高粱、南方松、大豆、菠菜、南瓜、草莓、糖用甜菜、甘蔗、向日葵、甜玉米、香枫、甘薯、柳枝稷、茶、烟草、番茄、黑小麦、草坪草、西瓜和小麦植物细胞。
8.如权利要求1所述的重组核酸分子,其中所述杀虫蛋白对鞘翅目昆虫表现出活性。
9.如权利要求8所述的重组核酸分子,其中所述昆虫是西方玉米根虫、南方玉米根虫、北方玉米根虫、墨西哥玉米根虫、巴西玉米根虫、科罗拉多马铃薯甲虫、由叶甲蝽和南美叶甲组成的巴西玉米根虫复合群、十字花科跳蚤甲虫、黄曲条跳蚤甲虫或西部黑跳蚤甲虫。
10.如权利要求1所述的重组核酸分子,其中所述杀虫蛋白对鳞翅目的昆虫物种表现出活性。
11.如权利要求10所述的重组核酸分子,其中所述昆虫是黑切根虫、玉米穗虫、小菜蛾、欧洲玉米螟、秋粘虫、南方粘虫、大豆尺蠖、西南玉米螟、烟草夜蛾、藜豆毛虫、甘蔗螟、小玉米茎螟虫、黑粘虫、甜菜粘虫、东半球棉铃虫、东方叶虫或红铃虫。
12.一种植物或其部分,其包含如权利要求1所述的重组核酸分子。
13.如权利要求12所述的植物或其部分,其中所述植物是单子叶植物或双子叶植物。
14.如权利要求12所述的植物或其部分,其中所述植物选自由以下组成的组:苜蓿、香蕉、大麦、豆、西兰花、包菜、芸苔、胡萝卜、木薯、蓖麻、菜花、芹菜、鹰嘴豆、大白菜、柑橘、椰子、咖啡、玉米、三叶草、棉花、葫芦、黄瓜、花旗松、茄子、桉树、亚麻、大蒜、葡萄、啤酒花、韭葱、莴苣、火炬松、粟、甜瓜、坚果、燕麦、橄榄、洋葱、观赏植物、棕榈树、牧草、豌豆、花生、胡椒、木豆、松树、马铃薯、白杨树、南瓜、辐射松、萝卜、油菜籽、稻、根茎、黑麦、红花、灌木、高粱、南方松、大豆、菠菜、南瓜、草莓、糖用甜菜、甘蔗、向日葵、甜玉米、香枫、甘薯、柳枝稷、茶、烟草、番茄、黑小麦、草坪草、西瓜和小麦。
15.一种如权利要求12所述的植物的种子,其中所述种子包含所述重组核酸分子。
16.一种昆虫抑制组合物,其包含如权利要求1所述的重组核酸分子。
17.如权利要求16所述的昆虫抑制组合物,其还包含编码与所述杀虫蛋白不同的至少一种其他杀虫剂的核苷酸序列。
18.如权利要求17所述的昆虫抑制组合物,其中所述至少一种其他杀虫剂选自由昆虫抑制蛋白、昆虫抑制dsRNA分子和辅助蛋白组成的组。
19.如权利要求17所述的昆虫抑制组合物,其中所述至少一种其他杀虫剂对鳞翅目、鞘翅目或半翅目的一种或多种害虫物种表现出活性。
20.如权利要求19所述的昆虫抑制组合物,其中所述至少一种其他杀虫蛋白选自由以下组成的组:Cry1A、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1A.105、Cry1Ae、Cry1B、Cry1C、Cry1C变体、Cry1D、Cry1E、Cry1F、Cry1A/F嵌合体、Cry1G、Cry1H、Cry1I、Cry1J、Cry1K、Cry1L、Cry2A、Cry2Ab、Cry2Ae、Cry3、Cry3A变体、Cry3B、Cry4B、Cry6、Cry7、Cry8、Cry9、Cry15、Cry34、Cry35、Cry43A、Cry43B、Cry51Aa1、ET29、ET33、ET34、ET35、ET66、ET70、TIC400、TIC407、TIC417、TIC431、TIC800、TIC807、TIC834、TIC853、TIC900、TIC901、TIC1201、TIC1415、TIC2160、TIC3131、TIC836、TIC860、TIC867、TIC869、TIC1100、VIP3A、VIP3B、VIP3Ab、AXMI-AXMI-、AXMI-88、AXMI-97、AXMI-102、AXMI-112、AXMI-117、AXMI-100、AXMI-115、AXMI-113、AXMI-005、AXMI134、AXMI-150、AXMI-171、AXMI-184、AXMI-196、AXMI-204、AXMI-207、AXMI-209、AXMI-205、AXMI-218、AXMI-220、AXMI-221z、AXMI-222z、AXMI-223z、AXMI-224z和AXMI-225z、AXMI-238、AXMI-270、AXMI-279、AXMI-345、AXMI-335、AXMI-R1及其变体、IP3及其变体、DIG-3、DIG-5、DIG-10、DIG-657DIG-11、Cry71Aa1、Cry72Aa1、PHI-4变体、PIP-72变体、PIP-45变体、PIP-64变体、PIP-74变体、PIP-75变体、PIP-77变体、Axmi422、Dig-305、Axmi440、PIP-47变体、Axmi281、BT-009、BT-0012、BT-0013、BT-0023、BT0067、BT-0044、BT-0051、BT-0068、BT-0128、DIG-17、DIG-90、DIG-79、Cry1JP578V、Cry1JPS1和Cry1JPS1P578V。
21.如权利要求16所述的昆虫抑制组合物,所述昆虫抑制组合物被限定为包含表达所述重组核酸分子的植物细胞。
22....
【专利技术属性】
技术研发人员:D·J·伯温,C·A·蔡,T·A·奇彻,S·弗拉辛斯基,A·R·豪,K·斯里达兰,
申请(专利权)人:孟山都技术公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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