【技术实现步骤摘要】
一种磁珠包被蛋白的工艺方法
本专利技术属于磁珠包被蛋白的工艺
,具体涉及一种磁珠包被蛋白的工艺方法。
技术介绍
化学发光免疫分析(CLIA)是将免疫反应与化学发光反应相结合,用于检测样本中微量抗原/抗体的一种高灵敏度、高效、可重复性高的领先的分析技术。该技术中最常见的模式为选取一对可与待测样本结合的抗体/抗原,其中一株抗体/抗原包被在固相载体上,另一株被发光物质标记,检查过程中,二者同时结合样本中的抗原/抗体,形成夹心结构(成为夹心法);与此同时,CLIA的方法学还包括竞争法、间接法和捕获法。上述方法中,均会涉及一种将抗体/抗原包被在固相载体上并制备成固相试剂的工艺方法。传统固相载体为聚苯乙烯/聚氯乙烯制成的微孔板,随着科学研究的不断深入,超顺磁珠应运而生。超顺磁珠是由核心的磁性材质、中间的高分子保护层、最外的免疫配基三部分组成的粒径较小的均匀球形物,因其表现出的超顺磁性特质而得名,即在外加磁场下具有磁响应性,撤离磁场后磁性消失。相较于聚乙烯板,超顺磁珠在作为固相载体时,具有制备过程不受容器限制、清洗灵活、可做 ...
【技术保护点】
1.一种磁珠包被蛋白的工艺方法,其特征在于,包括:/n步骤一:进行抗原/抗体置换,得到置换后待包被物;/n步骤二:将磁珠清洗;/n步骤三:取清洗后重悬磁珠瓶,置于360混匀仪上,采用水平摆动混匀方式,将磁珠与置换后待包被物进行预混,所述的磁珠浓度为5mg/mL;/n步骤四:在步骤三预混后的磁珠中加入EDC与NHS,置于360混匀仪上进行活化,所述的EDC与磁珠质量比为1:10;/n步骤五:加入封闭液,集磁去上清,清洗,得到磁珠包被蛋白。/n
【技术特征摘要】
1.一种磁珠包被蛋白的工艺方法,其特征在于,包括:
步骤一:进行抗原/抗体置换,得到置换后待包被物;
步骤二:将磁珠清洗;
步骤三:取清洗后重悬磁珠瓶,置于360混匀仪上,采用水平摆动混匀方式,将磁珠与置换后待包被物进行预混,所述的磁珠浓度为5mg/mL;
步骤四:在步骤三预混后的磁珠中加入EDC与NHS,置于360混匀仪上进行活化,所述的EDC与磁珠质量比为1:10;
步骤五:加入封闭液,集磁去上清,清洗,得到磁珠包被蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种磁珠包被蛋白的工艺方法,其特征在于,所述步骤一具体为:将抗原/抗体加入超滤离心管中,离心机2~8℃,5000~7500g正置离心3次,每次补足包被缓冲液倒置离心,回收置换后的待标记物,并用磁珠包被缓冲液定浓。
3.根据权利要求1所述的一种磁珠包被蛋白的工艺方法,其特征在于,所述的包被缓冲液为pH6.5、15mM的MES,含50mMNaCl。
4.根据权利要求1所述的一种磁珠包被蛋白的工...
【专利技术属性】
技术研发人员:齐琳,何浩会,王麒,于猛,高威,
申请(专利权)人:迪瑞医疗科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:吉林;22
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