一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤I、采集装置的准备；步骤II、干血片样品样品的采集及保存处理；步骤III、干血片样品前处理中的目标化合物的萃取；步骤IV、干血片样品的衍生化、pH调节及高效液相UPLC分析；步骤V、高效液相UPLC的分析与定量，其中，所述的样品为指间或足跟采集的毛细血管血液或从抗凝管中收集的静脉全血样品，可使用经过EDTA或者肝素抗凝处理的血样，用于人群分析以及临床试验的维生素B1营养成分的测定，其使用样品量低、简单灵敏，特异型强、重复性好、稳定性好、且所需成本较低。

A method for the determination of three markers of vitamin B1 in dried blood filter paper and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法及其制备方法
本专利技术涉及一种血液检测方法
，尤其是涉及一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法及其制备方法。
技术介绍
作为一种水溶性的维生素，维生素B1又称硫胺素，其作为一种必须营养物质在能量的产生和代谢过程中起着重要的作用。维生素B1的缺乏常见的会导致脚气病、视神经病变以及其他增加婴儿死亡率的相关疾病。因此准确了解高危人群(如东南亚及其他欠发达地区，包括中国农村地区)的维生素B1的水平对于人群调查以及临床试验有着总要的意义。鉴于人群调查等质的研究常常涉及到大数量、有限的血液体积的队列样品，因此如何在较低成本下准确从较少量的样品中检测维生素B1具有重要实践意义。维生素B1在血液中的存在主要是以硫胺素二磷酸TDP为主要成分，约占80％-90％的总B1浓度。根据专利技术人的调研发现目前国内已申报的专利中，针对B1三种标志物全水平的检测仅为申请人前期所申报的专利(申请号：201920772914.8)。然而该专利所存在为其对于样品的采集、储存、运输条件要求较高。干本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤I、采集装置的准备；/n步骤II、干血片样品样品的采集及保存处理；/n步骤III、干血片样品前处理中的目标化合物的萃取；/n步骤IV、干血片样品的衍生化、pH调节及高效液相UPLC分析；/n步骤V、高效液相UPLC的分析与定量；/n其中，所述的采集装置的准备为经过剪裁成5cm×2cm尺寸的、无污染的Whatman

【技术特征摘要】
1.一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤I、采集装置的准备；
步骤II、干血片样品样品的采集及保存处理；
步骤III、干血片样品前处理中的目标化合物的萃取；
步骤IV、干血片样品的衍生化、pH调节及高效液相UPLC分析；
步骤V、高效液相UPLC的分析与定量；
其中，所述的采集装置的准备为经过剪裁成5cm×2cm尺寸的、无污染的WhatmanTM公司的903型号的纤维素纸。


2.根据权利要求1所述的一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，所述步骤I中样品的预处理操作为：经过10mg/mL抗氧化剂2,6-二丁基对甲酚(BHT)的预涂层并阴凉干燥后的装置。


3.根据权利要求1所述的一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，所述步骤II中样品的保存处理操作为：待新鲜指间、足跟、或者经静脉采集的抗凝血样滴到上述903滤纸上后，在避光、室温(23～28℃)、湿度45～65％的环境中干燥约3h。而后将干燥的干血滤纸片样品以及经过活化的干燥剂置于铝箔自封袋中，排去自封袋中主要的空气，并封装铝箔袋。封装保存的样品可在室温保存1～3天、或≤-20℃冰箱中>6个月。


4.根据权利要求1所述的一种检测干血滤纸片样品中维生素B1三种标志物的方法，其特征在于，所述步骤III中样品的前处理中的目标化合物的萃取操作为：使用打孔器在滤纸片的血斑处打孔6.35mm圆形干血片，于样品添加10％三氯乙酸进行萃取，待萃取后使用经水饱和的甲基叔丁基醚清洗。

【专利技术属性】
技术研发人员：黄以超，陈达，刘戈，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44