高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法技术

本发明专利技术提供一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，其利用酸及非胃蛋白酶(non‑pepsin protease)水解鸡胸骨及粗滤后，所述滤液无需经离心回溶处理，直接进行加盐处理及精滤处理，以在较短的制程时间内获得高纯度未变性胶原蛋白，其中高纯度未变性胶原蛋白的总胶原蛋白含量为60％以上，且含有至少50％的未变性第二型胶原蛋白。

High purity non denatured collagen and its manufacturing method

【技术实现步骤摘要】
高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法
本专利技术关于一种胶原蛋白及其制造方法，特别是一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，其所述高纯度未变性胶原蛋白具有高未变性第二型胶原蛋白含量。
技术介绍
第二型胶原蛋白为软骨的主要结构成分，并与其他型胶原蛋白和蛋白多糖等成分并存于软骨中，以支撑组织并具有吸收冲力的功效。由于第二型胶原蛋白具有良好的生物相容性，故常被应用于食品、医疗和美容等领域。近来研究指出未变性第二型胶原蛋白(UndenaturedtypeIIcollagen)对类风湿性关节炎具有显著的疗效。虽然市面上已有许多未变性第二型胶原蛋白的产品，但其在不同酸碱度溶液中的溶解度不佳、未变性第二型胶原蛋白的含量低且产品中的总胶原蛋白含量也低。此外，在常见的制程中，常因加热或化学处理(例如酶处理)造成未变性第二型胶原蛋白降解而失去活性。再者，常见制程所使用的酶或其他试剂通常为非食品级，造成所制得的胶原蛋白产品的应用领域受到限制，制程时间也较长。特别是，常用于纯化胶原蛋白的胃蛋白酶，由于其来源复杂且不明确，目前在国内并未列入食品级酶中。因此，目前亟需提出一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，以改善上述种种问题。
技术实现思路
本专利技术的一个方式在于提供一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其利用可制得高总胶原蛋白含量(相当于纯度)及高未变性第二型胶原蛋白含量(相当于活性)的胶原蛋白。本专利技术的另一个方式在于提供一种高纯度未变性胶原蛋白，其使用上述的制造方法所制得。根据本专利技术的上述方式，提出一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法。在一些实施例中，先提供鸡胸骨。接着，对鸡胸骨进行酸水解，以形成酸水解物。所述酸处理在0℃至7℃条件下进行至少30天。然后，将非胃蛋白酶加入酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物。所述非胃蛋白酶与鸡胸骨的重量比为1：60至1：100。之后，对所述酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液。然后，对所述滤液进行加盐处理，以形成盐液。在所述加盐处理后，使用不同孔径的陶瓷膜，直接对盐液进行精滤处理，以获得所述高纯度未变性胶原蛋白。胶原蛋白中包含至少50％的未变性第二型胶原蛋白。依据本专利技术的一些实施例，在获得胶原蛋白后，可对胶原蛋白进行低温干燥处理。依据本专利技术的一些实施例，所述酸水解的步骤使用pH1.5至2的醋酸来进行。依据本专利技术的一些实施例，所述酶水解在12℃至36℃条件下进行8至72小时。依据本专利技术的一些实施例，所述加盐处理的盐浓度为0.7M至1.1M。依据本专利技术的一些实施例，所述精滤处理包含将盐液稀释为至少300公升的稀释液，以及以每分钟30公升至50公升的流速，将所述盐液通过复数个陶瓷膜，以去除分子量1至300kD的杂质。依据本专利技术的一些实施例，所述精滤处理包含进行上述稀释步骤及上述通过复数个陶瓷膜的步骤的复数个循环达4至8天。依据本专利技术的一些实施例，所述制造方法不包括在上述精滤处理前进行离心沉淀处理和回溶处理。根据本专利技术的上述方式，提出一种高纯度未变性胶原蛋白。在一些实施例中，所述高纯度未变性胶原蛋白使用上述制造方法所制得。所述高纯度未变性胶原蛋白的总胶原蛋白含量为至少60％，且至少50％的高纯度未变性胶原蛋白为未变性第二型胶原蛋白。依据本专利技术的一些实施例，所述高纯度未变性胶原蛋白中的灰分为少于1.5％。附图说明为让本专利技术的上述和其他目的、特征、优点与实施例更明显易懂，所附的附图的详细说明如下：图1是表示依据本专利技术的一些实施例所述的高纯度未变性胶原蛋白的制造方法的示意流程图。其中，附图符号的说明如下：100：方法；110：提鸡胸骨；120：酸水解鸡胸骨，以形成酸水解物；130：将非胃蛋白酶加入酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物；140：对酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液；150：对滤液进行加盐处理，以形成盐液；160：在加盐处理后，直接对盐液进行精滤处理，以获得高纯度未变性胶原蛋白。具体实施方式本专利技术的目的在于提供一种高纯度未变性胶原蛋白及其制造方法，且特别是高纯度未变性食品级胶原蛋白的制造方法，其利用酸及非胃蛋白酶(non-pepsinprotease)水解鸡胸骨并经粗滤后，无需离心滤液和回溶沉淀物，直接对滤液进行加盐处理及精滤处理，以在较短的制程时间内获得高纯度未变性胶原蛋白。本专利技术此处所称的食品级胶原蛋白使用食品级试剂所制得。所述食品级的规格以取得台湾卫生福利部食品药物管理署的“食品添加物许可证”而订之。以下请参考图1，其表示依据本专利技术的一些实施例所述的高纯度未变性胶原蛋白的制造方法的示意流程图100。如图1所示，在方法100的步骤110中，先提供鸡胸骨。在一个实施例中，提供至少20公斤的鸡胸骨。在一个较佳的实施例中，鸡胸骨的使用量为20公斤至40公斤。一般而言，由于鸡胸骨中的第二型胶原蛋白含量较高，为鸡胸骨总蛋白质的45重量％至70重量％，故鸡胸骨适用于生产未变性第二型胶原蛋白。在一些实施例中，如步骤110所述，鸡胸骨已先经去肉、切碎及清洗等处理。在一些例子中，所述清洗处理可例如使用乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraaceticacid；EDTA)来进行。接下来，如步骤120所示，对鸡胸骨进行酸水解，以形成酸水解物。所述酸水解可在0℃至7℃条件下进行至少30天。在一些实施例中，所述酸水解使用pH1.5至2的醋酸来进行。倘若酸水解的时间不足，会造成后续的酶水解效率不佳。再者，由于酸水解进行时间较长，倘若温度过高则容易使鸡胸骨变质，从而降低未变性第二型胶原蛋白的含量。然后，如步骤130所示，将非胃蛋白酶加入酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物。在一个例子中，所述酶水解是在pH1.9至6条件下进行。在一个实施例中，酶水解在12℃至36℃条件下进行8至72小时。若超过上述pH、温度或时间范围，则酶水解效果不佳。在一个实施例中，步骤120和步骤130之间还可包含调整pH值的步骤，以使酸水解物的pH值可落于酶水解步骤的适当范围。在一些实施例中，非胃蛋白酶与鸡胸骨的重量比为1：60至1：100。具体而言，本专利技术使用的非胃蛋白酶为食品级酶，其可包括但不限于蛋白酶M(proteaseM)、木瓜酶、菠萝酶、其他适合的酶，或上述酶的组合。在一些实施例中，本专利技术不包括使用胃蛋白酶进行酶水解。在一个具体例中，酶水解在醋酸溶液中进行。之后，如步骤140所示，对上述酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液。所述粗滤处理可例如使用不同孔径的网筛，将酶水解物中残余的碎鸡骨等固体杂质滤除，并保留滤液进行后续的制程步骤。在另一些实施例中，可使用例如60目(mesh)、300目、500目等不同孔径的网筛进行粗滤处理。本专利技术此处对网筛的孔径及数量并无特别限制，可依照酶水解物的状况而调整。接下来，如步骤150所示，对滤液进行加盐处理，以形成盐液。在一些实施例中，所述加盐处理在0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其特征在于，包含：/n提供鸡胸骨；/n在0℃至7℃条件下酸水解所述鸡胸骨达至少30天，以形成酸水解物；/n将非胃蛋白酶加入所述酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物，该非胃蛋白酶与该鸡胸骨的重量比为1：60至1：100；/n对所述酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液；/n对所述滤液进行加盐处理，以形成盐液；以及/n在所述加盐处理后，直接对所述盐液进行精滤处理，以获得胶原蛋白，/n所述胶原蛋白中包含至少50％的未变性第二型胶原蛋白。/n

【技术特征摘要】
20180629 TW 1071226681.一种高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其特征在于，包含：
提供鸡胸骨；
在0℃至7℃条件下酸水解所述鸡胸骨达至少30天，以形成酸水解物；
将非胃蛋白酶加入所述酸水解物中进行酶水解，以形成酶水解物，该非胃蛋白酶与该鸡胸骨的重量比为1：60至1：100；
对所述酶水解物进行粗滤处理，以形成滤液；
对所述滤液进行加盐处理，以形成盐液；以及
在所述加盐处理后，直接对所述盐液进行精滤处理，以获得胶原蛋白，
所述胶原蛋白中包含至少50％的未变性第二型胶原蛋白。


2.如权利要求1所述的高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其特征在于，还包含：
在获得所述胶原蛋白后，对该胶原蛋白进行低温干燥处理。


3.如权利要求1所述的高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其特征在于，所述酸水解的步骤使用pH1.5至2的醋酸来进行。


4.如权利要求1所述的高纯度未变性胶原蛋白的制造方法，其特征在于，所述酶水解在12℃至36℃条件下进行8至72小时。


5.如权利要求1所述的高纯...

【专利技术属性】
技术研发人员：李杰翰，洪雅萍，廖耿毅，许智尧，林美吟，苏育森，萧述文，
申请(专利权)人：台盐实业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71