一种测定LCZ696有关物质的方法技术

本发明专利技术提供一种用HPLC法测定LCZ696有关物质的方法，属于医药化工领域；所述方法可用于测定LCZ696有关物质的含量，所述方法的特征是采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱，采用三氟乙酸和乙腈为流动相进行梯度洗脱，在反相色谱系统中对LCZ696有关物质进行分离测定。本发明专利技术提供的分析方法能够有效分离测定LCZ696有关物质，具有分离度好，灵敏度高，操作方便等优点。

A method for the determination of lcz696 related substances

【技术实现步骤摘要】
一种测定LCZ696有关物质的方法
本专利技术属于医药化工领域，更具体地涉及一种用HPLC方法测定LCZ696有关物质的方法。
技术介绍
LCZ696化学名为六(4-{[(1S,3R)-1-([1,1'-联苯基]-4-甲基)-4-乙氧基-3-甲基-4-氧代丁基]氨基}-4-氧代丁酸)六(N-戊酰基-N-{[2'-(1H-四氮唑-5-基)[1,1'-联苯基]-4-基]甲基}-L-缬氨酸)—十八钠盐十五水合物。LCZ696是一种由sacubitril(代号SAC)与缬沙坦(代号VST)1:1形成的超分子钠盐复合物；其配制成供试液进样HPLC分析时会转变为2个部分，分别是VST和SAC，其中SAC部分有2个手性中心，存在3个异构体杂质，缬沙坦部分有1个手性中心，存在1个对映异构体，故目前采用别的色谱柱分离的难度比较大。LCZ696结构式如下：分子式：C288H330N36O48Na18·15H2O分子量：5747.96CAS号：936623-90-4为了保证药品的质量，保证用药的安全需要开发出一种有效检测LCZ696手性杂质的方法。
技术实现思路
专利技术概述现有技术中没有公开能够有效测定LCZ696有关物质的分析方法。本专利技术将提供一种采用HPLC测定LCZ696有关物质的分析方法。LCZ696因其本身化合物构造特点，存在多个手型中心，造成分离难度较大。本专利技术人通过多次的实验尝试，最终开发出一种有效测定LCZ696有关物质的分析方法。所述方法采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱，硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)，适合在反相流动相中使用。同时采用三氟乙酸和乙腈为流动相进行梯度洗脱，在反相色谱系统中对LCZ696原料药及有关物质进行分离测定。本专利技术所述的分析方法能够有效分离测定LCZ696原料药及有关物质，具有分离度好，灵敏度高，操作方便等优点。专利技术详述本专利技术的方法简单、快捷、准确地分离检测出LCZ696的2个主成分(SAC、VST)及相应4个光学异构体杂质(杂质A、杂质C是SAC的非对映异构体，杂质B是SAC的对映异构体；杂质E是VST的对映异构体)，各相关化合物的结构如下示：本专利技术提供的一种用HPLC测定LCZ696原料药及有关物质的方法，其特征是采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。本专利技术所述的多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱可以选自不同厂家的色谱柱，在一些实施例中所述色谱柱是CHIRALCELOJ-RH(4.6*150mm，5μm)。本专利技术所述有机溶剂可以是选自甲醇、乙醇、乙腈的至少一种，或加入一定比例甲酸、乙酸、三氟乙酸或磷酸的甲醇、乙醇、乙腈或其组合。在一些实施例中有机溶剂为乙腈，或加入0.05％～0.5％体积比三氟乙酸的乙腈。本专利技术所述的酸性溶剂可以是选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸和磷酸盐中的至少一种。在一些实施例中酸性溶剂为三氟乙酸。在一些实施例中，酸性溶剂为0.05％～0.5％体积比的三氟乙酸溶液。在一些实施例中，所述酸性溶剂为0.1％的体积比的三氟乙酸。在一些实施例中，A相和B相的体积比为1:20～10:1。在一些实施例中，本专利技术所述的分析方法是采用梯度洗脱程序进行的，其中梯度洗脱程序如下表1所示。表1在一些实施例中，本专利技术提供的一种用HPLC测定LCZ696有关物质的方法，其特征是：采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；流动相A相是0.05％～0.5％(体积比)三氟乙酸溶液，其中0.05％～0.5％(体积比)三氟乙酸溶液与乙腈的体积比是约1:20～10:1；B相是乙腈，含0.05％～0.5％(体积比)三氟乙酸；其中梯度程序如上表1所示；色谱柱柱温：约20℃～40℃；流速：约0.5mL/min～1.5mL/min；检测器：DAD检测器，检测波长约210nm～280nm。在一些实施例中，本专利技术提供的一种用HPLC测LCZ696有关物质的方法，其特征是：采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；流动相A相是0.1％(体积比)三氟乙酸溶液；B相是乙腈，含0.1％(体积比)的三氟乙酸；梯度洗脱程序如上表1所示；色谱柱柱温：约25℃；流速：约0.7mL/min；检测器：DAD检测器，检测波长约254nm。本专利技术所述的分析方法，其中，待检测的供试品溶液可通过以下方法配制：取LCZ696供试品约50mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用稀释剂使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。在一些实施例中，供试品溶液的进样量可以是1～100μL；在一些实施例中供试品溶液的进样量可以是15μL。术语定义术语“峰纯度”是指HPLC检测中，用于判断某一色谱峰是否只是由一个物质引起的一个考察参数，一般认为峰纯度在0.990～1.000之间即认为所考察的某一色谱峰纯净，该色谱峰是某单一物质的色谱峰。术语“不对称因子”是指在HPLC检测中，用于考察峰型对称性的参数，体现色谱柱效能；在液相色谱法中，当不对称因子在0.8～1.2之间认为峰型较好。术语“R”在HPLC检测中是指分离度，用于考察色谱峰之间分离情况的参数；通常两个峰型峰高相当的色谱峰，其分离度大于等于1.5则认为两峰的分离达到99％以上；R值越大分离情况越好。术语“约”在本专利技术中是指在所述数值的±10％以内。谱图中各出峰结构对应专利技术详述表格中所示化合物结构。附图说明图1实施例1空白溶液供试品溶液色谱图。图2实施例1供试加标溶液色谱图。图3实施例1供试品溶液色谱图。图4实施例2供试加标溶液色谱图。图5实施例3供试加标溶液色谱图。图6实施例4供试加标溶液色谱图。图7实施例5供试加标溶液色谱图。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例对本专利技术作进一步的详细说明。本专利技术所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本专利技术所描述的方法制备而得。本专利技术所使用的分析试剂及溶液符合中国药典2010版附录的要求，除另有说明外。实施例1色谱条件：色谱系统：美国Agilent1260型高效液相色谱系统及工作站；色谱柱：CHIRALCELOJ-RH(4.6×150mm，5μm)；检测器：DAD检测波长：254nm；流速：0.7ml/min柱温：25℃进样量：15μl运行时间：45min流动相配制：A相：0.1％(体积比)三氟乙酸溶液：取三氟乙酸1.0ml，加水1000ml稀释，摇匀，过0.2μm滤膜，超本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用HPLC测定LCZ696有关物质的方法，其特征是采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。/n

【技术特征摘要】
1.一种用HPLC测定LCZ696有关物质的方法，其特征是采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的色谱柱是CHIRALCELOJ-RH(4.6×150mm，5μm)。


3.根据权利要求1所述的方法，其中所述有机溶剂选自加入低于0.15％体积比的甲酸、乙酸、三氟乙酸或磷酸的甲醇、乙腈、乙醇及其组合溶剂。


4.根据权利要求1所述的方法，其中所述的酸性溶剂选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸或磷酸盐。


5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述方法是采用梯度洗脱程序进行的，其中梯度程序见下表：





6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征是：
采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱；
流动相A相是0.05％～0.5％的体积比的三氟乙酸溶液；
流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：张琛霞，饶万兵，刘国柱，郝鼓鼓，丘梅燕，刘湘林，赵蕾，朱丽娜，叶艳影，黄芳芳，
申请(专利权)人：广东东阳光药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44