一种用于检测CoxA16病毒的引物组合、试剂盒和PSR方法技术

技术编号:23016798 阅读:37 留言:0更新日期:2020-01-03 15:26
本发明专利技术公开了一种用于检测CoxA16病毒的引物组合、试剂盒和PSR方法,属于生物检测技术领域。本发明专利技术用引物组合对待测样品进行PSR反应,检测PSR反应产物,确定待测样品是否含有CoxA16病毒。本发明专利技术的方法操作简便,反应时间短,灵敏度高,特异性强,且与其他病毒之间无交叉扩增。

A primer combination, kit and PSR method for detection of CoxA16 virus

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测CoxA16病毒的引物组合、试剂盒和PSR方法
本专利技术涉及生物检测
,更具体的说是涉及一种用于检测CoxA16病毒的引物组合、试剂盒和PSR方法。
技术介绍
手足口病是由肠道病毒引起的传染病,主要通过粪口途径和密切接触传染,多发于三岁以下的婴幼儿,可引起手、足、口腔等部位的疱疹,重症患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜炎等并发症。引发手足口病的肠道病毒中最重要的是肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16),可引起严重的中枢神经系统病变,病死率高。CoxA16病毒的分离培养烦琐、费力、耗时比较长、不能满足早期诊断要求,因此不太适合用培养法鉴定这种病毒;另一种常规的检测方法为血清学检测,但灵敏度低,易产生假阳性结果;核酸检测方面主要以RT-PCR为主,但该方法对仪器要求较高,不利于在小型医院与现场检测环境下推广。因此,提供一种CoxA16病毒的检测方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术提供了一种用于检测CoxA16病毒的引物组合、试剂盒和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测CoxA16病毒的引物组合,其特征在于,具体引物序列如下:/nCA16-Ft2:5’-TTTGTTGAGCGTAAAGGCGGCATTTCTTTAGCCGTG CTGG-3’;SEQ ID NO.4;/nCA16-Bt2:5’-CGGCGGAAATGCGAGTTGTTTGGTTTGGCTACGAC AAATGTG-3’;SEQ ID NO.5;/nCA16-IF:5’-CATTGTAATGATGCTGACCA-3’;SEQ ID NO.6;/nCA16-IB:5’-GCGCTTTGATGCTGAATT-3’;SEQ ID NO.7。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测CoxA16病毒的引物组合,其特征在于,具体引物序列如下:
CA16-Ft2:5’-TTTGTTGAGCGTAAAGGCGGCATTTCTTTAGCCGTGCTGG-3’;SEQIDNO.4;
CA16-Bt2:5’-CGGCGGAAATGCGAGTTGTTTGGTTTGGCTACGACAAATGTG-3’;SEQIDNO.5;
CA16-IF:5’-CATTGTAATGATGCTGACCA-3’;SEQIDNO.6;
CA16-IB:5’-GCGCTTTGATGCTGAATT-3’;SEQIDNO.7。


2.含有权利要求1所述引物组合的试剂盒。


3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括双指示系统和阳性对照。


4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述双指示系统包括显色液和/或荧光染料;所述显色液包括0.08mM甲酚红和0.02mM苯酚红;所述荧光染料为SYBRGreenI或EveGreen。


5.一种用于检测CoxA16病毒的PSR方法,其特征在于,包括如下步骤:用权利要求1所述的引物组合对待测样品进行PSR反应,检测PSR反应产物,确定待测样品是否含有CoxA16病毒。


6.根据权利要求5所述的一种用于检测CoxA16病毒的PSR方法,其特征在于,所述PSR反应体系如下:12.5μl的2×RM,2.0μlDNA模板和1.0μlBstDNA聚合酶、1.0μlAMV逆转录酶,引物的CA16-Ft2、CA16-Bt2各1.6μM,CA16-IF、CA16-IB各0.8μM,...

【专利技术属性】
技术研发人员:王静慈颖张晓龙刘威张乔施琦孙筱霞
申请(专利权)人:中国检验检疫科学研究院
类型:发明
国别省市:北京;11

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