用于检测微小脲原体的引物组制造技术

本发明专利技术涉及病原体检测技术领域，公开了用于检测微小脲原体的引物组，包括微小脲原体尿素酶基因的引物组，正向引物的名称为UpS，反向引物的名称为UpAS。本发明专利技术的引物组可专用于检测微小脲原体，可准确检出微小脲原体，对检测设备的要求低，成本低，容易实现，检测灵敏度和准确性高，不会出现交叉反应。

Primer set for detection of Ureaplasma minimus

【技术实现步骤摘要】
用于检测微小脲原体的引物组
本专利技术涉及病原体检测
，具体涉及用于检测微小脲原体的引物组。
技术介绍
脲原体(Ureaplasma)是从人体中分离的能自身繁殖的13种支原体之一，属硬壁菌门柔膜体纲支原体目支原体科脲原体属。脲原体介于病毒和细菌之间，是在人工培养基上能繁殖的最小的原核细胞型微生物，无细胞壁，能自我复制，呈球杆状，具高度多形性。脲原体根据分子生物学特征分为2个生物群和14个血清型，两个生物群包括微小脲原体(Ureaplasmaparvum，Up)和解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum，Uu)，14个血清型中，基因组较小的血清型1、3、6、14属于微小脲原体，占脲原体感染的90％～92％；基因组较大的血清型2、4、5、8～13属于解脲脲原体，占脲原体感染的8％～10％。微小脲原体和解脲脲原体在人群中的分布及对药物的敏感性均存在差异，常用的脲原体血清学分型方法操作比较繁琐，对设备的要求较高，且易出现交叉反应，结果难以准确判断。因此，为了克服现有技术的缺点和不足，本专利技术欲提供一种用于准确检测微小脲原体的引物组，以避免出现交叉反应，以提高检测结果的准确性。
技术实现思路
基于以上问题，本专利技术提供一种用于检测微小脲原体的引物组，该引物组可准确检测出微小脲原体，灵敏度和准确性高，对设备要求低，实用性强。为解决以上技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：用于检测微小脲原体的引物组，包括微小脲原体尿素酶基因的引物组，所述引物组包括正向引物UpS和反向引物UpAS，所述UpS和UpAS的序列如下：与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术的引物组可专用于检测微小脲原体，可准确检出微小脲原体，对检测设备的要求低，成本低，容易实现，检测灵敏度和准确性高，不会出现交叉反应。附图说明图1为本专利技术的实施例中用微小脲原体尿素酶基因的引物组检测得到的电泳结果图；图2为本专利技术的实施例中用解脲脲原体的尿素酶基因的引物组检测得到的电泳结果图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。实施例：用于检测微小脲原体的引物组，包括微小脲原体尿素酶基因的引物组，所述引物组包括正向引物UpS和反向引物UpAS，所述UpS和UpAS的序列如下：本实施例还选择了一组用于检测解脲脲原体的引物组，引物组包括正向引物UuS和反向引物UuAS，检测使用的引物组均为解脲脲原体的尿素酶基因的引物，所述UuS和UuAS的序列如下：本实施例选择了一份同时含有微小脲原体和解脲脲原体的临床样品，并将样品平均分为两组，分别为A组和B组，随后利用上述微小脲原体引物组检测A组样品，利用解脲脲原体引物组检测B组样品，检测方法包括以下步骤：S1：分别提取A组和B组的样品DNA使用TIANampGenomicDNAKit试剂盒提取A组和B组的样品DNA，此处的试剂盒可以是任意一种用于提取核酸的试剂盒；S2：对样品DNA进行PCR扩增PCR扩增体系如下所示：上述specificprimer-as为UuAS或UpAS，specificprimer-s为UuS或UpS，本实施例分别配置两组上述PCR反应体系，分别用于检测样品中的微小脲原体和解脲脲原体，PCR扩增的反应程序如下：94℃预变性3min；94℃变性15s，60℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环；最后72℃延伸7min；S3：用琼脂糖凝胶电泳检测扩增条带步骤S2中的PCR扩增结束之后，按下列比例配制上样液：上述上样液配制完成之后，进行2％的琼脂糖凝胶电泳，并观察目的条带的位置和亮度，琼脂糖凝胶电泳的电压为100V，电泳时间为18min。利用上述两组引物组分别检测之后的结果见附图1和附图2，附图1为用微小脲原体尿素酶基因的引物组检测得到的结果图，附图2为用解脲脲原体引物组检测的结果图，从图中可看出图1中的检测结果的条带均很清晰，边界清楚，不存在拖带和混带的情况。如上即为本专利技术的实施例。上述实施例以及实施例中的具体参数仅是为了清楚表述专利技术验证过程，并非用以限制本专利技术的专利保护范围，本专利技术的专利保护范围仍然以其权利要求书为准，凡是运用本专利技术的说明书及附图内容所作的等同结构变化，同理均应包含在本专利技术的保护范围内。序列表<110>刘君<120>用于检测微小脲原体的引物组<130>20190910<160>2<170>SIPOSequenceListing1.0<210>1<211>22<212>DNA<213>人工序列(ArtificialSequence)<400>1caggatcatcaagtcaatttag22<210>2<211>23<212>DNA<213>人工序列(ArtificialSequence)<400>2gataaaaaggggaacattatgtt23本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测微小脲原体的引物组，其特征在于，包括微小脲原体尿素酶基因的引物组，所述引物组包括正向引物UpS和反向引物UpAS，所述UpS和UpAS的序列如下：/n

【技术特征摘要】
1.用于检测微小脲原体的引物组，其特征在于，包括微小脲原体尿素酶基因的引物组，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘君，
申请(专利权)人：刘君，
类型：发明
国别省市：海南;46