【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结构特异性识别蛋白1(SSRP1)核酸分子用来控制昆虫害虫优先权要求本申请要求于2017年5月18日提交的美国临时专利申请序列号62/508,276的优先权权益，其公开内容通过引用全部并入本文中。以电子方式提交的序列表的引用序列表的正式副本通过EFS-Web以文件名为SeqList的ASCII格式的序列表的形式以电子方式提交，该文件于2018年5月11日修订，大小为28千字节(SEQIDNO:1-16)，并且与说明书同时提交。ACSII格式文件中包含的序列表是本说明书的一部分，并通过引用将其全部并入本文中。
本专利技术总体涉及对由昆虫害虫(例如，花粉甲虫)引起的植物损害的遗传控制。在特定的实施方案中，本专利技术涉及对靶编码和非编码多核苷酸的鉴定，以及利用重组DNA技术转录后阻遏或抑制靶编码多核苷酸和非编码多核苷酸在昆虫害虫细胞中的表达，从而为植物提供保护作用。
技术介绍
欧洲花粉甲虫(pollenbeetle，PB)是对油菜有严重危害的害虫，幼虫和成虫均以花和花粉为食。花粉甲虫对作物的损害可造成20％至40％的产量损失。主要的害虫物种为油菜露尾甲(Meligethesaeneus)。目前，对油菜中花粉甲虫的控制主要依赖于拟除虫菊酯，鉴于这类物质的环境和监管状况，预料其很快就会遭到淘汰。另外，已报道过花粉甲虫对现有化学杀虫剂的抗性。因此，迫切需要具有新颖作用机制的环境友好型花粉甲虫控制方案。在自然界中，花粉甲虫在土壤中或落叶层下以成虫过冬。在春季，成虫从冬眠中出现，并开始以杂草的...
【技术保护点】
1.分离的核酸分子，其包含至少一个与异源启动子可操作地连接的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含选自以下的核苷酸序列：/nSEQ ID NO:1；SEQ ID NO:1的互补序列或反向互补序列；包含SEQ ID NO:2-3的来自油菜露尾甲(Meligethes aeneus Fabricius)的内源性编码多核苷酸的至少15个连续核苷酸的片段；包含SEQ ID NO:2-3的来自油菜露尾甲的内源性编码多核苷酸的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列或反向互补序列；包含SEQ ID NO:4的露尾甲属(Meligethes)生物体的天然编码序列；包含SEQ ID NO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的互补序列或反向互补序列；包含SEQ ID NO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的至少15个连续核苷酸的片段；包含SEQ ID NO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列或反向互补序列。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170518 US 62/508,2761.分离的核酸分子，其包含至少一个与异源启动子可操作地连接的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含选自以下的核苷酸序列：
SEQIDNO:1；SEQIDNO:1的互补序列或反向互补序列；包含SEQIDNO:2-3的来自油菜露尾甲(MeligethesaeneusFabricius)的内源性编码多核苷酸的至少15个连续核苷酸的片段；包含SEQIDNO:2-3的来自油菜露尾甲的内源性编码多核苷酸的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列或反向互补序列；包含SEQIDNO:4的露尾甲属(Meligethes)生物体的天然编码序列；包含SEQIDNO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的互补序列或反向互补序列；包含SEQIDNO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的至少15个连续核苷酸的片段；包含SEQIDNO:4的露尾甲属生物体的天然编码序列的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列或反向互补序列。
2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述核苷酸序列选自：SEQIDNO:2-4；SEQIDNO:2-4中任一个的至少15个连续核苷酸的片段；以及前述的互补序列和反向互补序列。
3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述分子是载体。
4.分离的核酸分子，其特征为与异源启动子可操作地连接的多核苷酸，其中所述多核苷酸为：SEQIDNO:4；SEQIDNO:4的互补序列，或SEQIDNO:4的反向互补序列。
5.由权利要求1所述的核酸分子编码的核糖核酸(RNA)分子，其中所述RNA分子包含由所述核苷酸序列编码的多核糖核苷酸。
6.根据权利要求5所述的RNA分子，其中所述分子是双链核糖核酸(dsRNA)分子。
7.根据权利要求6所述的dsRNA分子，其中使所述多核糖核苷酸与昆虫害虫接触抑制与所述多核糖核苷酸特异性互补的内源性核酸分子的表达。
8.根据权利要求7所述的dsRNA分子，其中使所述多核糖核苷酸与所述昆虫害虫接触杀死或抑制所述害虫的生长和/或进食。
9.根据权利要求6所述的dsRNA，其包含第一、第二和第三多核糖核苷酸，其中所述第一多核糖核苷酸由所述多核苷酸转录，其中所述第三多核糖核苷酸通过所述第二多核糖核苷酸连接至所述第一多核糖核苷酸，并且其中所述第三多核糖核苷酸基本上是所述第一多核糖核苷酸的反向互补序列，使得所述第一和所述第三多核糖核苷酸在转录成核糖核酸时杂交以形成dsRNA。
10.根据权利要求6所述的dsRNA，其中所述分子包含第一和第二多核糖核苷酸，其中所述第一多核糖核苷酸由所述多核苷酸转录，其中所述第三多核糖核苷酸是与所述第二多核糖核苷酸分开的链，并且其中所述第一和所述第二多核糖核苷酸杂交以形成所述dsRNA。
11.根据权利要求3所述的载体，其中所述载体是植物转化载体，并且其中所述异源启动子在植物细胞中是功能性的。
12.包含权利要求1所述的核酸分子的细胞。
13.根据权利要求12所述的细胞，其中所述细胞是原核细胞。
14.根据权利要求12所述的细胞，其中所述细胞是真核细胞。
15.根据权利要求14所述的细胞，其中所述细胞是植物细胞。
16.包含权利要求1所述的核酸分子的植物。
17.根据权利要求16所述的植物的一部分，其中所述植物部分包含所述核酸分子。
18.根据权利要求17所述的植物部分，其中所述植物部分是种子。
19.由权利要求16所述的植物生产的食品产品或商品产品，其中所述产品包含可检测量的所述多核苷酸。
20.根据权利要求16所述的植物，其中所述多核苷酸在所述植物中表达为双链核糖核酸(dsRNA)分子。
21.根据权利要求15所述的植物细胞，其中所述细胞是来自芸苔属(Brassica)植物物种的细胞。
22.根据权利要求16所述的植物，其中所述植物是芸苔属植物物种。
23.根据权利要求16所述的植物，其中所述多核苷酸在所述植物中表达为双链核糖核酸(dsRNA)分子，并且当昆虫害虫摄入所述植物的一部分时，所述dsRNA分子抑制与所述RNA分子特异性互补的内源性多核苷酸的表达。
24.根据权利要求1所述的核酸分子，其还包含与异源启动子可操作地连接的至少一个另外的多核苷酸，其中所述另外的多核苷酸编码RNA分子。
25.根据权利要求24所述的核酸分子，其中所述分子是植物转化载体，并且其中所述异源启动子在植物细胞中是功能性的。
26.控制昆虫害虫种群的方法，所述方法包括提供包含核糖核酸(RNA)分子的试剂，其在与所述昆虫害虫接触时起作用以抑制所述害虫内的生物学功能，其中所述RNA分子包含与选自以下的靶多核糖核苷酸可特异性杂交的多核糖核苷酸：SEQIDNO:12-15；SEQIDNO:12-15中任一个的互补序列；SEQIDNO:12-15中任一个的反向互补序列；SEQIDNO:13-15中任一个的至少15个连续核苷酸的片段；SEQIDNO:13-15中任一个的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列；SEQIDNO:13-15中任一个的至少15个连续核苷酸的片段的反向互补序列；包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物；包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物的互补序列；包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物的反向互补序列；包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物的至少15个连续核苷酸的片段；包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物的至少15个连续核苷酸的片段的互补序列；以及包含SEQIDNO:2-3的PBssrp1编码多核苷酸的转录物的至少15个连续核苷酸的片段的反向互补序列。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述RNA分子是双链RNA(dsRNA)分子。
28.根据权利要求27所述的方法，其中提供所述试剂包括使所述昆虫害虫与包含所述试剂的可喷雾组合物接触或使所述昆虫害虫进食包含所述试剂的RNA诱饵。
29.根据权利要求27所述的方法，其中提供所述试剂为表达所述dsRNA分子的转基因植物细胞。
30.控制昆虫害虫种群的方法，所述方法包括：
提供包含第一和第二多核糖核苷酸的试剂，其在与昆虫害虫接触时起作用以抑制所述昆虫害虫内的生物学功能，其中所述第一多核糖核苷酸包含与选自SEQIDNO:13-15的多核糖核苷酸的约15至约30个连续核苷酸具有约90...
【专利技术属性】
技术研发人员：肯尼·E·纳瓦，耿朝现，梅根·弗雷，普莱姆钱德·甘德拉，安德烈亚斯·维尔辛斯卡斯，凯瑟琳·D·阳，阿比拉什·巴拉钱德兰，艾琳·克诺尔，雷纳·费舍尔，
申请(专利权)人：美国陶氏益农公司，弗劳恩霍夫应用研究促进协会，
类型：发明
国别省市：美国;US
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