一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，将新鲜蒜瓣清洗干净并灭菌，然后粉碎，然后用丙酮萃取，蒸发浓缩得到大蒜提取物浸膏，然后用去离子水溶解浸膏得到大蒜提取物；将茼蒿茎叶阴干后用研磨机粉碎得到茼蒿粉末，称取茼蒿粉末，用乙醇溶液超声波提取三次，合并萃取液，蒸发蒸干成膏状物，用无菌蒸馏水溶解浸膏，用去离子水溶解浸膏，得到茼蒿提取物；大蒜提取物和茼蒿提取物按比例混合得到大蒜、茼蒿复合提取物。本发明专利技术的大蒜、茼蒿复合提取物对苦瓜枯萎病具有较好的防治作用。

A compound plant extract and its preparation method for inhibiting absinthe wilt

【技术实现步骤摘要】
一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物及其制备方法
本专利技术涉及一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物及其制备方法，具体涉及大蒜提取物、茼蒿提取物及其用于抑制苦瓜枯萎病的应用。
技术介绍
在苦瓜生产中，由于多年连作导致土壤环境恶化，连作障碍日益严重，土传病害随之加重。苦瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌苦瓜专化型(FusariumoxysporumSchl.F.sp.momordicae)引起的一种典型的土传病害，在中国各苦瓜种植区均有发生，可造成苦瓜干枯萎蔫，最后导致全株死亡。据报道，苦瓜枯萎病一般发病率为15％～25％，严重时高达60％～80％，病害流行时田间出现大量死藤，严重影响了苦瓜的产量和品质。针对这种病害，生产上主要使用的化学药剂有异菌脲、甲基硫菌灵、五氯硝基苯、多菌灵、恶霉灵、百菌清等。由于苦瓜枯萎病菌生长快、适宜度高，连续使用同一种化学药剂，极易使其对农药产生抗药性。且这些化学杀菌剂难降解、易残留，长期使用会造成环境污染和食品安全问题。随着人们对环保意识的日益重视，对环境友好、无毒无害的植物源杀菌剂受到了大众的追捧。从植物或植物产品中提取和分离控制植物病原菌的生物活性物质，是开发、研制新型农药的有效途径之一。我国是大蒜生产大国，大蒜产量、规模和种植面积均居世界第一，其原料供应充足，在开发植物源杀菌剂方面有着良好的资源优势。茼蒿对栽培环境要求不高，露地或大棚栽培均可，生长周期短。植物杀菌剂对环境无污染、经济高效、无毒可靠、环境友好，是未来研究重要方向之一。为此，本专利技术选用原料充足的大蒜、茼蒿作为原料，制备一种经济高效、无毒可靠的植物杀菌剂，应用于苦瓜枯萎病的防治中。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种操作简便、安全省时的用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，采用天然植物提取，绿色环保，药效持久。为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用下述技术方案：一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，由大蒜提取物和茼蒿提取物混合而成。作为优选，大蒜提取物与茼蒿提取物的质量比为2：1-1：1。特别优选，大蒜提取物与茼蒿提取物的质量比为2：1。具体的，所述茼蒿提取物的浓度为1g·mL-1，大蒜提取物的浓度为1g·mL-1。一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物的制备方法，包括以下步骤：将新鲜蒜瓣清洗干净并灭菌，然后粉碎，然后用丙酮萃取，蒸发浓缩得到大蒜提取物浸膏，然后用去离子水溶解浸膏得到大蒜提取物；将茼蒿茎叶阴干后用研磨机粉碎得到茼蒿粉末，称取茼蒿粉末，用乙醇溶液超声波提取三次，合并萃取液，蒸发蒸干成膏状物，用无菌蒸馏水溶解浸膏，用去离子水溶解浸膏，得到茼蒿提取物；大蒜提取物和茼蒿提取物按比例混合得到大蒜、茼蒿复合提取物。更具体的，制备步骤如下：将新鲜蒜瓣浸入75％乙醇中2min后无菌水冲洗3次，用吸水纸将表面水分吸干，将蒜瓣通过真空冷冻干燥后研成粉末，粉碎过40目筛；称取500g大蒜粉末，用丙酮震荡提取3次，每次20h，摇床速度设定为140r·min-1，合并3次萃取液后离心，取上清液，滤液经冷冻干燥机抽干。由旋转蒸发仪浓缩，得大蒜提取物浸膏；用无菌蒸馏水溶解浸膏，用适量去离子水溶解浸膏，并过0.22μm滤膜过滤，并定容至为1g·mL-1，置于4℃冰箱保存待用；将茼蒿茎叶阴干后用研磨机粉碎得到茼蒿粉末，称取5g茼蒿粉末于三角瓶中，按料液比1:10往瓶中加入浓度为75％的乙醇溶液45℃条件下超声波提取三次，合并萃取液，旋转蒸发蒸干成膏状物，用无菌蒸馏水溶解浸膏，用适量去离子水溶解浸膏，并过0.22μm滤膜过滤，并定容至为1g·mL-1，置于4℃冰箱保存待用；量取浓度1g·mL-1的茼蒿提取物和浓度1g·mL-1的大蒜提取物，按体积比1：1混合，得到1g·mL-1的大蒜、茼蒿复合提取物。本专利技术采用生长速率法测定大蒜提取物、茼蒿提取物、大蒜、茼蒿复合提取物对尖孢镰刀菌苦瓜专化型菌丝生长、孢子萌发的抑制效果，并近一步开展大蒜、茼蒿提取物防治苦瓜枯萎病的苗期试验。试验表明大蒜提取物和茼蒿提取物均对尖孢镰刀菌有抑制作用，但是大蒜提取物和茼蒿提取物混合具有协调增效作用，二者混合得到大蒜、茼蒿复合提取物的药效优于单一品种，而且药效持久性得到了明显改善，本专利技术操作简单，对环境无污染、经济高效、无毒可靠，对苦瓜枯萎病具有较好的防治作用。附图说明图1是0.1g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌苦瓜专化型菌丝生长的影响；图中A：未施入提取物；B：大蒜、茼蒿复合提取物；C：茼蒿提取物；D：大蒜提取物。图2是0.1g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌菌丝生长的影响。图3是0.05g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌菌丝生长的影响。图4是0.025g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌菌丝生长的影响。图5是0.1g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响。图6是0.05g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响。图7是0.025g·mL-1浓度下提取物对尖孢镰刀菌孢子萌发的影响。图8是施入大蒜、茼蒿复合提取物对苦瓜幼苗的影响的田间试验结果。图9是是施入大蒜、茼蒿复合提取物对苦瓜幼苗叶子的影响。图8和图9中：A:施入大蒜、茼蒿复合提取物B：未施入提取物。图10是未施入提取物的苦瓜幼苗叶发病后的显微镜观察照片。图11是施入大蒜茼蒿复合提取物的未发病的苦瓜幼苗显微镜观察照片。图12供试材料接种鉴定结果。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进一步详细说明。将新鲜蒜瓣浸入75％乙醇中2min后无菌水冲洗3次，用吸水纸将表面水分吸干，将蒜瓣通过真空冷冻干燥后研成粉末，粉碎过40目筛；称取500g大蒜粉末，用丙酮震荡提取3次，每次20h，摇床速度设定为140r·min-1，合并3次萃取液后离心，取上清液，滤液经冷冻干燥机抽干。由旋转蒸发仪浓缩，得大蒜提取物浸膏。用无菌蒸馏水溶解浸膏，用适量去离子水溶解浸膏，并过0.22μm滤膜过滤，并定容至为1g·mL-1，置于4℃冰箱保存待用，得到大蒜提取物。将茼蒿茎叶阴干后用研磨机粉碎得到茼蒿粉末，称取5g茼蒿粉末于三角瓶中，按料液比1:10往瓶中加入浓度为75％的乙醇溶液45℃条件下超声波提取三次，合并萃取液，旋转蒸发蒸干成膏状物，用无菌蒸馏水溶解浸膏，用适量去离子水溶解浸膏，并过0.22μm滤膜过滤，并定容至为1g·mL-1，置于4℃冰箱保存待用，得到茼蒿提取物。量取浓度1g·mL-1的茼蒿提取物和浓度1g·mL-1的大蒜提取物，按质量比1：1混合，得到1g·mL-1的大蒜、茼蒿复合提取物。1、大蒜、茼蒿提取物对尖孢镰刀菌菌丝生长的活性测定带药培养基的制备：将经滤膜过滤灭菌提取物放入已灭菌的试管中，加入PDA培养基，摇匀后倒入灭菌培养皿种，配成浓度为0.1、0.05、0.025g·mL-1固体带药培养基。采用生长速率法测定提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，其特征是：由大蒜提取物和茼蒿提取物混合而成。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，其特征是：由大蒜提取物和茼蒿提取物混合而成。


2.根据权利要求1所述的用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，其特征是：大蒜提取物与茼蒿提取物的质量比为2:1-1：1。


3.根据权利要求2所述的用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，其特征是：大蒜提取物与茼蒿提取物的质量比为2:1。


4.根据权利要求1所述的用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物，其特征是：所述茼蒿提取物的浓度为1g·mL-1，大蒜提取物的浓度为1g·mL-1。


5.一种权利要求1所述用于抑制苦瓜枯萎病复合型植物提取物的制备方法，其特征是包括以下步骤：
将新鲜蒜瓣清洗干净并灭菌，然后粉碎，然后用丙酮萃取，蒸发浓缩得到大蒜提取物浸膏，然后用去离子水溶解浸膏得到大蒜提取物；
将茼蒿茎叶阴干后用研磨机粉碎得到茼蒿粉末，称取茼蒿粉末，用乙醇溶液超声波提取三次，合并萃取液，蒸发蒸干成膏状物，用无菌蒸馏水溶解浸膏，用去离子水溶解浸膏，得到茼蒿提取物；
大蒜提取物和茼蒿提取物按比例混合得到大蒜、茼蒿复合...

【专利技术属性】
技术研发人员：关峰，万新建，张景云，石博，
申请(专利权)人：江西省农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：江西;36