鼠李糖脂发酵培养基及其制备方法、应用技术

本发明专利技术涉及一种鼠李糖脂发酵培养基及其制备方法、应用。其中，鼠李糖脂发酵培养基包括如下质量份的原料组分：尿素2‑3份、磷酸二氢钾6‑8份、氯化钾1‑2份、酵母1‑2份、镁盐0.1‑0.3份、钙盐0.01‑0.03份、碳源20‑100份、以及水900‑1100份，其中，所述镁盐选自硫酸镁、氯化镁和硝酸镁中的至少一种，所述钙盐选自氯化钙和碳酸钙中的至少一种，所述碳源选自植物油和甘油中的至少一种。上述鼠李糖脂发酵培养基中各原料组分配比合理，经实验验证，铜绿假单胞菌能够充分利用此培养基为基础原料制得产率高的鼠李糖脂。

Rhamnolipid fermentation medium and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
鼠李糖脂发酵培养基及其制备方法、应用
本专利技术涉及发酵工程领域，特别是涉及一种鼠李糖脂发酵培养基及其制备方法、应用。
技术介绍
鼠李糖脂主要是以铜绿假单胞菌发酵产生的一种生物表面活性剂，具有较强的表面和界面活性、低毒、可生物降解性，被广泛用于石油、环保、化工、食品、医药和农业等领域。鼠李糖脂为阴离子型表面活性剂，主要是由亲水型的碳水化合物和憎水型的长链脂肪酸或羟基脂肪酸以共价键形式结合而成，应用于肥料或农药助剂主要发挥其乳化、分散、润湿等作用。鼠李糖脂通常的生产方法是利用铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)以葡萄糖、植物油、磷酸氢二钾等原料培养基经发酵制备鼠李糖脂。农药助剂作为重要的新型功能性材料，在改善化肥产品品质、增加化肥产品功能、改进化肥施用效果和提高化肥利用率等方面具有不可或缺的作用，能协助传统化肥生产企业降低化肥生产能耗、提高化肥生产效率、增加企业经济效益、加快化肥产品结构调整和产业升级，对促进现代农业发展、提高资源利用率及改善化肥施用对环境的影响具有十分重要的意义。传统的鼠李糖脂发酵培养基原料组分的成本高，且制得的发酵液中鼠李糖脂产率低。
技术实现思路
基于此，提供一种能够提高鼠李糖脂产率且原料成本低廉的鼠李糖脂发酵培养基。一种鼠李糖脂发酵培养基，其包括如下质量份的原料组分：其中，所述镁盐选自硫酸镁、氯化镁和硝酸镁中的至少一种，所述钙盐选自氯化钙、硝酸钙和碳酸钙中的至少一种，所述碳源选自植物油和甘油中的至少一种。在其中一个实施例中，包括如下质量份的原料组分：在其中一个实施例中，所述植物油选自花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油、菜子油和炸货油中的至少一种。本专利技术提供一种鼠李糖脂发酵培养基的制备方法，其包括如下步骤：将本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的原料组分混合，灭菌处理后出料。在其中一个实施例中，在将本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的原料组分混合的步骤中，是将尿素、磷酸二氢钾、氯化钾、镁盐、钙盐与水混合至均匀得到混合液；向所述混合液中加入酵母、碳源。本专利技术还提供一种肥料助剂，所述肥料助剂的原料包括本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基或本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的制备方法制备得到的培养基。本专利技术还提供一种肥料助剂的制备方法，其包括如下步骤：将铜绿假单胞菌扩大培养制成种子液；按照种子液质量百分比5％-10％的接种量接入本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基中进行发酵得到发酵液；或按照种子液质量百分比5％-10％的接种量接入本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的制备方法制备得到的培养基中进行发酵得到发酵液；调节所述发酵液的pH至8.0-10.0，升温至80-100℃，保温、过滤得到肥料助剂。在其中一个实施例中，在将铜绿假单胞菌扩大培养制成种子液的步骤中，是将斜面菌种用接种环接入营养肉汤培养基中，所述斜面菌种为铜绿假单胞菌，扩大培养制成一级种子液，将所述一级种子液接入培养基扩大培养制成二级种子液。在其中一个实施例中，在将斜面菌种接入培养基扩大培养制成一级种子液的步骤中，是将所述斜面菌种接种于肉汤培养基中摇瓶培养8h-12h，培养温度为28-30℃。在其中一个实施例中，在将所述一级种子液接入培养基扩大培养制成二级种子液的步骤中，是将所述一级种子液按质量百分比1％-5％的接种量接入本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基中；或是将所述一级种子液按质量百分比1％-5％的接种量接入本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的制备方法制备得到的培养基中；摇瓶培养或通气培养24h-48h，培养温度为28-30℃。本申请的专利技术人对传统的鼠李糖脂发酵培养基的配方研究发现，传统的鼠李糖脂发酵培养基中多含有由磷酸二氢钾和磷酸氢二钾组成的双磷酸盐，不仅原料成本高，且铜绿假单胞菌不能够充分利用培养基中的营养物质，发酵制得的鼠李糖脂产率低。基于此，专利技术人对传统的鼠李糖脂发酵培养基配方进行改良，上述鼠李糖脂发酵培养基中各原料组分配比合理，经实验验证，铜绿假单胞菌能够充分利用此培养基为基础原料制得产率高的鼠李糖脂。此外，专利技术人选用价格低廉的磷酸二氢钾、尿素、氯化钾等作为鼠李糖脂发酵培养基的原料，大大降低了原料成本。附图说明图1为本专利技术实施例1、实施例3、对比例3与对比例4的肥料助剂中鼠李糖脂含量的比较图；图2为本专利技术实施例3、对比例1与对比例2的肥料助剂中鼠李糖脂含量的比较图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施例的限制。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。本专利技术一实施例中提供了一种鼠李糖脂发酵培养基，其包括如下质量份的原料组分：其中，所述镁盐选自硫酸镁、氯化镁和硝酸镁中的至少一种，所述钙盐选自氯化钙和碳酸钙中的至少一种，所述碳源选自植物油和甘油中的至少一种。在其中一个实施例中，本专利技术一实施例中提供了一种鼠李糖脂发酵培养基，其包括如下质量份的原料组分：在其中一个实施例中，所述酵母为成本低廉的食品级酵母粉、酵母膏和酵母提取物中的至少一种。在其中一个实施例中，所述植物油选自花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油、菜子油和炸货油中的至少一种。在其中一个实施例中，经实验验证，当所述钙盐为氯化钙时，铜绿假单胞菌经本申请的培养基发酵制备的鼠李糖脂比钙盐为碳酸钙时产量更高。在其中一个实施例中，尿素、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙均为肥料级试剂材料，酵母粉为食品级酵母粉，植物油选用炸货油，废油等，上述原料成本低廉可以降低成本且在同等条件下，对鼠李糖脂的产量并无明显影响。在其中一个实施例中，所述水为去离子水，经实验验证，选用去离子水时，铜绿假单胞菌经本申请的培养基发酵制备的鼠李糖脂产量更高。当然可以理解，所述水也可以为自来水。专利技术人对传统的鼠李糖脂发酵培养基配方进行改良，上述鼠李糖脂发酵培养基中各原料组分配比合理，经实验验证，铜绿假单胞菌能够充分利用此培养基为基础原料制得产率高的鼠李糖脂。此外，专利技术人选用价格低廉的磷酸二氢钾、尿素、氯化钾等作为鼠李糖脂发酵培养基的原料，大大降低了原料成本。本专利技术提供一种鼠李糖脂发酵培养基的制备方法，其包括如下步骤：将本专利技术任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的原料组分混合，灭菌处理后出料。在其中一个实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鼠李糖脂发酵培养基，其特征在于，包括如下质量份的原料组分：/n

【技术特征摘要】
1.一种鼠李糖脂发酵培养基，其特征在于，包括如下质量份的原料组分：



其中，所述镁盐选自硫酸镁、氯化镁和硝酸镁中的至少一种，所述钙盐选自氯化钙和碳酸钙中的至少一种，所述碳源选自植物油和甘油中的至少一种。


2.根据权利要求1所述的鼠李糖脂发酵培养基，其特征在于，包括如下质量份的原料组分：





3.根据权利要求1所述的鼠李糖脂发酵培养基，其特征在于，所述植物油选自花生油、豆油、亚麻油、蓖麻油和菜子油、炸货油中的至少一种。


4.一种鼠李糖脂发酵培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将权利要求1-3任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的原料组分混合，灭菌处理后出料。


5.根据权利要求4所述的鼠李糖脂发酵培养基的制备方法，其特征在于，在将权利要求1-3任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的原料组分混合的步骤中，是将尿素、磷酸二氢钾、氯化钾、镁盐、钙盐与水混合至均匀得到混合液；向所述混合液中加入酵母、碳源。


6.一种肥料助剂，其特征在于，所述肥料助剂的原料包括权利要求1-3任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基或权利要求4-5任一项所述的鼠李糖脂发酵培养基的制备方法制备得到的培养基。


7.一种肥料助剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将铜绿假单胞菌扩大培养制成种子液；

【专利技术属性】
技术研发人员：史正军，张祥胜，袁峰均，周一波，
申请(专利权)人：深圳市仙湖植物园管理处，盐城师范学院，
类型：发明
国别省市：广东;44