【技术实现步骤摘要】
一种红山茶花药离体培养获得再生植株的方法
本申请属于植物细胞工程领域，具体涉及一种红山茶花药离体培养获得再生植株的方法。
技术介绍
红山茶主要来自山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)红山茶组(SectCamellia)的物种及其品种，花红色，艳丽，具有极高的观赏价值，同时一些物种结实率和种仁含油率较高，还可以作为优质的木本食用油料。浙江红山茶(CamelliachekiangoleosaHu)，又称为浙江红花油茶，是我国山茶属(Camelliaspp.)的特有种，是一种优良的红山茶种。浙江红山茶耐寒，开花于早春，花朵硕大鲜艳且密集，果实酷似苹果，颜色鲜红或黄绿色，成熟时满树红果，具有极高的观赏价值。红花油茶具有很高的油用价值。红花油茶的种仁含油率高达60％左右，茶油中油酸的含量高达85％左右，其种仁含油率和油酸含量均显著高于普通油茶、攸县油茶、小果油茶、越南油茶等白花油茶物种。茶油是我国特有的木本食用油料，其富含油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸，有“东方橄榄油”之美誉，含有维生E、角鲨烯、甾醇等微量成分，是...
【技术保护点】
1.一种红山茶花药离体培养获得再生植株的方法，其特征在于，包括：将红山茶的花药进行低温预处理，愈伤组织诱导培养，分化培养和生根培养；其中，所述愈伤组织诱导培养采用暗培养；所采用的愈伤组织诱导培养基包括：激素组合，防褐变剂以及30-80g/L的蔗糖，所述激素组合为2,4-D、KT和TDZ组合，或2,4-D、6-BA和TDZ组合。/n
【技术特征摘要】
1.一种红山茶花药离体培养获得再生植株的方法，其特征在于，包括：将红山茶的花药进行低温预处理，愈伤组织诱导培养，分化培养和生根培养；其中，所述愈伤组织诱导培养采用暗培养；所采用的愈伤组织诱导培养基包括：激素组合，防褐变剂以及30-80g/L的蔗糖，所述激素组合为2,4-D、KT和TDZ组合，或2,4-D、6-BA和TDZ组合。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述低温预处理包括：将花药置于2-6℃，1-10天；优选地，低温预处理的温度为3-4℃，处理时间为3-7天。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养所采用的愈伤组织诱导培养基采用以下配方中的一种：
当花药取自山茶花时，配方包括：1/2的MS培养基、1.0-2.0mg/L的2,4-D、1.0-3.0mg/L的6-BA、0.5-2.00mg/L的TDZ、30-80g/L的蔗糖、7-9g/L的琼脂、200-500mg/L的水解酪蛋白、200-500mg/L的水解乳蛋白、80-200mg/L的脯氨酸、80-200mg/L的谷氨酰胺、80-200mg/L的甘氨酸、50-100mL/L的椰子水，以及防褐变剂，并调整pH为5.6-5.8；所述防褐变剂选自1-2g/L的交联聚维酮、100-500mg/L的维生素C或5-20mg/L的硝酸银中的至少一种；
当花粉粒取自红花油茶时，配方包括：MS基本培养基、0.5-2.0mg/L的2,4-D、0.1-2.0mg/L的KT、1-2.0mg/L的TDZ、30-80g/L的蔗糖、7-9g/L的琼脂、100-500mg/L的水解酪蛋白、100-500mg/L的水解乳蛋白、70-200mg/L的脯氨酸、70-200mg/L的甘氨酸、70-200mg/L的谷氨酰胺、40-100mL/L的椰子水，以及防褐变剂，并调整pH为5.5-5.8；所述防褐变剂选自1-2g/L的交联聚维酮、100-500mg/L的维生素C或5-20mg/L的硝酸银中的至少一种。
4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养的条件为:培养温度为25℃±2℃，培养30-50天；
优选地，当花药取自山茶花时，接种量为每皿80-300粒，每22-28天继代一次，培养30-40天；当花药取自红花油茶时，接种量为每皿100-400粒。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述分化培养所采用的分化培养基选自下述配方之一：
当花药取自红花油茶时，所述分化培养基包括：1/2的MS培养基、0.01-0.5mg/L的NAA、0.1-1mg/L的KT、0.001-0.1mg/...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶思诚，姚小华，卓仁英，王开良，马康荣，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院亚热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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