单独的和与程序性死亡受体1(PD-1)抗体组合的抗TIGIT抗体的稳定制剂及其使用方法技术

本发明专利技术涉及对具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)的抗体的稳定制剂，其任选地进一步含有抗人程序性死亡受体1(PD‑1)抗体或其抗原结合片段。还提供了用本发明专利技术的制剂治疗各种癌症和慢性感染的方法。

A stable preparation of anti tigit antibody and its application method

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】单独的和与程序性死亡受体1(PD-1)抗体组合的抗TIGIT抗体的稳定制剂及其使用方法
本专利技术涉及治疗性抗体的制剂及其在治疗各种病症中的用途。在一个方面，本专利技术涉及包含与具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)结合的抗体或其抗原结合片段的制剂。在另一方面，这种制剂进一步包含抗人程序性死亡受体1(PD-1)抗体或其抗原结合片段。还提供了用本专利技术的制剂治疗各种癌症和慢性感染的方法。相关申请的交叉引用本申请要求2017年5月2日提交的U.S.S.N.62/500,278的权益，其内容通过引用以其整体并入本文中。电子提交的序列表的引用本申请的序列表通过EFS-Web以ASCII格式的序列表电子提交，文件名为“24453WOPCT-SEQTXT-01MAY2018.TXT”，创建日期为2018年5月1日，大小为227Kb。通过EFS-Web提交的此序列表是说明书的一部分并通过引用以其整体并入全文中。
技术介绍
用于人类的抗体药物的恒定域氨基酸序列或可变域内的框架序列可能有所不同，但通常在CDR序列中差异最大。甚至与相同蛋白质、相同多肽或甚至潜在地相同表位结合的抗体可以包含完全不同的CDR序列。也可从人种系抗体序列或非人(例如啮齿类)种系抗体序列(例如在人源化抗体中)获得用于人类的治疗性抗体，从而导致潜在的CDR序列的进一步多样性。这些序列差异导致溶液中的稳定性不同以及对溶液参数的响应度不同。另外，氨基酸排列的微小变化或一个或几个氨基酸残基的变化可导致抗体稳定性和对序列特异性降解途径的敏感性显著不同。结果，目前尚无法预测优化抗体稳定性所需的溶液条件。必须分别研究每种抗体，以确定最佳的溶液制剂。Bhambhani等人(2012)J.Pharm.Sci.101:1120。抗体也是相对较高分子量的蛋白质(～150,000Da)，例如与其他治疗性蛋白质(诸如激素和细胞因子)相比。结果，常常需要相对高体重含量(weightamount)的抗体药物剂量以获得期望的药物摩尔浓度。另外，通常期望皮下施用抗体药物，因为这使得能够自我施用(self-administration)。自我施用避免了与访问医疗机构进行施用(例如静脉内)相关的时间和费用。皮下递送受单次注射中在注射部位可实际递送的溶液体积限制，其通常为约1至1.5ml。通常使用充满药物的液体溶液制剂而不是冻干形式的预先填充注射器或自动注射器来完成皮下自我施用，以避免需要患者在注射之前重悬药物。抗体药物在储存期间必须是稳定的以确保功效和一致的剂量，因此至关重要的是，无论选择哪种制剂，均应支持所需的特性，例如高浓度、透明度和可接受的粘度，并且还应在典型的存储条件下在可接受的长保质期内保持这些特性和药物功效。TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)是一种主要在活化T细胞和NK细胞上表达的免疫调节受体。TIGIT也称为VSIG9；VSTM3；和WUCAM。它的结构显示一个细胞外免疫球蛋白结构域、1型跨膜区和两个ITIM基序。TIGIT形成由T细胞上的阳性(CD226)和阴性(TIGIT)免疫调节受体和APC上表达的配体(CD155和CD112)组成的共刺激网络的一部分。TIGIT结构的重要特征是在其胞质尾结构域中存在基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)。与PD-1和TIGIT一样，TIGIT胞质区中的ITIM结构域预计会募集酪氨酸磷酸酶，诸如SHP-1和SHP-2，随后用T细胞受体(TCR)亚基上的基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)将酪氨酸残基去磷酸化。因此，TIGIT与肿瘤细胞或TAMS表达的受体-配体CD155和CD112的接合可能参与了TCR信号传导和T细胞活化的抑制，可能参与了TCR信号传导和T细胞活化对建立有效抗肿瘤免疫而言是必需的。因此，对TIGIT具有特异性的拮抗剂抗体可抑制CD155和CD112诱导的T细胞反应的抑制并增强抗肿瘤免疫。存在用于药物用途例如用于治疗各种癌症和传染病的抗TIGIT抗体的稳定制剂，以及与抗人PD-1抗体共同配制的抗TIGIT抗体的稳定制剂的需求。优选地，这样的制剂将表现出长的保质期，在存储和运输时是稳定的，以及将优选地在用于自我施用的药物存储的典型条件下，即在注射器中在冰箱温度下，在数月至数年中表现出稳定性，从而导致相应药品的保质期长。专利技术概述在一个方面，本专利技术包括抗TIGIT抗体或其抗原结合片段的制剂，其包含(i)抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；(ii)缓冲液，(iii)非还原性糖；(iv)非离子表面活性剂；和(v)抗氧化剂。在一个实施方式中，所述制剂进一步包含抗PD-1抗体，例如，派姆单抗(pembrolizumab)或纳武单抗(nivolumab)。在另一实施方式中，所述制剂包含螯合剂。在本专利技术的一个实施方式中，所述制剂包含(i)约10mg/ml至约200mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；(ii)约5mM至约20mM缓冲液；(iii)约6％至约8％重量/体积(w/v)非还原性糖；(iv)约0.01％至约0.10％(w/v)非离子表面活性剂；和(v)约1mM至约20mM抗氧化剂。在一个实施方式中，所述制剂进一步包含抗PD-1抗体，例如，派姆单抗或纳武单抗。在另一实施方式中，所述制剂进一步包含螯合剂。在一个实施方式中，所述制剂的pH在4.5-6.5之间。在特定的实施方式中，所述制剂的pH为约pH5.5至约pH6.2。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约pH5.6至约pH6.0。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约5.7。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约5.8。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约5.9。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约6.0。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约6.1。在另一实施方式中，所述制剂的pH为约6.2。在所述制剂的一个实施方式中，所述缓冲液为L-组氨酸缓冲液或乙酸钠，所述非还原性糖为蔗糖，所述非离子表面活性剂为聚山梨酯80，并且所述抗氧化剂为蛋氨酸或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，所述抗氧化剂为L-蛋氨酸。在另一实施方式中，所述抗氧化剂为L-蛋氨酸的药学上可接受的盐，例如，蛋氨酸HCl。在另一实施方式中，所述制剂包含(i)约10mg/ml至约200mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；(ii)约5mM至约20mM的L-组氨酸缓冲液或约5mM至约20mM的乙酸钠缓冲液；(iii)约6％至约8％w/v蔗糖；(iv)约0.01％至约0.10％(w/v)聚山梨酯80；和(v)约1mM至约20mML-蛋氨酸。在另一实施方式中，所述制剂进一步包含抗PD-1抗体，例如，派姆单抗或纳武单抗。在一个实施方式中，所述制剂进一步包含螯合剂。在一个实施方式中，所述螯合剂的存在量为约1μM至约50μM。在一个实施方式中，所述螯合剂为DTPA。在另一实施方式中，所述螯合剂为EDTA。在一个实施方式中，所述缓冲液为L-组氨酸缓冲液。在一个实施方式中，所述制剂包含约8mM至约12mM的L-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制剂，其包含：/n(i)约10mg/ml至约200mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；/n(ii)约5mM至约20mM缓冲液；/n(iii)约6％至约8％重量/体积(w/v)非还原性糖；/n(iv)约0.01％至约0.10％(w/v)非离子表面活性剂；和/n(v)约1mM至约20mM抗氧化剂。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170502 US 62/500,2781.一种制剂，其包含：
(i)约10mg/ml至约200mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；
(ii)约5mM至约20mM缓冲液；
(iii)约6％至约8％重量/体积(w/v)非还原性糖；
(iv)约0.01％至约0.10％(w/v)非离子表面活性剂；和
(v)约1mM至约20mM抗氧化剂。


2.权利要求1所述的制剂，其中所述抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含三个轻链CDR和三个重链CDR，所述三个轻链CDR包括SEQIDNO：111的CDRL1、SEQIDNO：112的CDRL2、SEQIDNO：113的CDRL3并且所述三个重链CDR包括SEQIDNO：108的CDRH1、SEQIDNO：154的CDRH2和SEQIDNO：110的CDRH3。


3.权利要求1或2所述的制剂，其中所述抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含包含SEQIDNO：148的重链可变区和包含SEQIDNO：152的轻链可变区。


4.权利要求3所述的制剂，其中所述抗TIGIT抗体包含(i)包含SEQIDNO：291的氨基酸序列的人重链IgG1恒定域和包含SEQIDNO：293的氨基酸序列的人κ轻链恒定域；或(ii)包含SEQIDNO：292的氨基酸序列的人重链IgG4恒定域和包含SEQIDNO：293的氨基酸序列的人κ轻链恒定域。


5.权利要求1-4中任一项所述的制剂，其中所述制剂的pH在5.3和6.2之间。


6.权利要求1-5中任一项所述的制剂，其中所述缓冲液为L-组氨酸缓冲液，所述非还原性糖为蔗糖，所述非离子表面活性剂为聚山梨酯80，并且所述抗氧化剂为L-蛋氨酸，所述制剂包含：
(i)约10mg/ml至约200mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；
(ii)约5mM至约20mM的L-组氨酸缓冲液；
(iii)约6％至约8％(w/v)蔗糖；
(iv)约0.01％至约0.10％(w/v)聚山梨酯80；和
(v)约1mM至约20mML-蛋氨酸。


7.权利要求1-6中任一项所述的制剂，其包含约8mM至约12mM的L-组氨酸缓冲液。


8.权利要求6-7中任一项所述的制剂，其包含约5mM至约10mML-蛋氨酸。


9.权利要求6-8中任一项所述的制剂，其包含重量比为约0.02％w/v聚山梨酯80。


10.权利要求1-9中任一项所述的制剂，其包含约10mg/ml至约100mg/ml的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段。


11.权利要求10所述的制剂，其中所述抗TIGIT抗体或其抗原结合片段的浓度为约10mg/ml、12.5mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、75mg/ml或100mg/ml。


12.权利要求1-11中任一项所述的制剂，其包含约25mg/mL的抗TIGIT抗体、10mML-组氨酸缓冲液、约7％w/v蔗糖、约0.02％聚山梨酯80和约10mML-蛋氨酸。


13.权利要求1-11中任一项所述的制剂，其包含约50mg/mL的抗TIGIT抗体、10mML-组氨酸缓冲液、约7％w/v蔗糖、...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·德，C·N·纳拉西曼，
申请(专利权)人：默沙东公司，
类型：发明
国别省市：美国;US