基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用技术

本发明专利技术提供基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用。本发明专利技术通过设计检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对，该引物对由引物RPA‑CCYV‑F和引物RPA‑CCYV‑R组成或由引物Q‑CCYV‑F和引物Q‑CCYV‑R组成。继而成功实现基于RPA技术对瓜类褪绿黄化病毒靶标基因的扩增，本发明专利技术检测方法为基于RPA技术，可用于特异性检测瓜类褪绿黄化病毒，该方法操作简便，灵敏度高，反应条件温和，反应时间短，能满足口岸和田间检测的基本需求。

Rapid detection of melon chlorosis virus based on RPA

【技术实现步骤摘要】
基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用
本专利技术属于生物检测
，具体涉及基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbitchloroticyellowsvirus，CCYV)属于长线型病毒科(Closterovirida)毛形病毒属(Crinivirus)，主要通过烟粉虱以半持久性方式传播。CCYV最早于2004年被日本学者在温室的甜瓜中发现，但是其基因组结构直到2010年才被揭示。目前，该病毒在苏丹、黎巴嫩、伊朗、希腊、埃及、沙特阿拉伯等国家陆续被检测出。2011年，在中国上海市、浙江省、山东省检测到CCYV，随后河南、海南、新疆、湖南、广西等省区也陆续发现该病毒。CCYV主要侵染甜瓜、黄瓜、西瓜等作物，引起的病害症状为叶片褪绿、黄化但是叶脉仍然保持绿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对，其特征在于，所述引物对由引物RPA-CCYV-F和引物RPA-CCYV-R组成；或，由引物Q-CCYV-F和引物Q-CCYV-R组成；/n所述RPA-CCYV-F为SEQ ID NO.1所示的单链DNA分子；/n所述RPA-CCYV-R为SEQ ID NO.2所示的单链DNA分子；/n所述Q-CCYV-F为SEQ ID NO.3所示的单链DNA分子；/n所述Q-CCYV-R为SEQ ID NO.4所示的单链DNA分子。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对，其特征在于，所述引物对由引物RPA-CCYV-F和引物RPA-CCYV-R组成；或，由引物Q-CCYV-F和引物Q-CCYV-R组成；
所述RPA-CCYV-F为SEQIDNO.1所示的单链DNA分子；
所述RPA-CCYV-R为SEQIDNO.2所示的单链DNA分子；
所述Q-CCYV-F为SEQIDNO.3所示的单链DNA分子；
所述Q-CCYV-R为SEQIDNO.4所示的单链DNA分子。


2.一种用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂，其特征在于，所述用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂含有权利要求1所述引物对。


3.如权利要求2所述的用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂，其特征在于，所述检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂中的引物对由引物Q-CCYV-F和引物Q-CCYV-R组成时，所述重组酶聚合酶扩增试剂还包括荧光探针CCYV-P，所述荧光探针CCYV-P如SEQIDNO.5所示。


4.如权利要求2所述的用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂，其特征在于，用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂还包括缓冲液、醋酸镁和无菌水。


5.一种检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂盒，其特征在于，所述用于检测瓜类褪绿黄化病毒的重组酶聚合酶扩增试剂盒含有权利要求1或2所述引物对或权利要求3或4所述重组酶聚合酶扩增试剂。


6.权利要求1或2所述所述引物对或权利要求3或4所述重组酶聚合酶扩增试剂或权利要求5所述重组酶聚合酶扩增试剂盒在如下A1-A6中任一项中的应用：
(A1)检测或...

【专利技术属性】
技术研发人员：竺晓平，臧连毅，赵静，刘永光，代惠洁，乔宁，
申请(专利权)人：山东农业大学，潍坊学院，潍坊科技学院，
类型：发明
国别省市：山东;37