一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途技术方案

本发明专利技术提供了一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途，涉及基因工程技术领域。本发明专利技术所述基因TpUBC9的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因TpUBC9编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术通过酵母双杂交技术首次筛选到豆状带绦虫亮氨酸氨基肽酶TpLAP的互作蛋白基因TpUBC9，并克隆了TpUBC9基因的全长cDNA，并验证了TpUBC9‑TpLAP相互作用，证实带绦虫虫体内也存在精细的SUMO化修饰系统；为进行后续带绦虫SUMO化修饰相关研究提供了新的线索。将其制备成TpUBC9抗体免疫磁珠，具有特异性好，亲和性高，操作便捷，结果可靠等特点。

A sumo modified system gene tpubc9 of Taenia bean and its application

【技术实现步骤摘要】
一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途。
技术介绍
豆状带绦虫(Taeniapisiformis)是一种常见的犬科动物肠道寄生虫，属于带科(Taeniidae)带属(Taenia)绦虫。其生活史需要转换2个宿主完成，成虫通常寄生于犬类小肠内，豆状囊尾蚴则寄生于兔类肝脏、胃网膜、肠系膜等部位。在我国，家兔平均感染率高达40％，死亡率4.0％～23.69％，严重影响兔产品质量及威胁我国养兔业的发展。目前，我国对带绦虫/蚴病的防治仍面临很大的难题，亟需筛选和挖掘特异药物靶标及疫苗候选分子，为该类寄生虫病的有效防控和根治提供新手段。SUMO化修饰对哺乳动物和寄生虫的生长发育是不可或缺的，其中UBC9是SUMO化修饰途径中唯一的E2结合酶，底物蛋白的SUMO化必须依赖于UBC9的表达。研究表明，敲除秀丽隐杆线虫UBC9基因后可导致胚胎发育迟缓，幼虫咽部肌肉、性腺和尾部严重发育畸形，最终导致无法正常产卵以及生殖孔破裂。果蝇UBC9缺失本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9，其特征在于，所述基因TpUBC9的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因TpUBC9编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9，其特征在于，所述基因TpUBC9的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述基因TpUBC9编码蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。


2.一组克隆权利要求1所述基因TpUBC9的引物对，其特征在于，所述引物对包括正向引物TpUBC9F321和反向引物TpUBC9R487，所述正向引物TpUBC9F321的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述反向引物TpUBC9R487的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。


3.一种扩增权利要求1所述基因TpUBC9的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将豆状带绦虫的总RNA为模板，反转录后得到cDNA第一链；
(2)以所述cDNA第一链为模板，以权利要求2所述引物对为引物进行cDNA末端快速扩增，得PCR目的基因；所述扩增的程序为：94℃30s，72℃3min，5个循环；94℃30s，70℃30s，72℃3min，5个循环；94℃30s，68℃30s，72℃3min，25个循环；
(3)胶回收所述PCR目的条带，连接至pMD19-T载体并转化E.coliDH5a感受...

【专利技术属性】
技术研发人员：张少华，才学鹏，骆学农，郭爱疆，王帅，侯俊玲，梁盼红，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62