一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法及固定化菌剂技术

本发明专利技术属于生物技术领域，尤其涉及一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法及固定化菌剂，具体制备方法包括以下步骤：其由Gordonia alkanivorans W33(菌种保藏号，CGMCC No.6845)菌悬液和作为载体的蛭石组成，Gordonia alkanivorans W33菌悬液与蛭石的体积/质量比为：每10‑30ml的菌悬液中加入10g的蛭石粉；最终每克固定化菌剂含有(2.0‑5.0)×10

Preparation and immobilization of a kind of bacteria for petroleum hydrocarbon degradation

【技术实现步骤摘要】
一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法及固定化菌剂
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法及固定化菌剂。本专利技术中所称石油烃降解菌W33(Gordoniaalkanivorans)分类命名：Gordoniaalkanivorans(食烷烃戈登氏菌)，已于2012年11月21日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，保藏编号为CGMCCNo.6845，并已存活。
技术介绍
现有技术和缺陷：含油固废是油田开发过程中产生的主要污染物，通常成分性质极度复杂、乳化严重、脱水难、处理难度大。随着多数油田的深度开采，原油开采过程中添加了各种化学药剂，使得含油固废中原油、各类污染物与泥砂之间的桥联结构愈加稳固，其成分、结构愈加复杂，处理难度也随之加大。目前，所采用的含油固废处理方法，主要有化学法、物理法及生物法。相较于物理、化学方法，生物修复以费用低，对环境影响低，无二次污染等优势被广泛关注。固定化微生物技术是将特定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法，其特征在于，所述石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法包括以下步骤：/n步骤一：菌悬液的制备：利用GordoniaalkanivoransW33的单菌落制备GordoniaalkanivoransW33发酵液，每毫升所述GordoniaalkanivoransW33菌悬液中含有(2.0～4.0)×10

【技术特征摘要】
1.一种石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法，其特征在于，所述石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一：菌悬液的制备：利用GordoniaalkanivoransW33的单菌落制备GordoniaalkanivoransW33发酵液，每毫升所述GordoniaalkanivoransW33菌悬液中含有(2.0～4.0)×109CFU的GordoniaalkanivoransW33菌体，最后稀释制备菌悬液，每毫升所述GordoniaalkanivoransW33菌悬液中含有(2.0～4.0)×108CFU的GordoniaalkanivoransW33菌体；
步骤二：固定化载体原料的准备：将固定化载体原料用研磨粉碎，过80-100目筛，清水洗净，于100～110℃烘箱中放置3～5h，取出冷却备用；
步骤三：将步骤二制得的Ag固定化载体原料加入步骤一制得的A-3AmlGordoniaalkanivoransW33菌悬液中，其中A为正数，搅拌均匀，并干燥至含水率低于15％，获得石油烃降解菌固定化菌剂。


2.根据权利要求1所述的石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤一中菌悬液的制备方法包括以下步骤：
步骤一：挑取GordoniaalkanivoransW33的单菌落接种于装有30-50mlTSB液体培养基的摇瓶中，置于温度为30～35℃，转速为150-200rpm的恒温振荡培养箱中振荡培养20～90h，制备发酵液；
步骤二：通过加水稀释制备菌悬液，使GordoniaalkanivoransW33菌悬液中含有(2.0～4.0)×108CFU的GordoniaalkanivoransW33菌体。


3.根据权利要求2所述的石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法，其特征在于：所述TSB液体培养基的配方为：在1升水中加入葡萄糖5g，胰蛋白胨17g，大豆蛋白胨3g，磷酸氢二钾4g，0.09mMMgCl2，0.06mMCaCL2。


4.根据权利要求2所述的石油烃降解菌固定化菌剂的制备方法，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨庭，杨勇，肖成磊，郭兵，白鹤，王新新，王永林，卢文玉，
申请(专利权)人：中海石油环保服务天津有限公司，天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12